The authors would like to thank Prof. Steven Nutt and Mr. Yuzheng Zhang for assistant with the Focus Ion Beam, and the Center for Electron Microscopy and Microanalysis (CEMMA) at USC for electron microscopy. Research was supported by NIH-NIDCR grants; DE-13414 and DE-020099 to J.M.O.

Les molaires humaines ont été extraites en suivant les procédures standard pour l&#39;extraction de l&#39;École de médecine dentaire Ostrow de l&#39;Université de Californie du Sud et manipulés avec l&#39;approbation de l&#39;Institutional Review Board. 1. Préparation de la Dent dépoli à l&#39;acide Slice <ol><li> Sélectionner une troisième molaire humaine sans caries restaurées. </li><li> Retirer la partie racine de la molaire, et couper la couronne de la molaire longitudinalement en tranches de 2 mm d&#39;épaisseur en utilisant un faible débit diamant scie refroidi à l&#39;eau. Nettoyer par ultrasons ces tranches pendant 2 min, puis les rincer avec de l&#39;eau déminéralisée 3 fois. </li><li> Pour simuler des lésions érosives, graver les tranches de dents avec 30% d&#39;acide phosphorique pendant 30 secondes puis les rincer immédiatement avec de l&#39;eau déminéralisée. </li><li> Nettoyer par ultrasons des tranches gravées pendant 2 min, puis les rincer avec de l&#39;eau déminéralisée 3 fois. </li></ol> 2. Préparation d&#39;hydrogel chitosane-Amelogenin <ol><li> Preparation de la solution mère de chitosane <ol><li> Dissoudre 1% (w / v) chitosane (masse moléculaire moyenne, 75 à 85% désacétylée) dans une (v / v) d&#39;une solution à 1% d&#39;acide acétique suivi par une agitation à 80 ° CO / N. </li><li> Après refroidissement de la solution à la température ambiante, filtrer la solution de chitosane à l&#39;aide d&#39;un filtre de 0,45 um. Ajuster le pH à 5,0 par addition d&#39;une solution de NaOH. </li></ol></li><li> Préparation de calcium et de solution stock de phosphate (0,1 M) <ol><li> Peser le chlorure de calcium (CaCl 2) et préparer une solution à 0,1 M, puis mélanger à l&#39;aide d&#39;un vortex jusqu&#39;à ce que la solution est claire. Ajuster la valeur du pH à 11 par addition d&#39;une solution de NaOH. </li><li> Peser le phosphate disodique (Na 2 HPO 4) et préparer une solution à 0,1 M, puis mélanger à l&#39;aide d&#39;un vortex jusqu&#39;à ce que la solution est claire. </li></ol></li><li> Expression et purification de l&#39;amélogénine recombinant 17-18 La pleine longueur amelogenin porcin recombinant (rP172) utilisé ici a 172 acides aminés et est un analogue de la pleineLongueur porcine P173 natif, mais sans la méthionine N-terminale ainsi que d&#39;un groupe phosphate sur Ser16 18. <ol><li> Ajouter 20 g de bouillon Lysogénie (LB) Agar en poudre dans 500 ml d&#39;eau déminéralisée, l&#39;autoclave la solution à 121 ° C (réglage de liquide) pendant 20 min. Laisser refroidir la gélose à ~ 55 ° C, ajouter de l&#39;ampicilline (100 ug / ml) dans une solution d&#39;agar. </li><li> Transférer la solution de gélose des boîtes de Petri, laisser chaque plaque froide jusqu&#39;à ce qu&#39;il soit solide, puis retournez pour éviter la condensation sur la gélose. plaques de magasins dans des sacs en plastique à 4 ° C. </li><li> Streak la plaque de gélose LB avec des cellules recombinantes (E. coli-BC21) du stock de glycérol (-80 ° C). Incuber les plaques O / N à 37 ° C. </li><li> Préparer 50 ml de milieu NZCYM et autoclave les médias à 121 ° C pendant 30 min. Autoriser les médias à refroidir, ajouter 50 ul de 100 pg / ml d&#39;ampicilline à 50 ml de milieu. </li><li> Inoculer une colonie unique à partir de la plaque d&#39;agar-agar dans le milieu LB 50 ml de NZCYM supplémenté