The authors would like to thank Prof. Steven Nutt and Mr. Yuzheng Zhang for assistant with the Focus Ion Beam, and the Center for Electron Microscopy and Microanalysis (CEMMA) at USC for electron microscopy. Research was supported by NIH-NIDCR grants; DE-13414 and DE-020099 to J.M.O.

Die menschliche Molaren wurden nach den Standardverfahren zur Extraktion bei der Ostrow School of Dentistry der University of Southern California extrahiert und mit Zustimmung des Institutional Review Board behandelt. 1. Vorbereitung der geätzten Zahn Scheibe <ol><li> Wählen Sie einen menschlichen dritten Molaren ohne restauriert Karies. </li><li> Entfernen der Wurzelabschnitt des molaren, und schneiden die Krone des molaren Längsrichtung in Scheiben von 2 mm Dicke unter Verwendung einer wassergekühlten Niedergeschwindigkeits-Diamantsäge. Diese Scheiben reinigen mit Ultraschall für 2 Minuten und dann spülen Sie mit VE-Wasser 3-mal. </li><li> Um Erosionen zu simulieren, ätzen die Zahnscheiben mit 30% Phosphorsäure für 30 Sekunden, dann sie sofort gründlich mit VE-Wasser. </li><li> Ultraschall reinigen die Scheiben geätzt für 2 Minuten und dann spülen Sie mit VE-Wasser 3-mal. </li></ol> 2. Vorbereitung der Amelogenin-Chitosan-Hydrogel <ol><li> Präparaten von Chitosan-Stammlösung <ol><li> Man löst 1% (w / v) Chitosan (mittleres Molekulargewicht 75-85% deacetyliertes) in einer 1% (v / v) Essigsäure-Lösung, gefolgt von Rühren bei 80 ° CO / N </li><li> Nach Abkühlen der Lösung auf Raumtemperatur filtriert man das Chitosan-Lösung unter Verwendung eines 0,45 &amp;mgr; m. Einstellen des pH-Wertes auf 5,0 durch Zugabe von 1 M NaOH-Lösung. </li></ol></li><li> Herstellung von Calcium-und Phosphat-Stammlösung (0,1 M) <ol><li> Abwiegen Calciumchlorid (CaCl 2) und bereiten eine 0,1 M Lösung, dann mischen mit einem Vortex, bis die Lösung klar ist. Einstellen des pH-Werts auf 11 durch Zugabe von 1 M NaOH-Lösung. </li><li> Abwiegen Natriummonohydrogenphosphat (Na 2 HPO 4) und bereiten eine 0,1 M Lösung, dann mischen mit einem Vortex, bis die Lösung klar ist. </li></ol></li><li> Expression und Reinigung von rekombinantem Amelogenin 17-18 Das rekombinante voller Länge Schweine amelogenin (rP172) welche hier hat 172 Aminosäuren und ist ein analoges VollLängen-Nativschweine P173, aber nicht über die N-terminale Methionin sowie eine Phosphatgruppe auf Ser16 18. <ol><li> 20 g Lysogenität Brühe (LB)-Agar-Pulver in 500 ml VE-Wasser, die Lösung im Autoklaven bei 121 ° C (flüssiger Einstellung) für 20 min. Lassen Agar cool zu ~ 55 ° C, fügen Ampicillin (100 ug / ml) in Agar-Lösung. </li><li> Übertragen Sie die Agar-Lösung auf Petrischalen, lassen jede Platte abkühlen, bis es fest ist, dann drehen, um Kondensation auf dem Agar zu vermeiden. Speicher Platten in Kunststoffbeutel bei 4 ° C. </li><li> Streak die LB-Agar-Platte mit rekombinanten Zellen (E.coli-BC21) von der Glycerin-Stamm (-80 ° C). Die Platten O / N bei 37 ° C. </li><li> Vorbereitung 50 ml NZCYM-Medium und das Medium autoklaviert bei 121 º C für 30 min. Ermöglichen, dass die Medien abkühlen, 50 &amp;mgr; l 100 &amp;mgr; g / ml Ampicillin für die 50 ml Medium. </li><li> Impfen eine einzige Kolonie von der LB-Agar-Platte in den Medien mit 50ml NZCYM ampicill ergänztin. die Zellen O / N bei 37 ° C inkubieren