Name: synthesis of monocyte-targeting peptide amphiphile micelles for imaging of atherosclerosis
Uploaded: 2017-11-17T14:00:00.000+00:00
Duration: 8 min 1 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about Synthesis of Monocyte-targeting Peptide Amphiphile Micelles for Imaging of Atherosclerosis at JoVE.com

著者は、南カリフォルニア大学、国立心臓、肺と血の協会 (NHLBI)、R00HL124279、エリとエディス幅広いイノベーション賞、および L.K. ホイッティア財団の非癌から助成を受けたいと思いますトランスレーショナル研究賞は、EJC に与えられました。著者の電子顕微鏡と微量分析、NanoBiophysics の卓越性のセンター、分子特性の卓越性のセンター、臨床画像センターの支援のための南カリフォルニアの大学でセンターに感謝します。機器のセットアップ。

注: 試薬の MSDS を読むし、地方機関に必要なすべての化学安全対策に従ってください。
1. MCP 1 PAMs の準備
<ol><li>
MCP 1 ペプチドの作製
	<ol>
<li>Fmoc 保護-L-Lys (Boc) の 0.25 モル重量を量り-反応容器 (RV) の王。化学の発煙のフード 5 mL dimethylforamide (DMF) と RV の側をすすいでください。</li>
		<li>卓上型自動ペプチド合成装置に RV をロードします。あらかじめパッケージ化されたアミノ酸バイアル、N '- CYNFTINRKISVQRLASYRRITSS - C', C から N 末端をロードします。最終的な脱保護手順の終わりに空のバイアルが含まれます。 注: シーケンス、N '- CNNSIIRSKQVLRSTRYFRSATYK - C'、スクランブル ペプチドも合成できる同じプロトコルを使用しています。</li>
		<li>合成が完了すると、ペプチド樹脂から転送 RV 2 〜 3 mL のメタノールを用いたシンチレーション バイアルに樹脂のすべてが転送されるまで。樹脂は、底に沈んでいる後、培養上清中のメタノールを削除し、乾燥するまで残りを蒸発します。真空乾燥室温でさらに 2 時間または一晩。</li>
		<li>12 mL 胸の谷間溶液化学の発煙のフード 94:2.5:2.5:1 vol %trifluoracetic 酸 (TFA):ethanedithiol:water:triisopropylsilane を確認します。それは均等に混合されていることを確認して胸の谷間ソリューションを旋回します。 注意: triisopropylsilane とエタンジチある空気に敏感なため、アルゴンは triisopropylsilane と再びそれらを置く前に 1 分間エタンジチ株式バイアルをパージします。</li>
		<li>SV の半分下部クランプ アーム シェーカーに合成容器 (SV) を配置します。ペプチド樹脂のすべてが転送されるまでは、胸の谷間溶液 2 mL と SV にペプチド樹脂を転送します。</li>
		<li>3 mL 胸の谷間ソリューションと SV の側面を洗います。SV のキャップを閉じて、300 振動/分 4 h に振る。</li>
		<li>空 50 mL 遠心管を重量を量る。質量を記録します。</li>
		<li>4 h 後に、50 mL の遠心管に SV から裂かれたペプチド ソリューションを抜きます。残りの胸の谷間ソリューションで何回か SV をすすいでください。</li>
		<li>未満 4 mL 遠心管の残りがあるまでは、劈開ペプチドにより、窒素を蒸発させます。</li>
		<li>ペプチド切断ソリューションに冷たいエーテルの 36 mL を追加します。</li>
		<li>渦までソリューションは完全に白または黄色です。4 ° C で 5 分間 3,000 × g で遠心し、上清をデカントします。</li>
		<li>40 mL 冷たいエーテルをチューブに追加します。渦と再び超音波。遠心分離プロセスを繰り返します。上清をデカントします。</li>
		<li>窒素ガスパージ エーテルが蒸発して目に見えないまでに原油の PA ペレットを乾燥させます。</li>
		<li>二重蒸留水 20 mL を加えて水、渦、および超音波溶液中ペプチドを完全に溶解するまで。</li>
		<li>解決をフリーズ ・ ドライまで凍乾します。</li>
		<li>一度、ペプチドを乾燥すると、原油のペプチドを含む遠心分離機管の質量を重量を量る。5 mg/mL の水で粗ペプチドを溶解します。</li>
		<li>25 mg を 5 mg/mL の濃度を作るためには、ダブル蒸留水を 5 mL の原油の MCP 1 ペプチドを溶解します。0.1% 水 (溶媒) で TFA と 0.1% を用いた高速液体クロマトグラフィー (HPLC) による原油 MCP 1 ペプチドを浄化 C8 逆相カラムに移動相としてアセトニ トリル (溶剤 B) で TFA。ペプチドの 5 mL を HPLC に注入します。 注: 初期の移動相から成っていた 100% 溶剤溶剤 A ゆっくりと 27 分の 30% の減少し、この組成 3 分リターン 100% 溶媒へのグラデーションで 9.0 mL/分の流量で以上 3 分と 1 分を与えるためのこの構成で開催34 分の合計実行時間は、55 ° C でカラム温度を保つ分析のための肯定的なイオン ソース モードを使用します。ギ酸は、TFA がも HPLC カラムの酸性の場合、TFA の代わりに使用できます。有機溶媒組成傾斜速度がよりよい分離の 2%/min を超えないことをお勧めします。</li>
		<li>マトリックス支援レーザー脱離イオン化 (MALDI) 質量分析法を用いた 2,890 で予想される製品 m/z 各分画を分析します。 注: は、マトリックス ソリューションとして 1 mg/mL にアセトニ トリル/水 (50: 50 vol %) で α-シアノ-4-ヒドロキシケイ皮酸を溶解します。各分画の 0.75 μ L に続いて MALDI プレート ・ マトリクス ・ ソリューションの 0.75 μ L をスポットします。500 5,000 Da の質量範囲で正反射イオン モードを使用して解析を実行します。</li>
		<li>製品分数を組み合わせる、アセトニ トリル、吹き飛ばすフリーズして乾燥するまで浄化されたペプチッドを凍結乾燥します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
MCP 1 PA の準備
	<ol>
<li>1,2-distearoyl-sn-glycero-3-phosphoethanolamine-のN-[amino(polyethylene glycol)-2000] DSPE ・ ペッグ (2000)-独立したシンチレーション バイアルにペプチドのマレイミド 1.1 モル超過分を準備します。ように二重蒸留水の両方の化合物を溶解 〜 15 mg/mL。超音波照射 15 分または両方のソリューションが完全に明確になるまで 注: DSPE ・ ペッグ (2000)-cy5 の組合せは、8.5 に、溶液の pH を調整する、DSPE ・ ペッグ (2000)-アミンと N ヒドロキシスクシンイミド (NHS) エステル官能基化 Cy5 のステップ 1.2.3 を除いて、同じプロトコルを使用して合成されます。</li>
		<li>DSPE PEG (2000)-マレイミド ソリューションをペプチドのソリューションに追加します。渦と超音波。</li>
		<li>追加 1 M 水酸化ナトリウム滴 (1 μ L)、溶液の pH が 7 になるまでの時間で。</li>
		<li>5 分の窒素パージ ソリューションはソリューションを一晩撹拌します。</li>
		<li>解決をフリーズ ・ ドライまで凍乾します。</li>
		<li>粗生成物を乾燥すると、一度は、5 mg/mL の水に固体を溶解します。</li>
		<li>前述のように、高速液体クロマトグラフィーと浄化します。 注: 非ペプチド、DSPE-PEG(2000) 必要があります溶出 15-30% 有機濃度 (vol %)、間 DSPE PEG 中 (2000)-MCP 1 共役有機濃度が 40-50% の間溶出する必要があります。</li>