avec ampicillIncuber les cellules po O / N dans un incubateur agitateur à 37 ° C. </li><li> Préparer 1 L de médias NZCYM et autoclave les médias à 121 ° C pendant 30 min. Ajouter 1 ml de 100 mg / ml d&#39;ampicilline à 1000 ml de milieu. Prenez une densité optique (DO) de la lecture comme une vierge à l&#39;aide d&#39;un spectrophotomètre UV-Vis. NOTE: Ne pas jeter ce après la première lecture. </li><li> Inoculer 10 ml de la culture cellulaire de l&#39;étape 2.3.5 dans 1000 ml de milieu de l&#39;étape 2.3.6. Lire la densité optique à 595 nm immédiatement après l&#39;inoculation. Prendre la mesure de la densité optique pour assurer le suivi de la croissance. REMARQUE: Lire la vierge à chaque fois la DO est prise. </li><li> Induire avec 700 ul d&#39;isopropyl β-D-1-thiogalactopyranoside (IPTG, 1 M) lorsque la croissance bactérienne atteint à environ 0,75 ~ 0,8 DO à 595 nm. </li><li> Récolter les cellules lorsque la DO atteint 1.1. Verser le contenu de la fiole dans des bouteilles en plastique 6. Et peser les bouteilles avant d&#39;utiliser la centrifugeuse. Centrifuger pendant 20 min à 8554 g à 4 ° C.Conserver le culot cellulaire dans l&#39;-20 ° CO / N. </li><li> Sortez les culots de cellules et de les combiner dans un tube de 50 ml. Ajouter 3,5 ml de guanidine HCl 4M par L de fermentation. Fois Soniquer 2-3 sur la glace, 30 secondes à chaque fois, avec des intervalles de 1 min. </li><li> Faire des dilutions 6x de volume de la cellule avec de l&#39;acide formique à 0,5% et laisser remuer dans la chambre froide pendant 2 heures. Centrifuger pendant 30 min, 8554 g à 4 ° C. Gardez le surnageant. Ajouter 20% de sulfate d&#39;ammonium saturé à l&#39;aide de la solution mère saturée et remuer dans la chambre froide, O / N. </li><li> Centrifuger pendant 30 min, 8554 g à 4 ° C et garder le culot. Reconstituer les pastilles dans 0,1% d&#39;acide trifluoroacétique (TFA), de la charge sur une colonne C4 (10 x 250 mm, 5 um), et fractionner en utilisant un gradient linéaire de A = 0,1% de TFA et B = 60% d&#39;acétonitrile dans du TFA, à une taux de 1,5 ml · min -1 débit. </li><li> Congeler la solution de protéine sur glace sèche et lyophiliser l&#39;échantillon congelé O / N. </li></ol></li><li> Préparation de amelogenin-chitosane (CS-AMEL) hydrographieel (figure 1A) <ol><li> Ajouter 200 ug de rp172 dans un tube contenant 960 pi de solution de chitosane à 1%, puis mélanger à l&#39;aide d&#39;un vortex jusqu&#39;à ce que la solution est claire. </li><li> Ajouter 25 ul de 0,1 M CaCl 2 solution suivis par 15 ul de 0,1 M de Na 2 HPO 4 solution à la solution de chitosane contenant amélogénine-, puis mélanger à l&#39;aide d&#39;un vortex pendant 5 min. </li><li> Ajuster le pH de la solution de CS-AMEL à 6,5 en ajoutant avec précaution une solution de NaOH. CS-AMEL hydrogel se forme lorsque la valeur du pH atteigne 6,5. </li></ol></li></ol> 3. Émail repousse dans Amelogenin-chitosane hydrogel <ol><li> Préparation de la solution de salive artificielle <ol><li> Dissoudre une certaine quantité de chlorure de magnésium (MgCl 2, 0,2 mM), du chlorure de calcium (CaCl 2, 1 mM), du dihydrogénophosphate de potassium (KH 2 PO 4, 4 mM), du chlorure de potassium (KCl, 16 mM) et de chlorure d&#39;ammonium ( NH 4 Cl, 4,5 mM) dans 20 mM d&#39;HEPES(4 - (2-hydroxyéthyl) pipérazine-1-éthane-sulfonique) en mémoire tampon 12. </li><li> Ajuster le pH à 7,0 avec NaOH 1 M et de stocker la solution de salive artificielle à 4 ° C. </li><li> Avant d&#39;utiliser la solution, ajouter du fluorure de sodium (NaF, 300 ppm). </li></ol></li><li> Application de CS-AMEL hydrogel <ol><li> Appliquer environ 