in einem Schüttelinkubator </li><li> Herstellung von 1 l NZCYM-Medien und autoklavieren Medien bei 121 ° C für 30 min. 1 ml 100 mg / ml Ampicillin bis 1000 ml Medium. Nehmen Sie eine optische Dichte (OD) als Rohling mit einem UV-Vis-Spektrophotometer. HINWEIS: Werfen Sie diese nach der ersten Lesung. </li><li> Beimpfen von 10 ml der Zellkultur von Schritt 2.3.5 in 1000 ml Medium aus Schritt 2.3.6. Messen der optischen Dichte bei 595 nm unmittelbar nach Inokulation. Nehmen Sie die optische Dichte Lese regelmäßig zu verfolgen, das Wachstum zu halten. HINWEIS: Lesen Sie die leere jedes Mal die OD genommen wird. </li><li> Induziert mit 700 &amp;mgr; l Isopropyl-β-D-1-thiogalactopyranosid (IPTG, 1 M), wenn das bakterielle Wachstum erreicht, bis etwa 0,75 bis 0,8 OD bei 595 nm auf. </li><li> Ernten Sie die Zellen, wenn die OD erreicht 1.1. Den Inhalt des Kolbens in 6 Kunststoffflaschen. Balancieren und wiegen die Flaschen vor der Verwendung der Zentrifuge. Zentrifugieren für 20 min bei 8.554 × g bei 4 ° C.Halten des Zellpellets in der -20 ° CO / N </li><li> Nehmen Sie die Zellpellets und kombinieren sie in einem 50-ml-Tube. In 3,5 ml 4 M Guanidin-HCl pro Liter der Gärung. Ultraschallbad 2-3 mal auf Eis, 30 Sek. jedes Mal, mit 1-Minuten-Intervallen. </li><li> Machen 6x Verdünnungen des Zellvolumens mit 0,5% Ameisensäure und lassen Sie es im Kühlraum für 2 h rühren. Zentrifugieren für 30 min, 8.554 x g bei 4 ° C. Halten Sie den Überstand. In 20% Gesättigte Ammoniumsulfat mit der gesättigten Stammlösung und Aufsehen in der kalten Raum, O / N. </li><li> Zentrifugieren für 30 min, 8554 × g bei 4 ° C und halten die Pellets. Rekonstitution der Pellets in 0,1% Trifluoressigsäure (TFA), Last auf eine C4-Säule (10 x 250 mm, 5 &amp;mgr; m) und Fraktionierung unter Verwendung eines linearen Gradienten von A = 0,1% TFA und B = 60% Acetonitril in TFA, bei einer Durchflussrate von 1,5 ml · min -1. </li><li> Einfrieren der Proteinlösung auf Trockeneis und lyophilisiert die gefrorene Probe O / N. </li></ol></li><li> Vorbereitung der amelogenin-Chitosan (CS-AMEL) HYDROGel (Fig. 1A) <ol><li> In 200 ug rp172 in ein Röhrchen mit 960 ul 1% Chitosan-Lösung, dann mit einem Vortex mischen, bis die Lösung klar ist. </li><li> In 25 ul 0,1 M CaCl 2-Lösung, gefolgt von 15 ul 0,1 M Na 2 HPO 4 Lösung des amelogenin haltigen Chitosan-Lösung, dann mischen mit einem Vortex für 5 min. </li><li> Den pH-Wert des CS-AMEL Lösung auf 6,5 durch vorsichtige Zugabe von 1 M NaOH-Lösung. CS-AMEL Hydrogel zu bilden, wenn der pH-Wert 6,5 erreicht. </li></ol></li></ol> 3. Emaille Nachwachsen in Amelogenin-Chitosan-Hydrogel <ol><li> Herstellung von künstlichen Speichellösung <ol><li> Man löst eine bestimmte Menge von Magnesiumchlorid (MgCl 2, 0,2 mM), Calciumchlorid (CaCl 2, 1 mM), Kaliumdihydrogenphosphat (KH 2 PO 4, 4 mM), Kaliumchlorid (KCl, 16 mM) und Ammoniumchlorid ( NH 4 Cl, 4,5 mM) in 20 mM HEPES(4 - (2-Hydroxyethyl) piperazin-1-ethan-sulfonsäure)-Puffer 12. </li><li> PH-Wert auf 7,0 mit 1 M NaOH und speichern die künstliche Speichellösung bei 4 ° C. </li><li> Vor der Verwendung der Lösung werden Natriumfluorid (NaF, 300 ppm). </li></ol></li><li> Anwendung von CS-Hydrogel AMEL <ol><li> Gelten etwa 20 &amp;mgr; l CS-AMEL Hydrogel auf die geätzte Zahnscheibe mit