The authors would like to thank Prof. Steven Nutt and Mr. Yuzheng Zhang for assistant with the Focus Ion Beam, and the Center for Electron Microscopy and Microanalysis (CEMMA) at USC for electron microscopy. Research was supported by NIH-NIDCR grants; DE-13414 and DE-020099 to J.M.O.

人間の臼歯は、南カリフォルニア大学の歯学部のオストロー学校での抽出のための標準的な手順に従って抽出し、施設内倫理委員会の承認を得て取り扱った。 1。酸エッチング歯の作製スライス<ol><li>任意の復元された虫歯なしで、人間の第三大臼歯を選択します。 </li><li>臼歯の根元部分を削除し、縦方向に太い水冷式​​低速ダイヤモンドソーを用いてスライス2ミリメートルに臼歯の冠をカット。超音波で2分間、これらのスライスをきれいにした後、脱イオン水で3回、それらをすすぐ。 </li><li>びらん性病変をシミュレートするために、直ちに脱イオン水ですすぎ、その後、それらを30秒間、30％リン酸で歯スライスをエッチングする。 </li><li>超音波で2分間エッチングしたスライスをきれいにした後、脱イオン水で3回、それらをすすぐ。 </li></ol>アメロゲニン - キトサンハイドロゲルの2。準備<ol><li> Preparatioキトサン原液のN <ol><li> 1％を溶解し、80℃CO / Nで攪拌し、続いて1％（v / v）酢酸溶液（w / v）のキトサン（中間分子量、75〜85％脱アセチル化） </li><li> RTに冷却後、溶液を、0.45μmのフィルターを用いてキトサン溶液を濾過する。 1 M NaOH溶液を添加することにより5.0にpH値を調整する。 </li></ol></li><li>カルシウム及びリン酸のストック溶液（0.1 M）の調製<ol><li>塩化カルシウム（CaCl 2で） を秤量し、0.1 M溶液を調製し、次いで、溶液が透明になるまでボルテックスを用いて混合する。 1 M NaOH溶液を加えることにより11にpH値を調整する。 </li><li>第二リン酸ナトリウムせ（Na 2 HPO 4）を秤量し、0.1 M溶液を調製し、次いで、溶液が透明になるまでボルテックスを用いて混合する。 </li></ol></li><li>組換えアメロゲニン17〜18の発現および精製 ここで使用される組換え完全長ブタアメロジェニン（rP172）は、172アミノ酸を有し、完全にアナログである長天然ブタP173が、N末端 ​​メチオニンなどSer16 18上のリン酸基を欠いている。 <ol><li> 500mlの溶原性ブロス（LB）寒天の粉末20gを追加し、脱イオン水、20分間121°C（液体設定）で溶液をオートクレーブ。 〜55°Cは、寒天液にアンピシリン（100μg/ mlの）を追加する寒天クールをしてみましょう。 </li><li>寒天の結露を避けるためにフリップして、それが固体になるまで、各プレートが冷めて、ペトリ皿に寒天ソリューションを転送します。 4℃で、ビニール袋に入れて保管してプレート</li><li>グリセロールストックからの組換え細胞（ 大腸菌 -BC21）でストリークLB寒天プレート（-80℃）。 37℃でプレートO / Nインキュベート</li><li> NZCYM培地を50mlを調製し、30分間121℃でオートクレーブ媒体。メディアがクールダウンするには、50ミリリットルのメディアに100μg/ mlのアンピシリンの50μlを加える。 </li><li> ampicillを補充し、50mlのNZCYM培地にLB寒天プレートからの単一コロニーを接種インチ、37℃で振とう培養器内の細胞のO / Nインキュベート</li><li> NZCYMメディアを1リットル調製し、30分間121℃でメディアをオートクレーブ。千ミリリットルメディアに100 mg / mlのアンピシリンの1ミリリットルを追加します。 UV-可視分光光度計を用いてブランクとして光学密度（OD）読み取り値を取る。注：最初にリードした後は捨てないでください。 </li><li>ステップ2.3.6から千ミリリットルメディアにステップ2.3.5からの細胞培養の10ミリリットルを接種する。すぐに接種後595nmでの光学密度を読んでください。成長を追跡するために、定期的に光学濃度の読みを取る。注：外径が取られるたびに空白をお読みください。 </li><li>細菌の増殖は、595nmで約0.75〜0.8 ODまで到達したときにイソプロピルβ-D-1-チオガラクトピラノシド（IPTG、1 M）の700μlで誘導する。 </li><li> ODが1.1に達したときに細胞を採取する。 6プラスチックボトルにフラスコの内容物を注ぐ。バランスをとり、遠心分離器を使用する前に、ボトルの重量を量る。 4℃で8554×gで20分間遠心-20°CO / Nで細胞ペレットを保つ</li><li>細胞ペレットを取り出し、50mlチューブでそれらを結合します。発酵の1Lあたり4MグアニジンHClの3.5ミリリットルを追加します。 1分間隔で超音波処理し、氷上に2〜3回、30秒ごとに、。 </li><li> 0.5％ギ酸で細胞容積の6倍希釈液を作り、それが2時間低温室で炒めてみましょう。 4℃で30分、8554×gで遠心上清を保管してください。