20 ul hydrogel CS-AMEL à la tranche de la dent mordancée à l&#39;aide d&#39;une seringue (Figure 1B). </li><li> Sécher la dent tranche recouverte d&#39;un hydrogel dans un dessiccateur à la température ambiante pendant 2 h. </li><li> Transférer la tranche de la dent dans un bêcher contenant 30 ml d&#39;une solution de salive artificielle. Recouvrir de papier d&#39;aluminium, puis garder le bécher dans un four à 37 ° C pendant 7 jours. </li><li> Retirez la tranche de la dent et le sécher dans un dessiccateur à la température ambiante. </li></ol></li></ol> 4. Caractérisation de l&#39;interface entre la couche nouvellement Cultivé et émail La microstructure de l&#39;interface entre la couche nouvellement développé et l&#39;émail a été observed par microscopie électronique à balayage (MEB) et microscopie électronique à transmission à haute révolution (HR-TEM). L&#39;échantillon de MET a été préparé en utilisant un faisceau d&#39;ions focalisé (FIB) de la technique, pour les étapes qui sont les suivantes. <ol><li> Chargez l&#39;échantillon dans un instrument FIB-SEM et terminer tous les alignements selon les instructions de fonctionnement. REMARQUE: Le réglage fin de Z doit être effectuée au moins 2 fois. </li><li> Déposer une couche de carbone (15 x 3 um) sur l&#39;échantillon afin de protéger la structure sous-jacente (figure 2A). </li><li> Mill soigneusement l&#39;échantillon sur les côtés supérieur, inférieur et droit de la couche de carbone pour préparer un petit morceau de l&#39;échantillon, et ensuite coupé la partie inférieure de cette pièce mince. REMARQUE: Vérifiez l&#39;alignement du faisceau d&#39;ions avant chaque étape de broyage (figure 2B). </li><li> Souder une pointe de Pt sur ​​la pièce mince et couper la partie gauche de séparer l&#39;échantillon pièce (figure 3C). REMARQUE: Vérifiez l&#39;alignement du faisceau d&#39;ions avant l&#39;étape de soudage. </li><li> Sortez til pt basculer avec l&#39;échantillon lentement, et monter l&#39;échantillon lamellaire sur une grille de TEM-soulèvement. </li><li> Détachez la pointe de l&#39;échantillon, et mince de l&#39;échantillon jusqu&#39;à ce que son épaisseur est inférieure à 100 nm (figure 3D). Enlever l&#39;échantillon de l&#39;instrument pour effectuer l&#39;observation TEM. REMARQUE: Vérifiez l&#39;alignement du faisceau d&#39;ions avant chaque processus d&#39;amincissement. </li></ol> 5. Évaluation des propriétés de liaison et mécaniques de la couche nouvellement Grown <ol><li> La résistance de liaison est évaluée par un traitement aux ultrasons. Gardez la tranche de dent réparée dans un nettoyeur à ultrasons (42 kHz, 100 W) pendant 10 min, puis observer l&#39;interface entre la couche réparé et l&#39;émail naturel avec un électron rétrodiffusé analyse SEM. </li><li> Mesurer la dureté et le module d&#39;élasticité à 20 points de test sur chaque surface de l&#39;émail réparé (n = 3) par un nano-indentation avec une pointe Berkovich. </li></ol> 6. Immunofluorescence <ol><li> Laver la tranche de la dent avec du Tris Buffer solution saline (TBS) pendant 15 min. </li><li> Bloquer avec 1% d&#39;albumine de sérum bovin (BSA) dans du TBS pendant 15 minutes. </li><li> Éliminer le liquide de l&#39;échantillon et incuber O / N avec 1 ° Ab (1:500 poulet anti-Amelogenin) dilués dans du TBS (0,1% de BSA, 0,3% de Triton X-100). </li><li> Laver l&#39;échantillon avec le SCT pour 30 min et incuber O / N avec 2 ° Ab (1:100 anti-poulet FITC) dilué dans du TBS. </li><li> Laver l&#39;échantillon avec le SCT pour 30 min et laisser sécher pendant 30 min. </li><li> Observez par microscope à fluorescence. </li></ol>