einer Spritze (Abbildung 1B). </li><li> Trocknen Sie die Hydrogel-bedeckten Zahnscheibe in einem Exsikkator bei RT für 2 Stunden. </li><li> Übertragen der Zahnscheibe in ein Becherglas, das 30 ml Lösung künstlichen Speichels. Das Becherglas mit Aluminiumfolie, und dann halten Sie den Becher in einem Ofen bei 37 ° C für 7 Tage. </li><li> Entfernen Sie die Zahnscheibe und trocknen Sie sie in einem Trockenschrank bei RT. </li></ol></li></ol> 4. Charakterisierung der Schnittstelle zwischen neu gewachsenen Schicht und Emaille Die Mikrostruktur der Grenzfläche zwischen dem neu gewachsenen Schicht und Emaille Beobachdurch Rasterelektronenmikroskopie (SEM) und hohen Drehtransmissionselektronenmikroskopie (HR-TEM) ved. Die TEM-Probe wurde unter Verwendung eines fokussierten Ionenstrahls (FIB)-Technik, die für die Schritte sind wie folgt hergestellt. <ol><li> Legen Sie die Probe in ein FIB-SEM Instrument und beenden Sie alle Ausrichtungen nach der Betriebsanleitung. HINWEIS: Z Feineinstellung sollte mindestens 2 mal durchgeführt werden. </li><li> Abscheiden einer Kohlenstoffschicht (15 × 3 &amp;mgr; m) auf der Probe, um die darunterliegende Struktur (2A) zu schützen. </li><li> Mühle die Probe vorsichtig an den oberen, unteren und rechten Seite der Kohlenstoffschicht, ein dünnes Stück Probe herzustellen, und dann schneiden Sie die untere Seite dieser dünnen Stück. HINWEIS: Überprüfen Sie die Ionenstrahl-Ausrichtung vor jedem Schleifschritt (Abbildung 2B). </li><li> Weld ein Pt-Spitze auf dem dünnen Stück und schneiden Sie die linke Seite, um das Probestück (3C) zu trennen. HINWEIS: Überprüfen Sie die Ionenstrahl-Ausrichtung vor dem Schweißschritt. </li><li> Heben Sie tPT er mit der Probe langsam kippen, und montieren Sie die Lamellen Probe auf einem Lift-out-TEM-Gitter. </li><li> Nehmen Sie die Spitze aus der Probe und die Probe dünn, bis seine Dicke weniger als 100 nm (Abbildung 3D). Entfernen der Probe aus dem Gerät, um die TEM-Beobachtung durchzuführen. HINWEIS: Überprüfen Sie die Ionenstrahl-Ausrichtung vor jedem Verdünnungsprozess. </li></ol> 5. Beurteilung der Bindung und mechanische Eigenschaften der neu gewachsenen Schicht <ol><li> Die Bindungsfestigkeit wird durch Ultraschallbehandlung beurteilt. Halten Sie die reparierte Zahnscheibe in einem Ultraschallreiniger (42 kHz, 100 W) für 10 min und dann beobachten, die Schnittstelle zwischen der Schicht und repariert natürlichen Zahnschmelz mit einem Rückstreuelektronen-REM-Analyse. </li><li> Messung der Härte und der Elastizitätsmodul bei 20 Testpunkte für jedes repariert Schmelzoberfläche (n = 3) durch eine Nanoindenters mit einer Berkovich-Spitze. </li></ol> 6. Immunfluoreszenzfärbungen <ol><li> Waschen Sie die Zahnscheibe mit Tris buffer Kochsalzlösung (TBS) für 15 min. </li><li> Blockieren mit 1% Rinderserumalbumin (BSA) in TBS für 15 min. </li><li> Entfernen Sie die Flüssigkeit und Inkubation der Probe O / N 1 ° Ab (1:500 Huhn Anti-Amelogenin) in TBS (0,1% BSA, 0,3% Triton X-100) verdünnt. </li><li> Waschen Sie die Probe mit TBS für 30 min und Inkubation O / N mit 2 ° Ab (1:100 Anti-Huhn FITC) in TBS verdünnt. </li><li> Waschen Sie die Probe mit TBS für 30 min und zu verlassen, um für weitere 30 Minuten trocknen. </li><li> Beachten durch Fluoreszenz-Mikroskop. </li></ol>