		<li>MALDI 質量分析法を使用して、対応する m/z. DSPE ペグ (2000)-MCP 1 は 5,760 m/z 幅広いピークを有するべきである各分画を分析します。 注: 2, 5-ジヒドロキシ安息香酸に適しています行列として DSPE ペグ (2000)-MCP-1 MALDI と。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
MCP 1 PAMs のアセンブリ
	<ol>
<li>1.75 mg を溶解 1 dram 瓶で 3 mL のメタノールに MCP 1 PAs。超音波 MCP 1 PA を完全に溶解するまで。 注: Cy5 両親媒性物質は、イメージング用 MCP 1 PA 10: 90 のモル比で組み込むことができます。</li>
		<li>バイアルの下部に均一な膜が形成されるまで、バイアルの側面を離れて残りのメタノールをすすぎながら円を描くように窒素下でメタノールを蒸発させます。真空ドライ フィルムを一晩。</li>
		<li>3 mL の水またはリン酸バッファーが付いているフィルムを水和物生理食塩水 (PBS) MCP 1 PAMs の 100 μ M 溶液を作成します。優しく渦クリアまでソリューションを超音波と。80 の ° c で 30 分間インキュベートします。 注: 高温自己組織化プロセスを加速するために示されている、ペプチド コンポーネントで臨界ミセル濃度 (CMC)42,43を下げながら、最も安定した二次構造を形成できます。</li>
		<li>部屋の温度に結果の分散をクールします。</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. MCP 1 PAMs のキャラクタリゼーション
<ol><li>
動的光散乱法 (DL) とゼータ電位
	<ol>
<li>MCP 1 PAM または DLS またはゼータ電位器の指示に従ってキュベットでスクランブル PAM の場所 100 μ M。 注: DL とゼータの潜在的なキュベット異なることがあります機器の指示に基づいています。</li>
		<li>部屋の温度に楽器を平衡します。サイズと PAM の表面電荷を測定します。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
透過型電子顕微鏡 (TEM)
	<ol>
<li>7 μ L を追加 50 μ M の MCP 1 PAM またはスクランブル PAM TEM グリッド上に内で中断 5 分芯先の自己終了ピンセット繊細な作業で拭きます液滴。</li>
		<li>グリッドを洗浄する水の 7 μ L を追加します。液滴を離れて放出します。</li>
		<li>液滴 1 wt % リンタングステン酸 2 分芯先の 7 μ L を追加します。2.2.2 手順を繰り返します。</li>
		<li>TEM 分析の前に TEM グリッドを乾燥させます。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
円二色性 (CD) による
	<ol>
<li>楽器の使用前に 5-10 分の窒素をオンにします。</li>
		<li>キュベットに空白 (水または PBS) の 300 μ L を配置します。</li>
		<li>190 265 nm、1 s 積分時間と室温で 1 nm の帯域パス長さが 0.2 mm でスペクトルを測定します。3 複製を収集します。</li>
		<li>メジャー 100 μ M MCP 1 ペプチド、MCP 1 PAM、ペプチド、スクランブル、PAM をスクランブル手順 2.3.3 で説明した同じ条件の下で。空白から減算します。</li>
		<li>ポリリジン的スペクトルの線形補間を使用して、データに合います。</li>
		<li>機器の電源を切ります。窒素をオフにする前に 10 分を待ちます。</li>
	</ol>
</li>
</ol>3 MCP 1 PAMs のin Vitro解析。
<ol><li>
In vitro生体適合性
	<ol>
<li>文化、WEHI 274.1 ダルベッコ変更イーグル培 10% 牛胎児血清 (FBS)、マウス単球を展開 1% ペニシリン-ストレプトマイシンと 0.05 mM 2-メルカプトエタノール 37 ° c 未満 5% CO2通路 5 に。 注: WEHI 274.1、懸濁細胞です。養殖するときメディアは 2-3 日毎を補充する必要があります。</li>
		<li>ピペット滅菌 50 mL の遠心管にメディアに単球。300 x g で 4 ° C で 5 分間遠心</li>
		<li>古いメディアを吸引し、遠心管に 10 mL の新鮮なメディアで再懸濁します。メディアで均等な細胞までゆっくりと混ぜます。トリパン ブルー染色、診断を使用してセルをカウントします。</li>
		<li>90 μ L/ウェル メディアのあたり 4,000 球されるようセルを希釈します。96 ウェル プレートのウェルの細胞の 90 μ L を追加します。24 時間インキュベートします。 注: は、蒸発の違いとプレートの温度変化を避けるためにプレートの外側の端に井戸を使用しないでください。100 μ L の PBS で外装の井戸を埋めます。</li>
		<li>MCP 1 ペプチド、MCP 1 PAM、スクランブルをかけられたペプチッド、または独立した滅菌マイクロ遠心チューブ用の 150 μ L の PBS でスクランブル PAM の 0.15 µmol を溶解します。1、10、および 100 μ M の各サンプルの 65 μ L にするシリアル希釈を実行します。</li>
		<li>井戸 WEHI 274.1 を含む各濃度の 10 μ L の PBS を追加 (合計ボリューム: まあ、6 行、合計 96 ウェルあたり 100 μ L)。72 時間インキュベートします。</li>
		<li>10 μ l 添加 (各ウェル内 3-(4,5-dimethylthiazol-2-yl)-5-(3-carboxymethoxyphenyl)-2-(4-sulfophenyl)-2H-tetrazolium) (MTS)。1 時間インキュベートします。</li>
		<li>490 プレート リーダーを使用して吸光度を分析 nm または製造元の指示に基づいて。</li>
	</ol>
</li>
	<li>
ミセル バインディング体外
	<ol>
<li>100 μ M Cy5 標識 MCP 1 PAM (DSPE PEG (2000)-Cy5 と MCP 1 PA の 10: 90 モル比) を含むメディアの 2 mL で 6 ウェル プレートの各ウェル内シード 500,000 単球。1 時間インキュベートします。</li>
		<li>4 ° C で 5 分間 300 × g で遠心分離によって WEHI 274.1 を収集します。メディアを吸い出しなさい。</li>
		<li>再懸濁します、2 mL の PBS のセルを洗浄します。300 x g で 4 ° C で 5 分間遠心PBS を吸い出しなさい。2 mL の PBS で洗浄工程を繰り返します。PBS を吸い出しなさい。</li>
		<li>セルを修正する冷たい 4% パラホルムアルデヒドの 2 mL を追加します。10 分間室温でインキュベートします。</li>
		<li>ピペット 6 ウェル プレートのウエル内で滅菌ガラス基板上に固定のセル。5 分間 400 × g で遠心分離機します。</li>
		<li>パラホルムアルデヒドを削除します。洗って、2 mL の PBS で 1 回洗浄します。1 ml の PB 再懸濁します 注: ときにすすぎ、上、セルを中断しません。</li>
		<li>スライドに PBS で 90% のグリセロールの 10 μ L を入れてください。針とピンセットを使って、coverslip を拾います。ドライエッジ、カバーガラスの。ゆっくりとスライドに coverslip を置きます下向き。</li>
		<li>軽くクリアのマニキュアとカバーガラスの端を密封します。画像の準備ができるまで、冷蔵庫に置きます。</li>
		<li>共焦点レーザー走査顕微鏡 (CLSM) Cy5 用レーザーでインストールされている λ励起を使用 = 650 nm。</li>
	</ol>
</li>
</ol>

