私たちの研究は、神経発達のさまざまな段階でのトラウマ曝露に起因する回路レベルの異常を特定することを目的としており、小児期のトラウマが成人の脳機能に与える影響をよりよく理解するために、思春期初期の身体的トラウマのモデルを開発しました。行動医療の専門家は、小児虐待の永続的な影響に苦しんでいる患者の増加を目の当たりにしています。しかし、現在のほとんどのげっ歯類の研究は、成人期のトラウマへの曝露や乳児のネグレクトの影響に焦点を当てています。
これらのいずれも、幼少期の虐待の歴史を持つ大人に見られる特有の課題に直接対処するものではありません。私たちのプロトコルは、成人期に敗北した動物の3分の2以上で一貫した回避表現型を生み出します。さらに、繁殖経験のない若い雄を雌と一緒に飼育することにより、私たちのプロトコルは、追加の成体B6マウスを使用して攻撃性を扇動することなく、頑健で攻撃的なCFW雄を生成することができ、プロトコルの容易さと徹底的な配置が向上します。
私たちの研究は、発達のさまざまな段階でのトラウマへの曝露が脳に独特の生物学的、行動的、解剖学的影響を与える方法の理解を深めるのに役立ち、うまくいけば、小児虐待を経験した個人のための治療技術の新たな開発に役立つことを願っています。まず、CFWの男性とCFW OVXの女性を1週間ペアにして、性的な経験を積み、男性の縄張り攻撃性を高めます。1週間後、CFW OVXメスをケージから取り出し、清潔で空のケージに入れます。
次に、刺激C57オスをCFWオスと一緒にケージに1分間導入し、攻撃の潜伏時間を記録します。その後、刺激C 57オスを取り除き、CFW OVXメスをCFWオスと一緒にケージに戻してから、ハウジングルームに戻します グループハウスCFWオス これは、攻撃しないか、2日以上で30秒を超える攻撃遅延を示します。これらの非攻撃的なCFWオスを、オープンフィールドの社会的相互作用試験中に刺激動物として使用します。
思春期のC57オスが生後4週間になったら、各動物の体重を測定し、体重を記録します。動物を対照群と敗北群の2つの等しいコホートに分け、2つのコホート間の重みが大きく異なることがないようにします。プレキシガラスの仕切りの片側に1つの対照青年C57を収容し、仕切りの反対側に別の対照青年C57を収容します。
11日目の家では、各対照青年は、実験の残りの部分で2つの間にプレキシガラスの仕切りを持つ異なる対照青年の隣にいます。倒すべき思春期のC57の体重を量り、記録します。直径4ミリメートルを超える創傷は、ここにスケールで示されており、試験動物の即時安楽死が必要です。
次に、CFW OVXメスを常駐のCFWオスと一緒にケージから取り出し、他のOVXメスと一緒に飼育します。その後、思春期のC 57を常駐のCFW男性のケージに導入し、ストップウォッチを始動します。30回噛んだ後、または5分後のいずれか早い方で思春期の若者をケージから取り出し、攻撃データを記録します。
次に、プレキシガラスの仕切りをCFW男性居住者のケージの中央に配置し、CFW居住者が一方に、敗北した青年がもう一方の側にあることを確認します。11日目に、実験期間中、敗北した青年を他の敗北した青年の横に収容し、それらの間にプレキシガラスの仕切りを置きます。コントロールと敗北した動物を1時間試験室に慣れさせます。
動物追跡ソフトウェアですべてのセッションを記録します。ワイヤーカップを壁の中点にある44 x 44 x 44センチメートルのアクリルアリーナの左壁に当てます。カップの周りに2センチメートルの円形の相互作用ゾーンを描きます。
次に、C 57をアリーナの隅に空のワイヤーカップで150秒間置きます。次に、C 57をアリーナから取り外し、清潔で空のケージに置きます。攻撃的でない、なじみのないCFWの成人男性をワイヤーカップの内側に置き、ワイヤーカップをアリーナ内に置きます。
CFW入りワイヤーカップでC57をアリーナに150秒間再導入します。両方の動物をそれぞれのケージに戻した後、水と70%エタノールでアリーナを掃除し、尿や糞便のある場所をきれいにしてから、次のC 57をテストします。空のカップを持つセッションとCFWを含むカップを持つセッションの両方について、任意のボディポイントが相互作用ゾーン内にある時間の長さを計算します。
相互作用ゾーンで費やした時間をCFWを含むカップと交換ゾーンで費やした時間を、空のカップとの相互作用ゾーンで費やした時間で割って、社会的相互作用率を算出します。オープンフィールドの社会的相互作用は、関心のある開発ウィンドウに応じて、10日間の敗北期間の後いつでも実行します。敗北した動物は、すべての試験時間時点で対照群と比較して、社会的相互作用率と生の社会的相互作用時間の両方で有意な減少を示した。
社会的相互作用の比率と時間の最も顕著な減少は、敗北の2週間後に発生し、敗北した動物は空のカップで過ごす時間の増加を示しました。ヒートマップにより、敗北したマウスは、すべての時点でコーナーでより多くの時間を過ごし、インタラクションゾーンで過ごす時間が短いことが確認されました。