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The authors have nothing to disclose.

Während der Mineralgehalt des Schmelz Hoch macht es das härteste mineralisiertem Gewebe im menschlichen Körper, ist dieses biokeramischen anfällig Entmineralisierung Prozesse, die oft auftreten, wie Karies oder Erosion. Genmutationen können auch dazu führen, dünnen oder weichen Zahnschmelz, was zu einer Reihe von Erbkrankheiten der Schmelzfehlbildungen genannt Amelogenesis imperfecta 20. Oral Gesundheitsprodukten Fluorid oder CPP-ACP enthalten, sind auf dem Markt seit mehreren Jahren (dh,<...

Dental enamel is the hard mineralized surface of human teeth. It is composed of numerous needle-like apatite crystals, which are bundled in organized, parallel prisms to ensure the unique mechanical strength and biological protection that enamel provides1-2. Unlike other mineralized tissues, such as bone and dentin, mature enamel is acellular and cannot regenerate itself after substantial mineral loss1-2, which often occurs as dental caries or erosion. Commercially available products such as fluoride containing varnishes, tooth pastes and mouthwashes are effective in re-mineralizing enamel but none of them have the potential to promote the formation of organized apatite crystals. Clinically, the conventional treatment for enamel repair involves a filling procedure with artificial materials such as amalgam, ceramics, or composite resin 3. However, these materials usually do not interface well with the natural tissue surrounding the lesion, because their structures, components and properties are different from the natural enamel. As a result, secondary caries frequently develops overtime at the interface between the tooth and foreign materials. Therefore, in situ regrowth of enamel with a dense interface is an attractive target for the fields of materials science and stomatology. One particularly promising way to achieve this purpose is biomimetic synthesis of enamel-like material on the enamel surface. Recently, numerous in vitro attempts have been made to prepare enamel-like materials using biomimetic systems that contain nano-apatites or different organic additives 4-12. However, developing the optimal biomimetic strategy to promote remineralization crystals to achieve a perfect dense interface is still a challenge. 
During enamel mineralization, the oriented growth and elongation of apatite crystals is regulated by an amelogenin-rich matrix 1,13-14. To mimic the organic matrix in developing enamel, herein we describe a detailed protocol for fabricating an amelogenin-chitosan (CS-AMEL) hydrogel for in situ enamel regrowth on an acid-etched enamel surface used as a model for erosive lesions. As &#8220;the most versatile growth media&#8221; for crystals 15, hydrogel matrices have an advantage over a solution system since clinically they are easier to handle. Moreover, CS-AMEL is biocompatible, biodegradable, and has unique antimicrobial and adhesion properties that compare favorably with other biomimetic systems for dental applications 16. Importantly, the in situ mineralization of apatite crystals on the enamel surface provides a dense interface between the repaired layer and the natural enamel, which can potentially improve the durability of restorations and prevent the formation of new caries at the margin of the restoration.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1219">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Name</td>
			<td style="width:209px;">Company</td>
			<td style="width:164px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:516px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Material/ Reagent</td>
			<td style="width:209px;"></td>
			<td style="width:164px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:331px;">Human Third Molar&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Ostrow School of Dentistry of the University of Southern California&#160;</td>
			<td style="width:164px;">N/A</td>
			<td style="width:516px;">The human molars were extracted following the standard procedures for extraction at the Ostrow School of Dentistry of the University of Southern California and handled with the approval of the Institutional Review Board.</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:331px;">Recombinant Pocine Amelogenin</td>
			<td style="width:209px;">Expression and purification&#160; in lab</td>
			<td style="width:164px;">N/A</td>
			<td style="width:516px;">rP172, full-length&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Chitosan&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:164px;">448877</td>