著者が明らかに何もありません。

MCP 1 PAMs が有望な分子イメージング プラットフォーム ターゲットの親水性ペプチドとナノ粒子の自己組織化の性質をドライブ疎水性の尾部から成る。この単球を対象としたミセルは、単純な合成と精製ステップ MCP 1 ペプチドおよび DSPE PEG (2000)-MCP 1 で用意できます。Pam がある生体内で分子イメージングなどの多くの有益な特性の自己集合構造と化学的多様性の他のイメージングの鎖?...

心血管疾患は、グローバル、約 1730 万死亡世界中1死の主要な原因に残る。心血管疾患は、アテローム性動脈硬化プラークは動脈、それにより阻害血ボディ2,3のセルに酸素の流れ構築する条件で貢献しています。動脈硬化の進行には、炎症反応、不規則な脂質代謝、プラーク形成、プラーク破裂、心筋梗塞4,5につながる、肥厚、動脈硬化が含まれます。血管内皮細胞は、MCP 1 球6,7,8の表面に C C ケモカイン受容体 (CCR2) にバインドするは、サイトカイン、および接着分子を表現します。酸化コレステロール地域で炎症反応を増幅し、組織の損傷や不安定や脆弱なプラーク9,の形成につながるプラーク形成の初期の段階に単球をマクロファージに変換します10。
伝統的に、アテローム性動脈硬化は、血管造影または超音波11,12を使用して解剖学的イメージングによる内腔の狭窄を評価することによって評価されます。ただし、これらのメソッドは高度の狭窄動脈壁の動脈硬化の初期段階を判断できますのみ初期プラークの成長を引き起こす動脈動脈のサイズを維持し、血の流れ率12,13、改造、 14。したがって、血管造影は動脈硬化症の有病率を初期します。また、単一光子放出など非侵襲的イメージング技術計算トモグラフィー、陽電子放射断層撮影、磁気共鳴イメージング最近最初の詳細を提供できるようプラーク形態の特性に使用されているとプラークの評価ただし、これらの様式の感度、空間分解能の不足によって限られているまたははるか挑戦15,16、さまざまな段階でのイメージングのプラーク進行を作って、電離放射線を使用する必要 17。具体的には動脈硬化のさまざまな段階でプラクを識別する画像配信システム開発するままになります。
ナノ粒子は、生体内でプラークをターゲットと診断18,19,20,21新たなプラットフォームであること示されています。特に、PAMs が彼らの化学的多様性と様々 な鎖、組成物、サイズ、形状、および表面機能化22に対応する能力のため有利であります。両親媒性ペプチド (PAs) から成っている、親水性ペプチド"headgroup"通常脂質である疎水性尾に接続されています。この両親媒性構造は、自己組織化機能を付与でき、多価ペプチド粒子22,23,24の表面に表示するため。ペプチド headgroups は折りたたみとペプチド25との水素結合を介して粒子形状に影響を与えます。Β シートの相互作用を介してフォールド ペプチド α ヘリカル確認両方球形と細長いミセル22,23,24,を形作ることができる間、細長いミセルを形成する示されている25,,2627。親水性ペプチドおよび PAMs、全身循環28,ナノ粒子の可用性が強化の疎水性尾間ペプチドの表面電荷をシールド ポリエチレング リコール (PEG) リンカーを配置できます。29,30,31. PAMs は、生体適合性、アプリケーションの32,33の広範な範囲を持っているが示されているためにも有利。ミセルの水容解性は、水溶性ではなく、注射34solubilizers で中断する必要がある特定の高分子ナノ粒子など他のナノ粒子ベースのシステム上の優位性を提供しています。また、特定の刺激に対する反応で分解 PAMs を作成する機能は制御された細胞内薬剤配達35の魅力的な候補 PAMs になります。
CCR2 受容体に結合し、大動脈弓に蓄積、PAMs 以前単球9大動脈の動脈硬化病変のさまざまな段階を監視するターゲットのため開発されました。アポ-/-マウスの単球の蓄積はプラーク進行36に比例して増加します。さらに、破断が発生しやすい、後期の斑の患者が単球37の多量を含むことがわかった。したがって、MCP 1 を組み込むに PAMs の変更は大きいターゲット特異性と初期と後期段階のアテローム性動脈硬化病変の区別できるため便利です。また、これらの概念実証研究確認 PAMs は pre-clinically を使用するのに十分な安全する renally の38がクリアされます。MCP 1 PAMs 動脈硬化症8,,3940を超えてその他の疾患の治療および診断アプリケーションで使用する可能性のある単球や炎症は他の病気の特徴なので,41。
ここで、粒子の最適なサイズ、表面電荷、およびアテローム性動脈硬化で強化されたイメージング用単球を選択的ターゲティングを示した拡張性と自己組織化の MCP 1 PAMs の作製を報告する.