飽和の原液を用いて20％飽和硫酸アンモニウムを加え、低温室、O / Nでかき混ぜる</li><li> 4℃で30分間、8554×gで遠心し、ペレットを保持します。 C4カラム（10×250ミリメートル、5ミクロン）上に0.1％トリフルオロ酢酸（TFA）、負荷のペレットを再構成し、そしてにおいて、TFAでA = 0.1％TFAおよびB = 60％アセトニトリルの直線勾配を用いて分画し1.5ミリリットル·分-1の流速。 </li><li>ドライアイス上で蛋白質溶液を凍結し、凍結したサンプルのO / Nを凍結乾燥</li></ol></li><li>アメロゲニン - キトサンの調製（CS-AMEL）hydrogEL（ 図1A） <ol><li> 200 rp172μgの1％キトサン溶液を960μLを含むチューブに追加し、溶液が透明になるまでボルテックスを用いて混合します。 </li><li>アメロゲニン含有キトサン溶液に、0.1MのNa 2 HPO 4溶液を15μlに続く、0.1MのCaCl 2溶液25μlを追加し、5分間ボルテックスを用いて混合します。 </li><li>慎重に1 M NaOH溶液を添加することによって6.5にCS-AMEL溶液のpHを調整する。 pH値が6.5に達したときにCS-AMELヒドロゲルが形成される。 </li></ol></li></ol>アメロゲニン·キトサンヒドロゲル中の3。エナメル再成長<ol><li>人工唾液溶液の調製<ol><li>特定の塩化マグネシウム（MgCl 2を 、0.2 mM）の量は、塩化カルシウム（CaCl 2、1mM）を、リン酸二水素カリウム（KH 2 PO 4、4ミリモル）、塩化カリウム（KCl、16 mM）および塩化アンモニウム（溶解20のHEPES中のNH 4 Clで、4.5 mM）を（4 - （2 -ヒドロキシエチル）ピペラジン-1 -エタンスルホン酸）緩衝液12。 </li><li> 1MのNaOHでpHを7.0に調整し、4℃で、人工唾液ソリューションを保存する</li><li>ソリューションを使用する前に、フッ化ナトリウム（NaFを、300 ppm）を追加します。 </li></ol></li><li> CS-AMELハイドロゲルの応用<ol><li>注射器（ 図1B）を用いてエッチング歯のスライスに約20μlのCS-AMELハイドロゲルを適用します。 </li><li>室温で2時間デシケーター中でハイドロゲルで覆わ​​れた歯のスライスを乾燥させます。 </li><li>人工唾液溶液30mlを入れたビーカーに歯のスライスを転送します。アルミニウム箔でビーカーを覆い、その後、7日間37℃のオーブン中にビーカーを保つ。 </li><li>歯のスライスを削除して、室温でデシケーター中で乾燥させます。 </li></ol></li></ol>新成長層とエナメルとの間のインタフェースの4。キャラ新しく成長した層とエナメルの界面の微細構造はobserた電子顕微鏡（SEM）及び高回転透過型電子顕微鏡（HR-TEM）を走査することによってVED。 TEM試料は、集束イオンビーム（FIB）技術、次の通りであるれる手順を用いて調製した。 <ol><li> FIB-SEM装置にサンプルをロードし、取扱説明書に従ってすべての整列を終える。 NOTE：微調整Zは、少なくとも2回実施されるべきである。 </li><li>基本的な構造（ 図2A）を保護するために試料上にカーボン層（15×3程度）を蒸 ​​着した。 </li><li>ミルは、炭素層の上部、下部、右両側に注意深く試料は、試料の薄片を作製し、この薄片の底部側をカットする。注：各粉砕工程（ 図2B）の前にイオンビームの位置合わせを確認してください。 </li><li>溶接白金薄片上のチップと試験片（ 図3C）を分離するために左側を切った。注：溶接工程の前にイオンビームの位置合わせを確認してください。 </li><li> Tを持ち上げ彼は徐々にサンプルとヒントリフトアウトTEMグリッド上にラメラサンプルをマウントPT。 </li><li>その厚さが100nm（ 図3D）未満になるまで、サンプルから先端を切り離し、薄いサンプル。 TEM観察を行うために、機器からサンプルを取り出します。注：各間引き処理の前にイオンビームの位置合わせを確認してください。 </li></ol> 5。新成長層の結合および機械的特性の評価を<ol><li>結合強度は、超音波処理することにより評価される。 10分間の超音波洗浄機（42 kHzの、100 W）で修復歯のスライスを維持した後、後方散乱電子SEM分析と修復さ層と天然エナメル質との間のインタフェースを観察します。 </li><li>ベルコビッチチップを有するナノインデンターにより各補修エナメル質表面上に20のテストポイントでの硬度及び弾性率を測定した（n = 3）。 </li></ol> 6。免疫蛍光染色<ol><li>トリスbuffeと歯のスライスを洗う15分間のr個の生理食塩水（TBS）。 </li><li> 15分間、TBS中の1％ウシ血清アルブミン（BSA）でブロックする。 </li><li>液体を除去し、TBS（0.1％のBSA、0.3％トリトンX-100）で希釈した1°抗体（1:500ニワトリ抗アメロゲニン）とサンプルのO / Nインキュベートする。 </li><li> 30分間TBSでサンプルを洗浄し、TBSで希釈した2°抗体（1:100抗ニワトリFITC）でO / Nインキュベートする。 </li><li> 30分間TBSでサンプルを洗浄し、さらに30分間乾燥さのままにしておきます。 </li><li>蛍光顕微鏡で観察します。 </li></ol>