			<td style="width:516px;">medium molecular weight, 75-85% deacetylated</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Phosphoric Acid&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AA033266</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Acetic Acid Glacial</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">A036289</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Sodium Hydroxide</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH9292</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Calcium Chloride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:164px;">223506</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Dibasic Sodium Phosphate Anhydrous</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH0316</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">BL21-CodonPlus (DE3)-RP&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Agilent Technologies Inc.</td>
			<td style="width:164px;">230255</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Ammonium Sulfate</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH8001</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Trifluoroacetic Acid</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AAAL06374</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Acetonitrile</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH1103</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Magnesium Chloride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH0244</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Potassium Dihydrogen Phosphate&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH9268</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Potassium Chloride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">BDH0258</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Ammonium Chloride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AAAA15000</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:331px;">HEPES (4-(2-Hydroxyethyl)piperazine-1-ethane-sulfonic acid)</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AAA14777</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Sodium Fluoride&#160;</td>
			<td style="width:209px;">VWR</td>
			<td style="width:164px;">AA11561</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Tris-Buffered Saline</td>
			<td style="width:209px;">Bio-Rad</td>
			<td style="width:164px;">170-6435</td>
			<td style="width:516px;">10&#215; TBS</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td style="width:209px;">EMD Millipore&#160;</td>
			<td style="width:164px;">12659</td>
			<td style="width:516px;">CalBioChem, Albumin, Bovine Serum, Fraction V, Low Heavy Metals&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:209px;">EMD Millipore&#160;</td>
			<td style="width:164px;">TX1568-1</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Chicken Anti-Amelogenin</td>
			<td style="width:209px;">N/A</td>
			<td style="width:164px;">N/A</td>
			<td style="width:516px;">A gift from Prof. Malcolm Snead, University of Southern California</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Bovine Anti-Chicken IgY-FITC</td>
			<td style="width:209px;">Santa Cruz Biotechnology</td>
			<td style="width:164px;">Sc-2700</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="32">
			<td height="32" style="height:32px;width:331px;">Equipments</td>
			<td style="width:209px;"></td>
			<td style="width:164px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="26">
			<td height="26" style="height:26px;width:331px;">High Performance Liquid Chromatography System</td>
			<td style="width:209px;">Agilent Technologies Inc.</td>
			<td style="width:164px;">Varian Prostar 210</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">C4 column</td>
			<td style="width:209px;">Phenomenx&#160;</td>
			<td style="width:164px;">Jupiter 5&#956; 300A</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Scanning Electron Microscopy&#160;</td>
			<td style="width:209px;">JEOL&#160;</td>
			<td style="width:164px;">JSM-7001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">FIB-SEM&#160;</td>
			<td style="width:209px;">JEOL&#160;</td>
			<td style="width:164px;">JIB-4500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Transmission Electron Microscopy&#160;</td>
			<td style="width:209px;">JEOL</td>
			<td style="width:164px;">JEM-2100F</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Digital Low Speed Diamond Saw</td>
			<td style="width:209px;">MTI Corporation</td>
			<td style="width:164px;">SYJ-150</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Fluorescence Microscopy</td>
			<td style="width:209px;">Leica</td>
			<td style="width:164px;">DMI3000 B</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Ultrasonic Cleaner&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Branson&#160;</td>
			<td style="width:164px;">2510</td>
			<td style="width:516px;">42 kHz, 100 W</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:331px;">Nano-indenter&#160;</td>
			<td style="width:209px;">Agilent Technologies Inc.</td>
			<td style="width:164px;">MTS XP</td>
			<td style="width:516px;"></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

