マウスの門脈と下大静脈からの血液の順次採取

マウスを麻酔した後、加熱された手術面に仰臥位に置きます。目の軟膏を塗布し、つま先パッドのつまみを行って、動物が適切に麻酔されていることを確認します。腹部の皮膚を持ち上げます。

はさみで、臍から剣状突起までの正中線で縦方向に切開し、腹部の基部に向かって尾側に切開します。腸、横隔膜、または肝臓に穴を開けたり損傷したりすることなく、腹膜に同様の切開を行います。次に、臍の両側に全長の横切開を行い、術野を広げます。

次に、温かいPBSに浸した清潔なガーゼを使用して、大腸と小腸を右に動かし、下のIVCを露出させます。綿棒を使用して、手術野内の腸セグメントを優しく操作して、腸間膜の根元にある門脈を見つけます。次に、解剖顕微鏡を使用して、肝門門近くの門脈の後ろに7-0プロレン縫合糸を慎重に通過させます。

次に、ヘパリン処理された1立方センチメートルのインスリン注射器の28ゲージ半インチの針をIVCに挿入します。0.2〜0.3ミリリットルの血液サンプルを採取します。抜去時に発生する出血を避けるために、針をIVCの中に置いておきます。

次に、7-0プロレン結紮糸を門脈の周りにそっと結びます。別のヘパリン化インスリン注射器の28ゲージ半インチ針を門脈に挿入します。吸引して、門脈から最大0.5ミリリットルの血液をゆっくりと収集します。

採血が完了したら、IVCと門脈から針を取り外してください。血液サンプルを注射器から1.5ミリリットルのヘパリンチューブに移します。将来の処理のためにチューブを氷の上に置きます。