新生児マウスにおける左心室構造、機能、冠動脈流の心エコー特性評価

要約

本プロトコルは、7日齢の新生児マウスにおける左心室の形態、機能、および冠状動脈血流の心エコー検査評価について説明しています。

要約

心エコー検査は、心血管疾患の動物モデルにおける構造的および機能的パラメータの評価を可能にする非侵襲的手順であり、前臨床試験における潜在的な治療の影響を評価するために使用されます。心エコー検査は通常、若年成人マウス(すなわち、4〜6週齢)で行われる。初期の新生児心血管機能の評価は、マウスの子犬のサイズが小さいこととそれに関連する技術的困難のために、通常は行われません。最も重要な課題の1つは、子犬の手足の長さが短いため、心エコー検査プラットフォームの電極に到達できないことです。子犬は体温の変化に非常に敏感であるため、体温はもう一つの課題です。したがって、研究者が早期の病理学的変化を検出し、時間の経過とともに心血管疾患の進行を研究するのに役立つ、小型マウスの子犬で心エコー検査を行うための実用的なガイドを確立することが重要です。現在の研究では、生後7日の若さでマウスの子犬に心エコー検査を行うためのプロトコルについて説明しています。新生児マウスにおける心臓の形態、機能、および冠状動脈の流れの心エコー検査の特徴についても説明します。

概要

このプロトコルの全体的な目標は、心臓の形態、機能、および冠状動脈の流れを調べることです 心エコー検査を使用して、生後7日齢の新生児マウスの子犬。この技術の開発の背後にある理論的根拠は、心臓病のマウスモデルにおける冠動脈の流れと心機能の早期変化を決定することです¹。心エコー検査の非侵襲的性質は、研究者が生理学的条件下で心血管機能を評価することを可能にし、心血管疾患を治療するための標的療法の研究のためのスクリーニングツールを研究者に提供するため、有利です^2,3。伝統的に、心エコー検査は若年成人マウス(4〜6週間)を用いて行われる。しかし、いくつかのマウスモデル(すなわち、遺伝子改変モデル)は、この年齢ですでに病理学的変化および心機能障害を示す。したがって、動物モデルを用いた心臓研究は、主に心機能障害を改善または治療する治療薬に焦点を当ててきました。対照的に、最近では、研究努力は心臓病の予防措置と早期介入に焦点を当てるようにリダイレクトされています⁴。

以前の研究では、新生児マウスの心筋梗塞のモデルで心機能を測定するための心エコー検査の使用が説明されています^5,6

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プロトコル

すべての実験は、イリノイ大学シカゴ校の動物管理および使用委員会によって承認されました。実験には、7日齢のFVB/Nマウスを用いた。プロトコルは、マウスの準備、心エコー検査の画像取得、および画像診断後の動物の世話に分けられます。

1.マウスの準備

1. 飼育ケージから7日齢のマウスを入手します。
   注: この幼い頃、身体検査によって動物の性別を判断することは困難です。
2. ECGゲル( 材料の表を参照)を温めたプラットフォーム電極パッドに置きます。電極パッドの上にアルミホイルストリップ(~1.5インチx 0.25インチ)を配置して電極範囲を広げ、テープで固定します(図1A)。続いて、ECGゲルをアルミホイルストリップの上に置きます。
   注意: 手順中にアルミホイルストリップの下のゲルが乾かないようにしてください。その場合は、導電性を維持するためにゲルを追加します。
3. ニトリル手袋から指を切り取り、片側のイソフルラン/酸素ノーズコーンと反対側のマウスノーズの両方を覆うように取り付けます(図1B)。
4. マウスの子犬をイソフルラン誘導チャンバーに入れ、100%酸素で駆動される2.5%濃度でイソフルランの送達を開始します(

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結果

この研究では、7日齢のマウスの子犬を使用して、心臓の形態、機能、および冠状動脈の流れを特徴付けました。マウスの取り扱いは注意して行う必要があり、図1に示すように、マウスプラットフォームは子犬の小さなサイズに適合させる必要があります。PLAXビューの代表的な画像を図2Aと補足ビデオ1に示します。このビューでは、M?.......

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ディスカッション

予防医学の時代には、心血管機能の変化を早期に評価して、病気の発症を確立し、適切な介入療法を設計する必要があります。マウスは心臓研究の前臨床モデルとしてますます使用されており、心エコー検査は通常、若年成人マウスで行われます。しかし、心疾患の初期段階における遺伝的変化または薬理学的介入の役割を研究するためには、心エコー画像診断を人生の早い段階で開始する?.......

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資料

Name	Company	Catalog Number	Comments
Depilating agent	Nair Hair Remover
Electrode gel	Parker Laboratories	15-60
High Frequency Ultrasound	FUJIFILM VisualSonics, Inc.	Vevo 2100
Isoflurane	MedVet	RXISO-250
Linear array high frequency transducer	FUJIFILM VisualSonics, Inc.	MS550D
Mice breeding pair	Charles River Laboratories	FVB/N	Strain Code 207
Ultrasound Gel	Parker Laboratories	11-08
Vevo Lab Software	FUJIFILM VisualSonics, Inc.		Verison 5.5.1