細胞周期のG1期における一本鎖DNA病巣の可視化

DNA損傷応答は生命に不可欠です。DNAは常に様々な有害なエンジンにさらされているため、その修復が欠如するとゲノムが不安定になったり、病気になったりします。我々は、RPA2の生物学的特性に基づいて、異なる細胞周期段階におけるDNA修復中の一本鎖DNA路を可視化する方法を開発しました。

一本鎖DNA検出の従来の方法では、BrdU抗体を利用します。このアプローチは、細胞を能動的に複製するために使用できます。さらに、この抗体は他のヌクレオチド類似体と交差反応する傾向があるため、その使用が制限されます。

BRDUとは異なり、このアプローチはS/N比が高いため、すべてのサイクルフェーズで使用できます。さまざまな細胞周期段階におけるさまざまなDNA修復経路の作用と、潜在的に非複製細胞を理解することは非常に重要です。私たちのプロトコルは、BrdUを利用する従来のアプローチが限られている一本鎖DNA病巣を視覚化するための新しいアプローチとツールを提供します。

DNA修復プロセスを包括的に理解することは、がん、老化、神経疾患を治療するための治療標的として役立つ可能性があります。私たちの細胞のほとんどは末端分化しているため、複製や分裂はしません。これらの細胞がさまざまなDNA病変をどのように修復するかをよりよく理解することが重要です。

そこで、本研究室では、主に複製後のDNA修復プロセスに着目し、それらを研究するための新しいツールを開発していきます。