まず、ブタの肺組織を室温で4%パラホルムアルデヒドで48時間固定します。次に、0.01%アジ化ナトリウムを含む30ミリリットルのPBSを含む50ミリリットルの円錐形チューブに肺組織を移します。プラスチックカップ、細かい鉗子、滅菌ハサミを用意しておいてください。
アガロースを沸点に達するまで電子レンジで加熱します。その後、水浴で摂氏42度まで冷やします。使用する準備ができるまで、ウォーターバスに保管してください。
PBSアジド溶液から肺生検を除去します。細かい鉗子と滅菌ハサミを使用して、肺葉を慎重に小さなブロックに解剖します。次に、プラスチックカップの真ん中を切り取ります。
カップの底に少量のアガロースを注ぎます。50ミリリットルの円錐形チューブの蓋を、縁を外してアガロの表面に置きます。このセットアップを摂氏4度で5分間保存し、アガロースが固まるようにします。
アガロースが固まったら、プラスチックカップを冷蔵庫から取り出します。次に、約1ミリリットルの液体アガロースを蓋に注ぎます。次に、肺組織ブロックを蓋の上にそっと置きます。
アガロースが半固化したら、肺組織を液体アガロースにゆっくりと浸します。アガロースが固まるまで、摂氏4度で約15分間冷蔵します。鋭利な刃を使用して、肺組織を取り巻く余分なアガロースを慎重に取り除きます。.