<ol>
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The authors have nothing to disclose.

Bien que la teneur en minéraux de l&#39;émail est élevé rend plus difficile le tissu minéralisé dans le corps humain, ce biocéramique est sensible aux processus de déminéralisation, qui se produisent souvent que la carie dentaire ou de l&#39;érosion. Les mutations génétiques peuvent aussi provoquer émail fines et souples menant à une série de maladies héréditaires de malformation de l&#39;émail appelé Amélogenèse imparfaite 20. Produits de soins de santé bucco-dentaire contenant...

Dental enamel is the hard mineralized surface of human teeth. It is composed of numerous needle-like apatite crystals, which are bundled in organized, parallel prisms to ensure the unique mechanical strength and biological protection that enamel provides1-2. Unlike other mineralized tissues, such as bone and dentin, mature enamel is acellular and cannot regenerate itself after substantial mineral loss1-2, which often occurs as dental caries or erosion. Commercially available products such as fluoride containing varnishes, tooth pastes and mouthwashes are effective in re-mineralizing enamel but none of them have the potential to promote the formation of organized apatite crystals. Clinically, the conventional treatment for enamel repair involves a filling procedure with artificial materials such as amalgam, ceramics, or composite resin 3. However, these materials usually do not interface well with the natural tissue surrounding the lesion, because their structures, components and properties are different from the natural enamel. As a result, secondary caries frequently develops overtime at the interface between the tooth and foreign materials. Therefore, in situ regrowth of enamel with a dense interface is an attractive target for the fields of materials science and stomatology. One particularly promising way to achieve this purpose is biomimetic synthesis of enamel-like material on the enamel surface. Recently, numerous in vitro attempts have been made to prepare enamel-like materials using biomimetic systems that contain nano-apatites or different organic additives 4-12. However, developing the optimal biomimetic strategy to promote remineralization crystals to achieve a perfect dense interface is still a challenge. 
During enamel mineralization, the oriented growth and elongation of apatite crystals is regulated by an amelogenin-rich matrix 1,13-14. To mimic the organic matrix in developing enamel, herein we describe a detailed protocol for fabricating an amelogenin-chitosan (CS-AMEL) hydrogel for in situ enamel regrowth on an acid-etched enamel surface used as a model for erosive lesions. As &#8220;the most versatile growth media&#8221; for crystals 15, hydrogel matrices have an advantage over a solution system since clinically they are easier to handle. Moreover, CS-AMEL is biocompatible, biodegradable, and has unique antimicrobial and adhesion properties that compare favorably with other biomimetic systems for dental applications 16. Importantly, the in situ mineralization of apatite crystals on the enamel surface provides a dense interface between the repaired layer and the natural enamel, which can potentially improve the durability of restorations and prevent the formation of new caries at the margin of the restoration.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1219">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Name</td>
			<td style="width:209px;">Company</td>
			<td style="width:164px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:516px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Material/ Reagent</td>
			<td style="width:209px;"></td>
			<td style="width:164px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:331px;">Human Third Molar&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Ostrow School of Dentistry of the University of Southern California&#160;</td>
			<td style="width:164px;">N/A</td>
			<td style="width:516px;">The human molars were extracted following the standard procedures for extraction at the Ostrow School of Dentistry of the University of Southern California and handled with the approval of the Institutional Review Board.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:331px;">Recombinant Pocine Amelogenin</td>
			<td style="width:209px;">Expression and purification&#160; in lab</td>
			<td style="width:164px;">N/A</td>
			<td style="width:516px;">rP172, full-length&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Chitosan&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:164px;">448877</td>
			<td style="width:516px;">medium molecular weight, 75-85% deacetylated</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Phosphoric Acid&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AA033266</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Acetic Acid Glacial</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">A036289</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Sodium Hydroxide</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH9292</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Calcium Chloride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:164px;">223506</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Dibasic Sodium Phosphate Anhydrous</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH0316</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">BL21-CodonPlus (DE3)-RP&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Agilent Technologies Inc.</td>
			<td style="width:164px;">230255</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Ammonium Sulfate</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH8001</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Trifluoroacetic Acid</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AAAL06374</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Acetonitrile</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH1103</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Magnesium Chloride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH0244</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Potassium Dihydrogen Phosphate&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH9268</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Potassium Chloride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH0258</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Ammonium Chloride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AAAA15000</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:331px;">HEPES (4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-1-ethane-sulfonic acid)</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AAA14777</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Sodium Fluoride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AA11561</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Tris-Buffered Saline</td>
			<td style="width:209px;">Bio-Rad</td>
			<td style="width:164px;">170-6435</td>
			<td style="width:516px;">10&#215; TBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td style="width:209px;">EMD Millipore&#160;</td>
			<td style="width:164px;">12659</td>
			<td style="width:516px;">CalBioChem, Albumin, Bovine Serum, Fraction V, Low Heavy Metals&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:209px;">EMD Millipore&#160;</td>
			<td style="width:164px;">TX1568-1</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Chicken Anti-Amelogenin</td>
			<td style="width:209px;">N/A</td>
			<td style="width:164px;">N/A</td>
			<td style="width:516px;">A gift from Prof. Malcolm Snead, University of Southern California</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Bovine Anti-Chicken IgY-FITC</td>
			<td style="width:209px;">Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td style="width:164px;">Sc-2700</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:331px;">Equipments</td>
			<td style="width:209px;"></td>
			<td style="width:164px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:331px;">High Performance Liquid Chromatography System</td>
			<td style="width:209px;">Agilent Technologies Inc.</td>
			<td style="width:164px;">Varian Prostar 210</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">C4 column</td>
			<td style="width:209px;">Phenomenx&#160;</td>
			<td style="width:164px;">Jupiter 5&#956; 300A</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Scanning Electron Microscopy&#160;</td>
			<td style="width:209px;">JEOL&#160;</td>
			<td style="width:164px;">JSM-7001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">FIB-SEM&#160;</td>
			<td style="width:209px;">JEOL&#160;</td>
			<td style="width:164px;">JIB-4500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Transmission Electron Microscopy&#160;</td>
			<td style="width:209px;">JEOL</td>
			<td style="width:164px;">JEM-2100F</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Digital Low Speed Diamond Saw</td>
			<td style="width:209px;">MTI Corporation</td>
			<td style="width:164px;">SYJ-150</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Fluorescence Microscopy</td>
			<td style="width:209px;">Leica</td>
			<td style="width:164px;">DMI3000 B</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Ultrasonic Cleaner&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Branson&#160;</td>
			<td style="width:164px;">2510</td>
			<td style="width:516px;">42 kHz, 100 W</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Nano-indenter&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Agilent Technologies Inc.</td>
			<td style="width:164px;">MTS XP</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