<table><tbody><tr><td>1,2-ethanedithiol</td><td>VWR</td><td>E0032</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>10 mL disposable serological pipets</td><td>VWR</td><td>89130-898</td><td>for cell culture</td></tr><tr><td>15 mL centrifuge tubes, polypropylene</td><td>VWR</td><td>89401-566</td><td>for various applications</td></tr><tr><td>2,5-dihydroxybenzoic acid, 99%</td><td>Fisher Scientific</td><td>AC165200050</td><td>for MALDI</td></tr><tr><td>25 mL disposable serological pipets</td><td>VWR</td><td>89130-900</td><td>for cell culture</td></tr><tr><td>2-Mercaptoethanol, 50 mM</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>31350010</td><td>for cell culture</td></tr><tr><td>5 mL disposable serological pipets</td><td>VWR</td><td>89130-896</td><td>for cell culture</td></tr><tr><td>50 mL centrifuge tubes</td><td>VWR</td><td>89039-658</td><td>for various applications</td></tr><tr><td>75 cm2 culture flask</td><td>Fisher Scientific</td><td>13-680-65</td><td>for cell culture</td></tr><tr><td>75 mL reaction vessel</td><td>Protein Technologies</td><td>3000005</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>96-wells cell culture plate</td><td>VWR</td><td>40101-346</td><td>for MTS assay</td></tr><tr><td>Acetonitrile, HPLC grade</td><td>Fisher Scientific</td><td>A998SK-4</td><td>for HPLC purification</td></tr><tr><td>Borosilicate glass, 1 dram</td><td>VWR</td><td>66011-041</td><td>for PAM synthesis</td></tr><tr><td>Borosillicate glass pipet, Long tips</td><td>VWR</td><td>14673-043</td><td>for various applications</td></tr><tr><td>Coverslip, 0.16-0.19 mm, 22 x 22 mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-542B</td><td>for confocal microscopy</td></tr><tr><td>Cy5 amine</td><td>Abcam</td><td>ab146463</td><td>for peptide conjugation</td></tr><tr><td>Diethyl ether, ACS grade</td><td>Fisher Scientific</td><td>E138-1</td><td>for peptide precipitation</td></tr><tr><td>Disposable syringes, 20 mL</td><td>Fisher Scientific</td><td>14-817-54</td><td>for HPLC purification</td></tr><tr><td>Double neubauer ruled hemocytometer</td><td>VWR</td><td>63510-13</td><td>for cell counting</td></tr><tr><td>DSPE-PEG(2000) amine</td><td>Avanti</td><td>880128P</td><td>for peptide conjugation</td></tr><tr><td>DSPE-PEG(2000) maleimide</td><td>Avanti</td><td>880126P</td><td>for peptide conjugation</td></tr><tr><td>DSPE-PEG(2000)-NHS ester&amp;nbsp;</td><td>Nanocs</td><td>PG2-DSNS-10K</td><td>for conjugation to Cy5</td></tr><tr><td>Dulbecco&#039;s modified eagle medium-high glucose</td><td>Sigma Aldrich</td><td>D5796-500ML</td><td>for cell culture</td></tr><tr><td>Fetal bovine serum, qualified, heat inactivated</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>10438026</td><td>for cell culture</td></tr><tr><td>Fmoc-L-Ala-OH /HBTU</td><td>Protein Technologies</td><td>PS3-H5-A</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Fmoc-L-Arg(Pbf)-OH /HBTU</td><td>Protein Technologies</td><td>PS3-H5-RBF</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Fmoc-L-Asn(Trt)-OH /HBTU</td><td>Protein Technologies</td><td>PS3-H5-NT</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Fmoc-L-Cys(Trt)-OH /HBTU</td><td>Protein Technologies</td><td>PS3-H5-CT</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Fmoc-L-Gln(Trt)-OH /HBTU</td><td>Protein Technologies</td><td>PS3-H5-QT</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Fmoc-L-Ile-OH /HBTU</td><td>Protein Technologies</td><td>PS3-H5-I</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Fmoc-L-Leu-OH /HBTU</td><td>Protein Technologies</td><td>PS3-H5-L</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Fmoc-L-Lys(Boc)-OH /HBTU</td><td>Protein Technologies</td><td>PS3-H5-KBC</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Fmoc-L-Phe-OH /HBTU</td><td>Protein Technologies</td><td>PS3-H5-F</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Fmoc-L-Ser(tBu)-OH /HBTU</td><td>Protein Technologies</td><td>PS3-H5-SB</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Fmoc-L-Thr(tBu)-OH /HBTU</td><td>Protein Technologies</td><td>PS3-H5-TB</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Fmoc-L-Tyr(tBu)-OH /HBTU</td><td>Protein Technologies</td><td>PS3-H5-YB</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Fmoc-L-Val-OH /HBTU</td><td>Protein Technologies</td><td>PS3-H5-V</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Fmoc-Lys(Boc)-wang resin, 100-200 mesh</td><td>Novabiochem</td><td>856013</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Formic acid, optima LC/MS grade</td><td>Fisher Scientific</td><td>A117-50</td><td>for HPLC purification</td></tr><tr><td>Glycerol</td><td>VWR</td><td>M152-1L</td><td>for confocal microscopy</td></tr><tr><td>Hand tally counter</td><td>Fisher Scientific</td><td>S90189</td><td>for cell counting</td></tr><tr><td>Magnetic stir bars, egg-shaped</td><td>VWR</td><td>58949-006</td><td>for peptide conjugation</td></tr><tr><td>Methanol, ACS certified</td><td>Fisher Scientific</td><td>A412-4</td><td>for PAM synthesis</td></tr><tr><td>MTS cell proliferation colorimetric assay kit</td><td>VWR</td><td>10191-104</td><td>for MTS assay</td></tr><tr><td>N,N-Dimethylformamide, sequencing grade</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP1160-4</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>N-Methylmorpholine</td><td>Protein Technologies</td><td>S-1L-NMM</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Paraformaldehyde</td><td>Fisher Scientific</td><td>AC416780250</td><td>for fixing cells</td></tr><tr><td>PBS, pH 7.4</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>10010049</td><td>for various applications</td></tr><tr><td>Penicillin/streptomycin, 10,000 U/mL</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15140122</td><td>for cell culture</td></tr><tr><td>Peptide synthesis vessel, 25 mL&amp;nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>CG186011</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Phosphotungstic acid&amp;nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>A248-25</td><td>for TEM</td></tr><tr><td>Piperidine</td><td>Spectrum</td><td>P1146-2.5LTGL</td><td>for peptide synthesis</td></tr><tr><td>Plain glass microscope slide 75 x 25 mm</td><td>Fisher Scientific</td><td>12-550-A3</td><td>for confocal microscopy</td></tr><tr><td>Reagent reservoirs, sterile&amp;nbsp;</td><td>VWR</td><td>95128093</td><td>for cell culture</td></tr><tr><td>Self-closing tweezer</td><td>TedPella</td><td>515</td><td>for TEM</td></tr><tr><td>TEM support film</td><td>TedPella</td><td>01814F</td><td>for TEM</td></tr><tr><td>Trifluoroacetic acid&amp;nbsp;</td><td>Fisher Scientific</td><td>BP618-500</td><td>for peptide cleavage and HPLC purification</td></tr><tr><td>Triisopropylsilane</td><td>VWR</td><td>TCT1533-5ml</td><td>for peptide cleavage</td></tr><tr><td>Trypan blue solution, 0.4%</td><td>ThermoFisher Scientific</td><td>15250061</td><td>for cell counting</td></tr><tr><td>Tweezer, general purpose-serrated</td><td>VWR</td><td>231-SA-SE</td><td>for confocal microscopy</td></tr><tr><td>WEHI-274.1</td><td>ATCC</td><td>ATCC&amp;nbsp;CRL-1679</td><td>murine monocyte</td></tr><tr><td>automated benchtop peptide synthesizer</td><td>Protein Technologies</td><td></td><td>PS3 Benchtop Peptide Synthesizer</td></tr><tr><td>&amp;alpha;- cyano- 4- hydroxycinnamic acid, 99%</td><td>Sigma Aldrich</td><td>476870-2G</td><td>for MALDI</td></tr></tbody></table>