<ol>
	<li>Moradian-Oldak, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein-+mediated+enamel+mineralization.">Protein- mediated enamel mineralization.</a> Frontiers in Bioscience. 17, 1996-2023 (2012).</li><li>Palmer, L. C., Newcomb, C. J., Kaltz, S. R., Spoerke, E. D., Stupp, S. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biomimetic+Systems+for+Hydroxyapatite+Mineralization+Inspired+By+Bone+and+Enamel.">Biomimetic Systems for Hydroxyapatite Mineralization Inspired By Bone and Enamel.</a> Chem. 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Growth Des. 12, 4897-4905 (2012).</li><li>Fan, Y., Sun, Z., Abbott, C., Moradian-Oldak, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+enamel+inspired+nanocomposite+fabrication+through+amelogenin+supramolecular+assembly.">A enamel inspired nanocomposite fabrication through amelogenin supramolecular assembly.</a> Biomaterials. 28, 3034-3042 (2007).</li><li>Wright, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+molecular+etiologies+and+associated+phenotypes+of+amelogenesis+imperfecta.">The molecular etiologies and associated phenotypes of amelogenesis imperfecta.</a> Am. J. Med. Gent. 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M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+Initial+Stages+of+Template-Controlled+CaCO3+Formation+Revealed+by+Cryo-TEM.">The Initial Stages of Template-Controlled CaCO3 Formation Revealed by Cryo-TEM.</a> Science. 323, 1455-1458 (2009).</li><li>Gebauer, D., Volkel, A., Colfen, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Stable+Prenucleation+Calcium+Carbonate+Clusters.">Stable Prenucleation Calcium Carbonate Clusters.</a> Science. 322, 1819-1822 (2008).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

エナメル質のミネラル含有量が高く、それを人間の体内で最も困難なミネラル化した組織を作っている間に、このバイオセラミックは、多くの場合、虫歯やエロージョンとして生じる脱塩プロセスの影響を受けやすい。遺伝子突然変異はまた、 エナメル質形成不全症20と呼ばれるエナメル奇形の遺伝性疾患の一連につながる細いまたはソフトエナメルを引き起こす可能性があ?...