development of amelogenin-chitosan hydrogel for in vitro enamel regrowth with a dense interface

Biomimetic enamel reconstruction is a significant topic in material science and dentistry as a novel approach for the treatment of dental caries or erosion. Amelogenin has been proven to be a critical protein for controlling the organized growth of apatite crystals. In this paper, we present a detailed protocol for superficial enamel reconstruction by using a novel amelogenin-chitosan hydrogel. Compared to other conventional treatments, such as topical fluoride and mouthwash, this method not only has the potential to prevent the development of dental caries but also promotes significant and durable enamel restoration. The organized enamel-like microstructure regulated by amelogenin assemblies can significantly improve the mechanical properties of etched enamel, while the dense enamel-restoration interface formed by an in situ regrowth of apatite crystals can improve the effectiveness and durability of restorations. Furthermore, chitosan hydrogel is easy to use and can suppress bacterial infection, which is the major risk factor for the occurrence of dental caries. Therefore, this biocompatible and biodegradable amelogenin-chitosan hydrogel shows promise as a biomaterial for the prevention, restoration, and treatment of defective enamel.

L&#39;efficacité du protocole décrit ici est mise en évidence par microscopie électronique à balayage (MEB), la diffraction d&#39;électrons de la zone sélectionnée (DSA) et la diffraction des rayons X (XRD) des analyses. Après la réparation par amélogénine-chitosan (CS-AMEL) hydrogel pendant 7 jours, une couche d&#39;émail en forme avec une épaisseur de 15 pm a été formée sur la surface de l&#39;émail mordancé. La couche nouvellement développée a été faite de matrices hautement ordonnées de crist...

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Development of Amelogenin-chitosan Hydrogel for In Vitro Enamel Regrowth with a Dense Interface

Dans cet article, on décrit un protocole de fabrication d&#39;un hydrogel de chitosane-amélogénine à la reconstruction de l&#39;émail superficiel. Organisé croissance in situ de cristaux d&#39;apatite dans l&#39;hydrogel formé dans une interface émail-restauration dense, ce qui permettra d&#39;améliorer l&#39;efficacité et la durabilité des restaurations.

Le développement de l&#39;Amelogenin-chitosane Hydrogel pour<em&gt; In Vitro</em&gt; Émail repousse avec une interface dense

Biomimetic enamel reconstruction is a significant topic in material science and dentistry as a novel approach for the treatment of dental caries or ...

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Research

JoVE Journal

Bioengineering

Development of Amelogenin-chitosan Hydrogel for In Vitro Enamel Regrowth with a Dense Interface

14.9K vues.  University of Southern California.  Dans cet article, on décrit un protocole de fabrication d'un hydrogel de chitosane-amélogénine à la reconstruction de l'émail superficiel. Organisé croissance in situ de cristaux d'apatite dans l'hydrogel formé dans une interface émail-restauration dense, ce qui permettra d'améliorer l'efficacité et la durabilité des restaurations. 