synthesis of monocyte-targeting peptide amphiphile micelles for imaging of atherosclerosis

動脈硬化は 1730 万生活を毎年要求する心血管疾患死、世界中の主要な原因への主要コントリビューターです。動脈硬化も突然死や心筋梗塞、不安定プラークは破裂し、警告することがなく血管を閉塞、によって扇動されるの主要な原因です。現在の画像診断法は、安定・不安定プラーク破裂を区別できません。病気の組織に結合する部分をターゲットのさまざまな変更できます、ペプチド両親媒性ミセル (PAMs) はこの欠点を克服することができます。単球は、球の大きい蓄積が破裂しやすいプラークを関連付けながら、動脈硬化の初期マーカーのように示されています。したがって、単球を対象とするナノ粒子は、アテローム性動脈硬化のさまざまな段階を識別する使用できます。ここでは、その終わりには PAMs の単球ターゲットの準備のためのプロトコル記述 (単球走化性因子蛋白質 1 (MCP 1) PAMs)。MCP 1 PAMs が 15 のフォームのナノ粒子に温和な条件下での合成を通じて組み立てられ自己と表面電荷は中性付近の径 nm。体外、 PAMs 生体適合性であると見つけられたおよび単球に高い結合親和性を持っていた。記載法は、動脈硬化だけでなく、その他の炎症性疾患のアプリケーションの広い範囲のための約束を示す.

MCP 1 PAM の準備 MCP 1 蛋白質 [YNFTNRKISVQRLASYRRITSSK] または [YNSLVFRIRNSTQRKYRASIST] スクランブル ペプチドの CCR2 結合モチーフ (残 13 35 基) は、N 末端のシステイン残基を追加することによって変更されました。自動ペプチド合成を用いた fmoc 保護を介した固相法による MCP 1 ペプチドが合成されました。粗ペプチドは 0.1% を使用して 50 ° C にある C8 カラムを逆相高...

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Synthesis of Monocyte-targeting Peptide Amphiphile Micelles for Imaging of Atherosclerosis

合成やペプチド両親媒性分子ミセルの単球ターゲットの評価手法を提案し、生体適合性および単球にバインドするミセルの機能をテストするための試金の対応します。

アテローム性動脈硬化のイメージングのためのペプチド両親媒性分子ミセルの単球ターゲットの合成

Atherosclerosis is a major contributor to cardiovascular disease, the leading cause of death worldwide, which claims 17.3 million lives annually. ...

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Research

JoVE Journal

Bioengineering

7.3K ビュー.  University of Southern California. 合成やペプチド両親媒性分子ミセルの単球ターゲットの評価手法を提案し、生体適合性および単球にバインドするミセルの機能をテストするための試金の対応します。

ビデオ: Synthesis of Monocyte-targeting Peptide Amphiphile Micelles for Imaging of Atherosclerosis

Polymalic Acid-based Nano Biopolymers for Targeting of Multiple Tumor Markers: An Opportunity for Personalized Medicine?

Tumors with similar grade and morphology often respond differently to the same treatment because of variations in molecular profiling. To account for this diversity, personalized medicine is developed for silencing malignancy associated genes. Nano drugs fit these needs by targeting tumor and delivering antisense oligonucleotides for silencing of genes. As drugs for the treatment are often administered repeatedly, absence of toxicity and negligible immune response are desirable. In the example presented here, a nano medicine is synthesized from the biodegradable, non-toxic and non-immunogenic platform polymalic acid by controlled chemical ligation of antisense oligonucleotides and tumor targeting molecules. The synthesis and treatment is exemplified for human Her2-positive breast cancer using an experimental mouse model. The case can be translated towards synthesis and treatment of other tumors.

