Imaging Transverse Sections of Maize Leaf Primordia

小さなナイフまたははさみを使用して、中胚軸組織で目的の熟成トウモロコシの苗を切ることから始めます。絵筆で苗をきれいにします。次に、ワイヤーストリッパーの顎をシュートに向けて保持します。

選択した穴にシュートを配置し、ストリッパーハンドルを一緒に握ります。ストリッパーをシュートからスライドさせて、葉の上部をトリミングします。定規を使用して、原基の先端からシュートの基部までの長さを測定します。

葉の原基イメージングを開始するには、実体顕微鏡下で約0.8倍の倍率で滑らかな表面にシュートをしっかりと保持します。かみそりの刃またはメスを使用して、ターゲット領域の少し上に最初のカットを行い、シュートの遠位部分を破棄します。次に、原基の長さに沿って目的のポイントで約0.25〜0.8ミリメートルの薄い切片を取得します。

完了したら、リーフセクションをきれいなスライドガラスに取り付けます。ピペットを使用して、数滴の水を切片に直接塗ります。そして、カバースリップを上に置きます。

必要に応じて、カバースリップの端からさらに数滴を塗ります。スライドを落射蛍光顕微鏡のステージに置き、蛍光色素を可視化するように設定を調整します。この方法を用いて、切片化前に原基を測定することにより、チャンス切除サンプリングを標準化した。

消失したタッセル2は、通常よりも広い原基とより多くの静脈を持っていることを示す傾向が発見され、突然変異体の欠陥が葉の発達の初期に始まったことを示しています。この方法により、葉原基におけるホルモン応答蛍光タンパク質レポーターの発現パターンの系統的検討も可能になりました。