Dental enamel is the hard mineralized surface of human teeth. It is composed of numerous needle-like apatite crystals, which are bundled in organized, parallel prisms to ensure the unique mechanical strength and biological protection that enamel provides1-2. Unlike other mineralized tissues, such as bone and dentin, mature enamel is acellular and cannot regenerate itself after substantial mineral loss1-2, which often occurs as dental caries or erosion. Commercially available products such as fluoride containing varnishes, tooth pastes and mouthwashes are effective in re-mineralizing enamel but none of them have the potential to promote the formation of organized apatite crystals. Clinically, the conventional treatment for enamel repair involves a filling procedure with artificial materials such as amalgam, ceramics, or composite resin 3. However, these materials usually do not interface well with the natural tissue surrounding the lesion, because their structures, components and properties are different from the natural enamel. As a result, secondary caries frequently develops overtime at the interface between the tooth and foreign materials. Therefore, in situ regrowth of enamel with a dense interface is an attractive target for the fields of materials science and stomatology. One particularly promising way to achieve this purpose is biomimetic synthesis of enamel-like material on the enamel surface. Recently, numerous in vitro attempts have been made to prepare enamel-like materials using biomimetic systems that contain nano-apatites or different organic additives 4-12. However, developing the optimal biomimetic strategy to promote remineralization crystals to achieve a perfect dense interface is still a challenge. 
During enamel mineralization, the oriented growth and elongation of apatite crystals is regulated by an amelogenin-rich matrix 1,13-14. To mimic the organic matrix in developing enamel, herein we describe a detailed protocol for fabricating an amelogenin-chitosan (CS-AMEL) hydrogel for in situ enamel regrowth on an acid-etched enamel surface used as a model for erosive lesions. As &#8220;the most versatile growth media&#8221; for crystals 15, hydrogel matrices have an advantage over a solution system since clinically they are easier to handle. Moreover, CS-AMEL is biocompatible, biodegradable, and has unique antimicrobial and adhesion properties that compare favorably with other biomimetic systems for dental applications 16. Importantly, the in situ mineralization of apatite crystals on the enamel surface provides a dense interface between the repaired layer and the natural enamel, which can potentially improve the durability of restorations and prevent the formation of new caries at the margin of the restoration.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1219">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Name</td>
			<td style="width:209px;">Company</td>
			<td style="width:164px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:516px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Material/ Reagent</td>
			<td style="width:209px;"></td>
			<td style="width:164px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:331px;">Human Third Molar&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Ostrow School of Dentistry of the University of Southern California&#160;</td>
			<td style="width:164px;">N/A</td>
			<td style="width:516px;">The human molars were extracted following the standard procedures for extraction at the Ostrow School of Dentistry of the University of Southern California and handled with the approval of the Institutional Review Board.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:331px;">Recombinant Pocine Amelogenin</td>
			<td style="width:209px;">Expression and purification&#160; in lab</td>
			<td style="width:164px;">N/A</td>
			<td style="width:516px;">rP172, full-length&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Chitosan&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:164px;">448877</td>
			<td style="width:516px;">medium molecular weight, 75-85% deacetylated</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Phosphoric Acid&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AA033266</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Acetic Acid Glacial</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">A036289</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Sodium Hydroxide</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH9292</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Calcium Chloride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:164px;">223506</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Dibasic Sodium Phosphate Anhydrous</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH0316</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">BL21-CodonPlus (DE3)-RP&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Agilent Technologies Inc.</td>
			<td style="width:164px;">230255</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Ammonium Sulfate</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH8001</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Trifluoroacetic Acid</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AAAL06374</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Acetonitrile</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH1103</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Magnesium Chloride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH0244</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Potassium Dihydrogen Phosphate&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH9268</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Potassium Chloride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH0258</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Ammonium Chloride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AAAA15000</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:331px;">HEPES (4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-1-ethane-sulfonic acid)</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AAA14777</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Sodium Fluoride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AA11561</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Tris-Buffered Saline</td>
			<td style="width:209px;">Bio-Rad</td>
			<td style="width:164px;">170-6435</td>
			<td style="width:516px;">10&#215; TBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td style="width:209px;">EMD Millipore&#160;</td>
			<td style="width:164px;">12659</td>
			<td style="width:516px;">CalBioChem, Albumin, Bovine Serum, Fraction V, Low Heavy Metals&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:209px;">EMD Millipore&#160;</td>
			<td style="width:164px;">TX1568-1</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Chicken Anti-Amelogenin</td>
			<td style="width:209px;">N/A</td>
			<td style="width:164px;">N/A</td>
			<td style="width:516px;">A gift from Prof. Malcolm Snead, University of Southern California</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Bovine Anti-Chicken IgY-FITC</td>
			<td style="width:209px;">Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td style="width:164px;">Sc-2700</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:331px;">Equipments</td>
			<td style="width:209px;"></td>
			<td style="width:164px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:331px;">High Performance Liquid Chromatography System</td>
			<td style="width:209px;">Agilent Technologies Inc.</td>
			<td style="width:164px;">Varian Prostar 210</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">C4 column</td>
			<td style="width:209px;">Phenomenx&#160;</td>
			<td style="width:164px;">Jupiter 5&#956; 300A</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Scanning Electron Microscopy&#160;</td>
			<td style="width:209px;">JEOL&#160;</td>
			<td style="width:164px;">JSM-7001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">FIB-SEM&#160;</td>
			<td style="width:209px;">JEOL&#160;</td>
			<td style="width:164px;">JIB-4500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Transmission Electron Microscopy&#160;</td>
			<td style="width:209px;">JEOL</td>
			<td style="width:164px;">JEM-2100F</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Digital Low Speed Diamond Saw</td>
			<td style="width:209px;">MTI Corporation</td>
			<td style="width:164px;">SYJ-150</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Fluorescence Microscopy</td>
			<td style="width:209px;">Leica</td>
			<td style="width:164px;">DMI3000 B</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Ultrasonic Cleaner&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Branson&#160;</td>
			<td style="width:164px;">2510</td>
			<td style="width:516px;">42 kHz, 100 W</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Nano-indenter&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Agilent Technologies Inc.</td>
			<td style="width:164px;">MTS XP</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

