まず、麻酔をかけた動物の手足をテープで固定します。電気カミソリを使用して、下腹部と尿道口の周りの毛を剃ります。手術用顕微鏡で、Metzenbaumのストレートブラントハサミを使用して、腹部の骨盤皮膚の正中線に1〜2センチメートルの切開を作成します。
正中線の筋膜と筋肉を切開して、切開創から膀胱を露出させます。膀胱が傷口から見えるようになったら、必要に応じて周囲の臓器や組織を引っ込めて、手術野がはっきりと見えるようにします。次に、膀胱ドームをつかみ、テーパーチップ針付きの5-0非吸収性モノフィラメント縫合糸を使用して巾着を置きます。
マイクロハサミを使用して、巾着のひもの内側に小さな膀胱瘻造設術を作成し、尿が流出するまで穴を開けます。次に、カテーテルの丸い先端をつかみ、穴に挿入します。チューブの先端が穴を通過したら、チューブの周りに巾着のひもを縫合します。
その後、先端が縫合糸の下に感じられるまでチューブをゆっくりと外側に引っ張ります。次に、チューブのもう一方の端から1ミリリットルの生理食塩水をゆっくりと注入して膀胱を膨張させ、カテーテルの周囲に漏れがないか確認します。生理食塩水が尿道から出てきたら、生理食塩水を抜いて膀胱を減圧します。
手術用ハサミを使用して、腹部切開部を骨盤底まで延長します。膀胱に沿って、筋肉と膜を陰部管に移動し、尿道と外括約筋を見つけます。電極を含む針を使用して、尿道口から1センチメートル離れた両側に皮膚を穿刺します。
次に、鉗子でフックの先端を慎重につかみ、針を皮膚からそっと引き離します。電極の先端を使用して、外部尿道括約筋を両側に慎重に引っ掛けます。3-0非吸収性モノフィラメントを使用して、骨盤と腹部の筋肉と皮膚を縫合します。
電極を所定の位置に固定するには、電極が出る皮膚にシアノアクリレート接着剤の薄層を塗布します。次に、0.5〜10マイクロリットルのマイクロピペットを使用して加速剤液を引き出し、接着剤を乾燥させます。次に、適切な接着反応を確保するために、促進剤液を追加します。
長さ、幅、深さが4.5センチメートルの倒立ポリスチレン計量ボートを準備します。底辺が4センチの三角形に切り、このスペースにマウスの尿道口を置きます。尿を回収するためのスペースの下に使い捨てのベースモールドを置きます。
次に、マウスを腹臥位に再配置し、ガスマスクを装備したカスタムメイドのプレートに慎重に移動します。尿道口が溝内に適切に配置されていることを確認してください。マウスの頭と手足をテープで優しく拘束し、マウスが完全に意識を取り戻すまでプレートを加熱パッドの上に置きます。