An example of a nano drug based on polymalic acid is presented towards the rational design of personalized medicine that is applicable to cancer. It describes the synthesis of a nano drug to treat Her2-positive human breast cancer in a nude mouse.

複数の腫瘍マーカーのターゲットとするためのポリリンゴ酸ベースのナノバイオポリマー：個別化医療の機会？

Tumors with similar grade and morphology often respond differently to the same treatment because of variations in molecular profiling. To account for this ...

化学

A Facile and Efficient Approach for the Production of Reversible Disulfide Cross-linked Micelles

Nanomedicine is an emerging form of therapy that harnesses the unique properties of particles that are nanometers in scale for biomedical application. Improving drug delivery to maximize therapeutic outcomes and to reduce drug-associated side effects are some of the cornerstones of present-day nanomedicine. Nanoparticles in particular have found a wide application in cancer treatment. Nanoparticles that offer a high degree of flexibility in design, application, and production based on the tumor microenvironment are projected to be more effective with rapid translation into clinical practice. The polymeric micellar nano-carrier is a popular choice for drug delivery applications.
In this article, we describe a simple and effective protocol for synthesizing drug-loaded, disulfide cross-linked micelles based on the self-assembly of a well-defined amphiphilic linear-dendritic copolymer (telodendrimer, TD). TD is composed of polyethylene glycol (PEG) as the hydrophilic segment and a thiolated cholic acid cluster as the core-forming hydrophobic moiety attached stepwise to an amine-terminated PEG using solution-based peptide chemistry. Chemotherapy drugs, such as paclitaxel (PTX), can be loaded using a standard solvent evaporation method. The O2-mediated oxidation was previously utilized to form intra-micellar disulfide cross-links from free thiol groups on the TDs. However, the reaction was slow and not feasible for large-scale production. Recently, an H2O2-mediated oxidation method was explored as a more feasible and efficient approach, and it was 96 times faster than the previously reported method. Using this approach, 50 g of PTX-loaded, disulfide cross-linked nanoparticles have been successfully produced with narrow particle size distribution and high drug loading efficiency. The stability of the resulting micelle solution is analyzed using disrupting conditions such as co-incubation with a detergent, sodium dodecyl sulfate, with or without a reducing agent. The drug-loaded, disulfide cross-linked micelles demonstrated less hemolytic activity when compared to their non-cross-linked counterparts.

To deliver cancer drugs to tumor sites with high specificity and reduced side effects, new methods based on nanoparticles are required. Here, we describe disulfide cross-linked micelles that can be easily prepared by hydrogen peroxide-mediated oxidation and are able to dissociate efficiently under a reducing tumor environment to release payloads.

リバーシブルジスルフィド架橋ミセルの生産のための簡便かつ効率的なアプローチ

Nanomedicine is an emerging form of therapy that harnesses the unique properties of particles that are nanometers in scale for biomedical application. ...

生化学

MR Molecular Imaging of Prostate Cancer with a Small Molecular CLT1 Peptide Targeted Contrast Agent

Tumor extracellular matrix has abundance of cancer related proteins that can be used as biomarkers for cancer molecular imaging. In this work, we demonstrated effective MR cancer molecular imaging with a small molecular peptide targeted Gd-DOTA monoamide complex as a targeted MRI contrast agent specific to clotted plasma proteins in tumor stroma. We performed the experiment of evaluating the effectiveness of the agent for non-invasive detection of prostate tumor with MRI in a mouse orthotopic PC-3 prostate cancer model. The targeted contrast agent was effective to produce significant tumor contrast enhancement at a low dose of 0.03 mmol Gd/kg. The peptide targeted MRI contrast agent is promising for MR molecular imaging of prostate tumor.

To demonstrate MR cancer molecular imaging with a small peptide targeted MRI contrast agent specific to clotted plasma proteins in tumor stroma in a mouse prostate cancer model.

低分子CLT1ペプチド標的造影剤を用いて前立腺がんの分子イメージングのMR

Tumor extracellular  matrix has abundance of cancer related proteins that can be used as biomarkers  for cancer molecular imaging. In this work,  we ...

医学

Synthesis and Characterization of 1,2-Dithiolane Modified Self-Assembling Peptides

This report focuses on the synthesis of an N-terminus 1,2-dithiolane modified self-assembling peptide and the characterization of the resulting self-assembled supramolecular structures. The synthetic route takes advantage of solid-phase peptide synthesis with the on-resin coupling of the dithiolane precursor molecule, 3-(acetylthio)-2-(acetylthiomethyl)propanoic acid, and the microwave-assisted thioacetate deprotection of the peptide N-terminus before final cleavage from the resin to yield the 1,2-dithiolane modified peptide. After the high-performance liquid chromatography (HPLC) purification of the 1,2-dithiolane peptide, derived from the nucleating core of the A&#946; peptide associated with Alzheimer&#39;s disease, the peptide is shown to self-assemble into cross-&#946; amyloid fibers. Protocols to characterize the amyloid fibers by Fourier-transform infrared spectroscopy (FT-IR), circular dichroism spectroscopy (CD) and transmission electron microscopy (TEM) are presented. The methods of N-terminal modification with a 1,2-dithiolane moiety to well-characterized self-assembling peptides can now be explored as model systems to develop post-assembly modification strategies and explore dynamic covalent chemistry on supramolecular peptide nanofiber surfaces.

A protocol for the synthesis of a 1,2-dithiolane modified peptide and the characterization of the supramolecular structures resulting from the peptide self-assembly.

1, 2-ジチオランの合成とキャラクタリゼーション自己組織化ペプチド

This report focuses on the synthesis of an N-terminus 1,2-dithiolane modified self-assembling peptide and the characterization of the resulting ...

Preparation and Photoacoustic Analysis of Cellular Vehicles Containing Gold Nanorods

Gold nanorods are attractive for a range of biomedical applications, such as the photothermal ablation and the photoacoustic imaging of cancer, thanks to their intense optical absorbance in the near-infrared window, low cytotoxicity and potential to home into tumors. However, their delivery to tumors still remains an issue. An innovative approach consists of the exploitation of the tropism of tumor-associated macrophages that may be loaded with gold nanorods in vitro. Here, we describe the preparation and the photoacoustic inspection of cellular vehicles containing gold nanorods. PEGylated gold nanorods are modified with quaternary ammonium compounds, in order to achieve a cationic profile. On contact with murine macrophages in ordinary Petri dishes, these particles are found to undergo massive uptake into endocytic vesicles. Then these cells are embedded in biopolymeric hydrogels, which are used to verify that the stability of photoacoustic conversion of the particles is retained in their inclusion into cellular vehicles. We are confident that these results may provide new inspiration for the development of novel strategies to deliver plasmonic particles to tumors.