development of amelogenin-chitosan hydrogel for in vitro enamel regrowth with a dense interface

Biomimetic enamel reconstruction is a significant topic in material science and dentistry as a novel approach for the treatment of dental caries or erosion. Amelogenin has been proven to be a critical protein for controlling the organized growth of apatite crystals. In this paper, we present a detailed protocol for superficial enamel reconstruction by using a novel amelogenin-chitosan hydrogel. Compared to other conventional treatments, such as topical fluoride and mouthwash, this method not only has the potential to prevent the development of dental caries but also promotes significant and durable enamel restoration. The organized enamel-like microstructure regulated by amelogenin assemblies can significantly improve the mechanical properties of etched enamel, while the dense enamel-restoration interface formed by an in situ regrowth of apatite crystals can improve the effectiveness and durability of restorations. Furthermore, chitosan hydrogel is easy to use and can suppress bacterial infection, which is the major risk factor for the occurrence of dental caries. Therefore, this biocompatible and biodegradable amelogenin-chitosan hydrogel shows promise as a biomaterial for the prevention, restoration, and treatment of defective enamel.

ここに記載されたプロトコルの有効性は、電子顕微鏡（SEM）、選択領域の電子回折（SAED）及びX線回折（XRD）分析を走査することによって実証される。 7日間アメロゲニン - キトサン（CS-AMEL）ハイドロゲルによる修理の後、厚さ15μmのエナメル調層がエッチングされたエナメル質表面に形成された。新たに成長した層は、表面に垂直なc軸（ 図3Aの矢印）に沿って優先的に成長し、...

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Development of Amelogenin-chitosan Hydrogel for In Vitro Enamel Regrowth with a Dense Interface

この記事では、我々は表面的なエナメル質の再構築のためのアメロゲニン-キトサンハイドロゲルを製造するためのプロトコルを記述します。ヒドロゲル中のアパタイト結晶のその場での増殖に編成は、修復物の有効性及び耐久性を向上させる緻密なエナメル復元インタフェースを形成した。

用アメロゲニン - キトサンハイドロゲルの開発<em&gt;体外</em高密度インターフェイス付き&gt;エナメル再成長

Biomimetic enamel reconstruction is a significant topic in material science and dentistry as a novel approach for the treatment of dental caries or ...

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Research

JoVE Journal

Bioengineering

Development of Amelogenin-chitosan Hydrogel for In Vitro Enamel Regrowth with a Dense Interface

14.9K ビュー.  University of Southern California. この記事では、我々は表面的なエナメル質の再構築のためのアメロゲニン-キトサンハイドロゲルを製造するためのプロトコルを記述します。ヒドロゲル中のアパタイト結晶のその場での増殖に編成は、修復物の有効性及び耐久性を向上させる緻密なエナメル復元インタフェースを形成した。 