Il sistema di alimentazione di Aplysia è stato a lungo utilizzato come sistema modello per lo studio del controllo motorio e della biomeccanica del corpo morbido. Tuttavia, i muscoli in profondità all'interno dell'afferratore di alimentazione sono stati inaccessibili alla manipolazione in vivo. Questo intervento chirurgico ci consente di accedere a questi muscoli in animali che si comportano altrimenti intatti.
Questo non solo ci consente l'accesso in vivo per la prima volta, ma la tecnica prevede una singola incisione a una singola parte di una lumaca, il che significa che i danni alle altre regioni sono relativamente piccoli. La migliore preparazione è quella di fare un'attenta dissezione della massa buccale e conoscere a fondo l'anatomia. Seleziona un animale attivo offrendole alghe e confermando che gli intervalli di morso non sono superiori a cinque secondi.
10 minuti dopo l'anestesia, tentare delicatamente di inserire un perno nella branchia e nel rinoforo, verificando che questi non si ritrarranno per garantire un'anestesia sufficiente. Assicurarsi che le labbra della lumaca siano lisce, indicando che le mascelle sono completamente rilassate. In questo modo, l'odontoforo è esposto.
Nel caso in cui la ruga appaia sulle labbra, le labbra e la mascella dell'animale non sono sufficientemente rilassate per la procedura chirurgica. Fare riferimento al manoscritto per suggerimenti sull'indurre il rilassamento delle labbra. Posizionare la lumaca in modo che la testa pende verso il basso, permettendo alla massa del buccale di depositarsi contro le mascelle.
Applicare la pressione con il pollice e l'indice per spingere la massa del buccale verso le mascelle, tenendo la massa del buccale in posizione. Ruotare la mascella in modo che siano visibili. Allo stesso tempo, mantenere la pressione sulla massa buccale in modo che la mente della massa del buccale sia visibile attraverso le mascelle.
Lavorare delicatamente le punte delle forcep smussate nella fessura dell'odontoforo e usarle per far leva sulla superficie radulare attraverso le mascelle. Se le ganasce non sono sufficientemente rilassate, utilizzare le forcep per afferrare delicatamente il bordo della fessura per assistere questo processo. Una volta esposta la superficie, lavorare le ganasce liberamente dalla porzione anteriore della superficie radulare lungo tutto il perimetro.
Ciò rende l'odontoforo meno probabile che si ritrae. Assicurarsi che non più della metà delle pareti dell'odontoforo sia esposta. Una volta che la superficie radulare è completamente esposta, disporre la lumaca sotto un microscopio a dissezione per l'intervento chirurgico.
Per gli scienziati con meno esperienza, utilizzare un ampio elastico e una terza mano per stabilizzare le mascelle e la superficie radulare per l'intervento chirurgico. Posizionate la superficie radulare in modo che il lato sinistro sia di fronte all'investigatore. Afferrare delicatamente la superficie radulare vicino alla base radulare in modo che una piega orizzontale sia creata perpendicolare alla piega anatomica.
Usa le forbici fini per tagliare questa piega, facendo un'incisione lungo la piega anatomica. Estendere questa incisione iniziale a tre o cinque centimetri per consentire l'accesso all'interno della massa buccale. Regolare la luce in modo che punti direttamente indietro attraverso questa incisione.
Parte i bordi dell'incisione in modo che la parte posteriore del lume dell'odontoforo e i sottili filamenti verticali del muscolo I7 siano visibili. Raggiungi l'incisione. Afferra entrambi i fili di I7 e tirali su attraverso l'incisione, dove la maggior parte del muscolo può essere tagliata via quanto è pratico.
Dopo aver eseguito le lesioni, afferrare i tentacoli anteriori e spingerli verso il basso sulla superficie radulare per riportare la lumaca alla sua configurazione originale. Posizionare gli animali post-chirurgici in un ambiente protetto con un buon flusso d'acqua. Assicurati che gli animali siano vigili e reattivi il giorno dopo l'intervento chirurgico.
Il primo o il secondo giorno dopo l'intervento chirurgico, gli animali iniziano a nutrirsi. Per eseguire la lesione della fibra sub-radulare dopo l'incisione chirurgica, inserire la punta di una piccola lama di bisturi dritta attraverso l'incisione con il bordo affilato angolato verso l'alto. Raschiare delicatamente le fibre muscolari fini dalla parte inferiore della superficie radulare.
Quindi, eseguire le cure post-operatorie come in precedenza. In questo studio anatomico, le lesioni fittizie non hanno avuto alcun effetto significativo sulla larghezza dell'apertura al culmine del mordere. Mentre sia le lesioni fibrose I7 che quelle sub-radulari hanno ridotto significativamente la larghezza del morso.
La cosa più importante da ricordare è che le labbra e le mascelle dell'animale sono completamente rilassate prima di tentare di spingere l'afferratore attraverso le mascelle. Molto probabilmente, sia I7 che le fibre sub-radulari sono muscoli multifunzionali e abbiamo identificato solo alcuni aspetti del comportamento a cui contribuiscono. Inoltre, questa tecnica di prolungare l'odontoforo dà accesso a intere porzioni dell'anatomia che prima erano inaccessibili.
Oltre ad aprire regioni anatomiche e biomeccanica del corpo morbido, speriamo che questo possa servire da base per altri investigatori che stanno lavorando con strutture morbide che potrebbero essere altrimenti difficili da indagare.