We show the preparation and address the feasibility of cellular vehicles containing gold nanorods for the photoacoustic imaging of cancer.

ゴールドナノロッドを含む細胞車の作製と光音響分析

Gold nanorods are attractive for a range of biomedical applications, such as the photothermal ablation and the photoacoustic imaging of cancer, thanks to ...

生物工学

Microwave-driven Synthesis of Iron Oxide Nanoparticles for Fast Detection of Atherosclerosis

A fast and reproducible microwave-driven protocol has been developed for the synthesis of neridronate-functionalized nanoparticles. Starting from the synthesis of hydrophobic nanoparticles, our method is based on an adaptation from thermal decomposition method to microwave driven synthesis. The new methodology produces a decrease in the reaction times in comparison with traditional procedures. Moreover, the use of the microwave technology increases the reproducibility of the reactions, something important from the point of view of clinical applications. The novelty of this iron oxide nanoparticle is the attachment of Neridronate. The use of this molecule leads a bisphosphonate moiety towards the outside of the nanoparticle that provides Ca2+ binding properties in vitro and selective accumulation in vivo in the atheroma plaque. The protocol allows the synthesis and plaque detection in about 3 hr since the initial synthesis from organic precursors. Their accumulation in the atherosclerotic area in less than 1 hr provides a contrast agent particularly suitable for clinical applications.

Microwave technology enables extremely fast synthesis of iron oxide nanoparticles for atherosclerosis plaque characterization. The use of an aminobisphosphonate in the external side of the nanoparticle provides a fast accumulation in the atherosclerotic area.

アテローム性動脈硬化症の高速検出のための酸化鉄ナノ粒子のマイクロ波駆動型の合成

A fast and reproducible microwave-driven protocol has been developed for the synthesis of neridronate-functionalized nanoparticles. Starting from the ...

Initial Evaluation of Antibody-conjugates Modified with Viral-derived Peptides for Increasing Cellular Accumulation and Improving Tumor Targeting

Antibody-conjugates (ACs) modified with virus-derived peptides are a potentially powerful class of tumor cell delivery agents for molecular payloads used in cancer treatment and imaging due to increased cellular accumulation over current ACs. During early AC in vitro development, fluorescence techniques and radioimmunoassays are sufficient for determining intracellular localization, accumulation efficiency, and target cell specificity. Currently, there is no consensus on standardized methods for preparing cells for evaluating AC intracellular accumulation and localization. The initial testing of ACs modified with virus-derived peptides is critical especially if several candidates have been constructed. Determining intracellular accumulation by fluorescence can be affected by background signal from ACs at the cell surface and complicate the interpretation of accumulation. For radioimmunoassays, typically treated cells are fractionated and the radioactivity in different cell compartments measured. However, cell lysis varies from cell to cell and often nuclear and cytoplasmic compartments are not adequately isolated. This can produce misleading data on payload delivery properties. The intravenous injection of radiolabeled virus-derived peptide-modified ACs in tumor bearing mice followed by radionuclide imaging is a powerful method for determining tumor targeting and payload delivery properties at the in vivo phase of development. However, this is a relatively recent advancement and few groups have evaluated virus-derived peptide-modified ACs in this manner. We describe the processing of treated cells to more accurately evaluate virus-derived peptide-modified AC accumulation when using confocal microscopy and radioimmunoassays. Specifically, a method for trypsinizing cells to remove cell surface bound ACs. We also provide a method for improving cellular fractionation. Lastly, this protocol provides an in vivo method using positron emission tomography (PET) for evaluating initial tumor targeting properties in tumor-bearing mice. We use the radioisotope 64Cu (t1/2 = 12.7 h) as an example payload in this protocol.

Viral-derived peptides coupled to antibody-conjugates (ACs) is an approach gaining momentum due to the potential of delivering molecular payloads with increased tumor cell accumulation. Utilizing common methods to evaluate peptide conjugation, AC and payload intracellular accumulation, and tumor targeting, this protocol helps researchers during the key initial development phases.

細胞集積量の増加と腫瘍標的化の改善のためウイルス由来ペプチド修飾抗体複合体の初期評価

Antibody-conjugates (ACs) modified with virus-derived peptides are a potentially powerful class of tumor cell delivery agents for molecular payloads used ...

Synthesis of Functionalized 10-nm Polymer-coated Gold Particles for Endothelium Targeting and Drug Delivery

Gold nanoparticles (AuNPs) have been used extensively in medical research due to their size, biocompatibility, and modifiable surface. Specific targeting and drug delivery are some of the applications of these AuNPs, but endothelial extracellular matrices&#39; defensive properties hamper particle uptake. To address this issue, we describe a synthesis method for ultrasmall gold nanoparticles to improve vascular delivery, with customizable functional groups and polymer lengths for further adjustments. The protocol yields 2.5 nm AuNPs that are capped with tetrakis(hydroxymethyl)phosphonium chloride (THPC). The replacement of THPC with hetero-functional polyethylene glycol (PEG) on the surface of the AuNP increases the hydrodynamic radius to 10.5 nm while providing various functional groups on the surface. The last part of the protocol includes an optional addition of a fluorophore to allow the AuNPs to be visualized under fluorescence to track nanoparticle uptake. Dialysis and lyophilization were used to purify and isolate the AuNPs. These fluorescent nanoparticles can be visualized in both in vitro and in vivo experiments due to the biocompatible PEG coating and fluorescent probes. Additionally, the size range of these nanoparticles render them an ideal candidate for probing the glycocalyx without disrupting normal vasculature function, which may lead to improved delivery and therapeutics.

We describe a method of synthesizing biocompatible 10-nm gold nanoparticles, functionalized by coating poly-ethylene glycol onto the surface. These particles can be used in vitro and in vivo for delivering therapeutics to nanoscale cellular and extracellular spaces that are difficult to access with conventional nanoparticle sizes.

粒子の合成機能 10 nm ポリマー コーティング金対象化、血管内皮細胞とドラッグデリバリー

Gold nanoparticles (AuNPs) have been used extensively in medical research due to their size, biocompatibility, and modifiable surface. Specific targeting ...