development of amelogenin-chitosan hydrogel for in vitro enamel regrowth with a dense interface

Biomimetic enamel reconstruction is a significant topic in material science and dentistry as a novel approach for the treatment of dental caries or erosion. Amelogenin has been proven to be a critical protein for controlling the organized growth of apatite crystals. In this paper, we present a detailed protocol for superficial enamel reconstruction by using a novel amelogenin-chitosan hydrogel. Compared to other conventional treatments, such as topical fluoride and mouthwash, this method not only has the potential to prevent the development of dental caries but also promotes significant and durable enamel restoration. The organized enamel-like microstructure regulated by amelogenin assemblies can significantly improve the mechanical properties of etched enamel, while the dense enamel-restoration interface formed by an in situ regrowth of apatite crystals can improve the effectiveness and durability of restorations. Furthermore, chitosan hydrogel is easy to use and can suppress bacterial infection, which is the major risk factor for the occurrence of dental caries. Therefore, this biocompatible and biodegradable amelogenin-chitosan hydrogel shows promise as a biomaterial for the prevention, restoration, and treatment of defective enamel.

Die Wirksamkeit der hier beschriebenen Protokoll wird durch Rasterelektronenmikroskopie (SEM), Bereichsbeugung (SAED) und Röntgenbeugung (XRD)-Analyse bewiesen. Nach der Reparatur von Amelogenin-Chitosan (CS-AMEL) Hydrogel für 7 Tage wurde ein emailartigen Schicht mit einer Dicke von 15 um auf der geätzten Zahnschmelzoberfläche ist. Die neu gewachsene Schicht von hochgeordneten Anordnungen von Kristallen mit einem Durchmesser von ~ 50 nm, wächst vorzugsweise entlang der c-Achse, senkrecht zur Oberfläche (Pfeile in...

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Development of Amelogenin-chitosan Hydrogel for In Vitro Enamel Regrowth with a Dense Interface

In diesem Artikel beschreiben wir ein Protokoll zur Herstellung eines amelogenin-Chitosan-Hydrogel für oberflächliche Zahnschmelz Wiederaufbau. In-situ-Wachstum von Apatitkristalle in dem Hydrogel Organisiert bildeten einen dichten Schmelz-Wiederherstellung-Schnittstelle, die die Wirksamkeit und Haltbarkeit von Restaurationen zu verbessern.

Entwicklung von Amelogenin-Chitosan-Hydrogel für<em&gt; In-vitro-</em&gt; Emaille Nachwachsen mit einem dichten Schnittstelle

Biomimetic enamel reconstruction is a significant topic in material science and dentistry as a novel approach for the treatment of dental caries or ...

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Research

JoVE Journal

Bioengineering

Development of Amelogenin-chitosan Hydrogel for In Vitro Enamel Regrowth with a Dense Interface

14.9K Aufrufe.  University of Southern California.  In diesem Artikel beschreiben wir ein Protokoll zur Herstellung eines amelogenin-Chitosan-Hydrogel für oberflächliche Zahnschmelz Wiederaufbau. In-situ-Wachstum von Apatitkristalle in dem Hydrogel Organisiert bildeten einen dichten Schmelz-Wiederherstellung-Schnittstelle, die die Wirksamkeit und Haltbarkeit von Restaurationen zu verbessern. 