このプロトコルは、放射線生物学的研究のために、線量測定をできるだけ近いところに実際の細胞照射条件で行えるように開発されました。このプロトコルを使用すると、細胞が受け取る正確な用量を決定して多くのX線施設に適用可能にし、すべてのパラメータを考慮に入れて線量測定に変換することができます。すべての照射パラメータは、物理学者と放射線生物学者との緊密な連携を必要とする線量測定測定の最適な取得を可能にするために、アップストリームに設定する必要があります。
照射場評価を行うために、自己現像性の線量測定フィルムを照射に使用される支持に置き、フィルムに少なくとも2つの灰色を照射し、十分に印示された照射場を得る。専用のスキャナを使用して自己発達的な線量測定フィルムをスキャンし、分析とプロットプロファイルを使用してImageJで線量プロファイルをプロットします。次に、照射サポート面に印を付け、細胞容器が正しい位置に配置されることを確認します。
線量率測定を行うために、変更されたセル容器を照射支援エンクロージャに入れ、支持体表面に付けたマークに従って正しい位置にイオン化チャンバーを容器に入れます。全ての照射パラメータが適切に設定されていることを確認し、イオン化チャンバを5分間前照射する。電気計をゼロにして1分間の測定を10回行います。
次に、式を使用して、空気角膜における平均用量率を決定する。下流の識別のためにすべてのフィルムに番号を付ける。照射の少なくとも24時間前に、細胞容器の大きさに応じて自発性線量測定膜の断片を切断する。
キャリブレーションカーブを構築するには、非照射コントロール用に3枚のフィルムを取り付け、最初のフィルムを細胞容器の中に入れます。次いで、フィルムを照射し、第1の用量点を得る。すべてのフィルムが適切な選択した用量で三重に照射されると、較正曲線が生成され得る。
細胞培地の減衰および散乱を測定するために、全ての照射に対して同じ照射時間を選択し、3つの自己現像性線量測定膜を水なしで容器に照射する。次に、1枚のフィルムを容器に入れ、照射される媒体の体積と同じ量の水を容器に充填する。必要に応じて小さなテープを使用して、コンテナーをエンクロージャー内に配置します。
照射が完了したら、吸収性の紙でフィルムを乾燥させ、光から保護されたフィルムを保管します。照射から24時間後、スキャナーでTIFFフォーマットを48ビットの赤緑色ブルーに、伝送モードを150ドット/インチに設定し、画像補正を選択しません。スキャナーをウォームアップするには、スキャナーに照射されていないフィルムを置き、スキャンのプレビューを起動します。
プレビューの最後に、タイマーを開始し、スキャンを開始する前に 30 秒待ちます。スキャンの最後に、90 秒のタイマーを開始します。同時に、スキャンを登録し、イメージを ImageJ で開きます。
スキャン内の対象となる正方形の領域をトレースし、その領域の平均赤ピクセル レベルを測定します。90 秒の終わりに、スキャン プレビューを少なくとも 30 回繰り返して、スキャナーをウォームアップして安定させます。スキャナーが安定したら、フィルムをスキャナーベッドの中央に置き、スキャンのプレビューを開始します。
スキャンを開始する前に 30 秒待ちます。スキャンの終了時に、90 秒間待ってから次のスキャンを開始します。次にアッテナの厚さを推定する測定を行い、異なる減衰器の厚さをテストして、ビーム強度を2倍に減少させた厚さを見つけた。
この厚さを決定したところ、5つの測定値を測定し、温度および圧力補正係数によって補正された平均mRAW値を評価した。この構成では、0.667ミリメートルの銅の半値層が見つかりました。本代表分析では、自己現像性線量測定膜を照射し、照射場が均一である表面を決定し、細胞容器の正しい配置を可能にする。
細胞の正確な用量を決定するために、測定された空気ケルマ線量率は、水対空気に対する平均質量エネルギー吸収係数の比率を用いて水カルマに変換し、この分析のために1分間に0.659グレイと判定した。この細胞培地の減衰および散乱解析では、自己発達的なドシメトリーラジオクロミックフィルムを、ゼロとグレーの間の0.25グレイステップと1〜3グレイの間の0.5グレイステップで、最初に0〜3グレイの間で較正した。次に、線量ポイントを第4次多項式曲線を取り付けた。
ここで、日常測定に用いられる代表的な表が観察できる。すべての構成パラメータが尊重されていること、適切なセル容器内での評価、細胞培養培地の影響の評価を行っていることを確認します。線量参照測定を確立するために、いくつかのプロトコルが存在します。
重要なポイントは、特定のアプリケーションに適したプロトコルを選択することです。
