ゼブラフィッシュ胚の調製と胚に対する神経筋毒性および一般毒性試験のための化学物質

まず、卵割段階、特に自然産卵から2細胞期から8細胞期までの胚を10センチメートルのシャーレに集めます。未受精卵、破片、鱗屑をペトリ皿から取り除いてきれいにします。15ミリリットルのE3培地を含むペトリ皿1枚あたり60個の胚を配置します。

胚を含むすべての皿を、水に浸したペーパータオルで調製した加湿チャンバーに入れます。次に、受精後72時間、摂氏28.5度に設定されたインキュベーターでインキュベートします。次に、マイナス20°Cの冷凍庫から目的の薬液を取り出し、解凍します。

ガラス瓶内のE3培地で各化学物質の段階希釈液を調製します。溶液に沈殿物がないか検査し、存在する場合は記録します。次に、さらに希釈して、次に高い濃度にします。

確認して、降水量がなくなるまで繰り返します。次に、曝露溶液のpHを確認して記録します。pH7.0〜8.5の範囲外の場合は、塩酸または水酸化ナトリウムで7.4に調整してください。

未使用の露光メディアは、地域の規制に従って廃棄してください。