Quantification of Monocyte Transmigration and Foam Cell Formation from Individuals with Chronic Inflammatory Conditions

Coronary artery disease (CAD) is a leading cause of morbidity and mortality worldwide. Atherosclerosis, a leading cause of CAD, is initiated by the transmigration of innate immune monocytes to inflammatory sites of deposited lipid called fatty streaks, which are present in arterial walls of medium to large arteries. The key pathogenic feature of lesions at this early stage of atherosclerosis is the maturation of monocytes which migrate into arteries to form foam cells or lipid-laden macrophages. Considerable evidence supports the hypothesis that risk of atherosclerosis is increased by chronic inflammatory conditions accompanying diseases such as rheumatoid arthritis and HIV, as well as general ageing, and that this risk is predicted by monocyte activation. While mouse models provide a good platform to investigate the role of monocytes in atherogenesis in vivo, they require genetic alteration of natural cholesterol metabolism and drastic alteration of normal mouse diets, and have limited suitability for the study of atherogenic influences of human comorbid diseases. This motivated us to develop a human in vitro model to measure the atherogenic potential of monocytes isolated from individuals with defined disease states. Currently, human in vitro models are limiting in that they evaluate monocyte transmigration and foam cell formation in isolation. Here we describe a protocol in which monocytes isolated from patient blood transmigrate across human endothelial cells into a type 1 collagen matrix, and their propensity to mature into foam cells in the presence or absence of exogenous lipid is measured. The protocol has been validated for the use of human monocytes purified from individuals with HIV infection and elderly HIV uninfected individuals. This model is versatile and allows monocyte transmigration and foam cell formation to be evaluated using either microscopy or flow cytometry as well as allowing the assessment of atherogenic factors present in serum or plasma.

We describe a protocol to measure transmigration by monocytes across human endothelial monolayers and their subsequent maturation into foam cells. This provides a versatile method to assess the atherogenic properties of monocytes isolated from people with different disease conditions and to evaluate factors in blood which may enhance this propensity.

単球輪廻と慢性炎症性疾患を持つ個人から泡沫細胞の形成の定量化

Coronary artery disease (CAD) is a leading cause of morbidity and mortality worldwide. Atherosclerosis, a leading cause of CAD, is initiated by the ...

免疫・感染学

Preparation and Characterization of Targeted Microbubbles

Targeting of microbubbles (ultrasound contrast agents for molecular imaging) has been researched for more than two decades. However, methods of microbubble preparation and targeting ligand attachment are cumbersome, complicated, and lengthy. Therefore, there is a need to simplify the targeted microbubble preparation procedure to bring it closer to clinical translation. The purpose of this publication is to provide a detailed description and explanation of the steps necessary for targeted microbubble preparation, functional characterization and testing. A sequence of the optimized and simplified procedures is presented for two systems: a biotin-streptavidin targeting pair model, and a cyclic RGD peptide targeting the recombinant &#945;v&#946;3 protein, which is overexpressed on the endothelial lining of the tumor neovasculature.
Here, we show the following: covalent coupling of the targeting ligand to a lipid anchor, assessment of the reagent quality, and tests that confirm the successful completion of the reaction; preparation of the aqueous precursor medium containing microbubble shell components, followed by microbubble preparation via amalgamation; assessment of the efficacy of lipid transfer onto the microbubble stabilizer shell; adjustment of microbubble size distribution by flotation at normal gravity to remove larger microbubbles that might be detrimental for in vivo use; assessment of microbubble size distribution by electrozone sensing; evaluation of targeted binding of the microbubbles to receptor-coated surface in a static binding assay test (in an inverted dish); and evaluation of targeted binding of the microbubbles to receptor-coated surface in a parallel plate flow chamber test.

The goal of this protocol is to prepare, purify and characterize gas-filled microbubbles (targeted contrast agents for ultrasound molecular imaging). Two targeting systems are described: biotinylated bubbles adherent to streptavidin, and cyclic RGD peptide microbubbles that bind to &#945;v&#946;3, a known tumor neovasculature biomarker.

アテローム性動脈硬化のイメージングのためのペプチド両親媒性分子ミセルの単球ターゲットの合成

要約

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複数の腫瘍マーカーのターゲットとするためのポリリンゴ酸ベースのナノバイオポリマー：個別化医療の機会？

リバーシブルジスルフィド架橋ミセルの生産のための簡便かつ効率的なアプローチ

低分子CLT1ペプチド標的造影剤を用いて前立腺がんの分子イメージングのMR

1, 2-ジチオランの合成とキャラクタリゼーション自己組織化ペプチド

ゴールドナノロッドを含む細胞車の作製と光音響分析

アテローム性動脈硬化症の高速検出のための酸化鉄ナノ粒子のマイクロ波駆動型の合成

細胞集積量の増加と腫瘍標的化の改善のためウイルス由来ペプチド修飾抗体複合体の初期評価

粒子の合成機能 10 nm ポリマーコーティング金対象化、血管内皮細胞とドラッグデリバリー

単球輪廻と慢性炎症性疾患を持つ個人から泡沫細胞の形成の定量化

Preparation and Characterization of Targeted Microbubbles

アテローム性動脈硬化のイメージングのためのペプチド両親媒性分子ミセルの単球ターゲットの合成

要約

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複数の腫瘍マーカーのターゲットとするためのポリリンゴ酸ベースのナノバイオポリマー：個別化医療の機会？

リバーシブルジスルフィド架橋ミセルの生産のための簡便かつ効率的なアプローチ

低分子CLT1ペプチド標的造影剤を用いて前立腺がんの分子イメージングのMR

1, 2-ジチオランの合成とキャラクタリゼーション自己組織化ペプチド

ゴールドナノロッドを含む細胞車の作製と光音響分析

アテローム性動脈硬化症の高速検出のための酸化鉄ナノ粒子のマイクロ波駆動型の合成

細胞集積量の増加と腫瘍標的化の改善のためウイルス由来ペプチド修飾抗体複合体の初期評価

粒子の合成機能 10 nm ポリマー コーティング金対象化、血管内皮細胞とドラッグデリバリー

単球輪廻と慢性炎症性疾患を持つ個人から泡沫細胞の形成の定量化

Preparation and Characterization of Targeted Microbubbles

粒子の合成機能 10 nm ポリマーコーティング金対象化、血管内皮細胞とドラッグデリバリー