この方法では、陽電子放出断層撮影法またはPETトレーサーガリウム-68 FAPI-46をiPHASEメディシンセサイザーで自動生成します。ガリウム-68 FAPI-46は、線維芽細胞活性化タンパク質(FAP)を標的とする新規PETイメージングトレーサーです。FAPは、ほとんどの固形腫瘍の微小環境において、がん関連線維芽細胞によって過剰発現されます。
ガリウム-68 FAPI-46は、複数の癌においてゴールドスタンダードのフッ素-18 FDGよりも診断上の利点を持つ非常に有望なPETトレーサーであることが示されています。ガリウム-68 FAPI-46の手動無線ラベリングは以前に報告されていますが、自動シンセサイザーの使用はGMPにより準拠しており、人員への放射線リスクが低くなります。ガリウム-68 FAPI-46の自動合成は、発電機とサイクロトロンで製造されたガリウム-68を使用して、さまざまな商用シンセサイザーで説明されています。
この製品は、89.8%の崩壊キュレーション収率で合成されました。最終製品は、推奨されるすべての品質管理仕様を満たし、合成後3時間安定していました。Galium-68 PSMA-11 または MultiSyn シンセサイザー上の Gallium-68 を製造するサイトは、このプロトコルを使用して Galium-68 FAPI-46 を製造するための完全な装備を備えている必要があると予想しています。
MSシンセサイザーを準備するには、ホットセルの圧縮空気、窒素ガスの供給、換気、照明、およびラップトップとプログラマブルロジックコントローラーへの電源をオンにします。モジュールの廃液ボトルのレベルを確認し、4分の3がいっぱいの場合は空のボトルと交換します。シンセサイザーソフトウェアにログオンした後、ダウンロードレシピを押します。
ガリウム-68 FAPI-46の製造用のExcelシーケンスファイルを選択し、開くを押します。シーケンスが正常にダウンロードされたら、[OK]をクリックします。スタートを押し、バッチ番号、試薬キットのロット番号、およびコメントをポップアップウィンドウに入力してから、[OK]を押します。
ユーザーインターフェースのステップメッセージに従って、古いハードウェアキットを取り外し、[次へ]を押します。次に、ユーザーインターフェースの指示に従って、サムレストをシリンジドライバースロットから引き出し、シリンジをジェネレーターインレットラインから緩めて、ジェネレーター溶出シリンジをシンセサイザーから取り外します。ユーザーインターフェースの[次へ]を押します。
まず、50ミリリットルのチューブのキャップに約2ミリリットルの水を注ぎます。シリンジAとラベル付けされた5ミリリットルのシリンジに1ミリリットルの水を引き出し、針で蓋をします。ピペット400マイクロリットルの水。
バイアルAとラベル付けされた7ミリグラムのアスコルビン酸バイアルに加え、静かに振って溶解します。付属の0.25モルの酢酸ナトリウム緩衝液バイアルと50マイクログラムのFAPI-46ガラスバイアルを開きます。ピペットを使用して、0.9ミリリットルのバッファーをバイアルBとラベル付けされたFAPI-46ガラスバイアルに移し、穏やかに混合します。
バイアルAとバイアルBの内容物をシリンジAに取り出し、穏やかに混合します。補助セットに付属の5ミリリットルのシリンジにシリンジBのラベルを付けます。シリンジBを使用して、0.1モルの塩酸バッグから0.1モルの塩酸を5ミリリットル引き出し、付属のディスペンシングピンでキャップします。.補助キットに付属の3ミリリットルのシリンジにシリンジC.から酸性化された5モル塩化ナトリウム溶液バイアルから、溶液の1ミリリットルをシリンジCにピペットで入れ、付属のディスペンシングピンでキャップします。
0.9%生理食塩水の1ミリリットルをシリンジDとラベル付けされた5ミリリットルのシリンジに引き出し、バイアルに追加して専用の滅菌ガリウム68カセットを組み立て C.To、カセットエンベロープを開封して損傷がないか確認します。各ルアー接続を締め、カセット上の各ストップコックを回転させて位置合わせし、詰まらず、モジュールに収まるようにします。すべてのスパイクキャップを取り外します。
強カチオン性交換精製前SPEカートリッジをコンディショニングするには、マニホールド3バルブ7に配置されたカートリッジをカセットから取り外します。試薬キットに付属の3モル塩酸を2ミリリットル入ったシリンジをSPEカートリッジに取り付け、カートリッジからゆっくりと溶出させて専用のガラス廃液ボトルに入れます。シリンジを取り外し、5ミリリットルの空気を引き出し、SPEカートリッジをシリンジで洗い流します。
試薬キットに付属の5ミリリットルの水が入ったシリンジをSPEカートリッジに取り付け、ガラス廃棄物ボトルにゆっくりと滴下します。前に示したように、カートリッジを空気で洗い流します。ユーザーインターフェースの[次へ]を押します。
ユーザーインターフェースに示されているように、適切な接続に従って、試薬なしで新しいカセットの組み立てと取り付けに進みます。まず、補助セットの10ミリリットルシリンジをマニホールド2バルブ6に接続します。4つのマニホールドを取り付け、シンセサイザーの磁気ロックを使用してカセットをロックします。
リアクターをオーブンに入れます。チューブをG1、W2、W1、R、およびG2ポートに接続します。マニホールド1バルブ3右側のチューブをマニホールド3バルブ7の陽イオン交換カートリッジに接続します。
SPE精製後カートリッジをマニホールド2バルブ4に取り付けます。最後に、ユーザーインターフェイスの[次へ]を押します。まず、試薬キットからエタノール、生理食塩水、水バイアルのキャップを取り外し、各セプタムをアルコールワイプで拭きます。
シンセサイザーからプロンプトが表示されたら、ユーザーインターフェイスの[次へ]をクリックする前に、それぞれのバイアルをM4バルブ10、M4バルブ11、およびM4バルブ12の位置に取り付けます。シリンジAから針を取り外し、プランジャーを5ミリリットルに引きます。ラインをリアクターミドルポートに切断した後、シリンジAの内容物をリアクターミドルポートを介してリアクターバイアルに移します。
ラインをリアクターの中央ポートに再接続し、ユーザーインターフェイスの[次へ]をクリックします。発電機の出口ラインをカセットのM1バルブ2の位置に取り付け、[次へ]をクリックします。シリンジCからディスペンスニードルを取り外した後、M1バルブ3の位置に取り付け、[次へ]をクリックします。
シリンジから分注針を取り外す B.シリンジBをジェネレーターインレットラインフィッティングのルアーロックに接続し、シリンジBを押してプランジャーの親指レストがシリンジドライバースロットにスライドするようにしてから、[次へ]をクリックします。最終製品のバイアルを調製するには、クラス2の生物学的安全キャビネットまたは同等のものに入れ、ラベル付きの25ミリリットルの滅菌バイアルをタングステンまたは適切にシールドされたポットに入れます。バイアルの中隔をアルコールワイプで拭いた後、ポットに蓋をして、ろ過したベントニードルを挿入します。
低タンパク質吸着性滅菌0.22ミクロンPVDFベントフィルターの出口を滅菌20ゲージ皮下注射針に接続します。フィルターに製品バッチ番号をラベル付けし、通気孔のある25ミリリットルの最終製品バイアルに針を挿入します。バイアルCの内容物を空のシリンジDに引き出し、4ミリリットルの空気を加えます。
シリンジDを0.22ミクロンのベントフィルターのインレットに接続し、シリンジの内容物をフィルターとニードルを通して最終製品のバイアルに押し込みます。通気口フィルターからシリンジを取り外す前に、フィルターを5ミリリットルの空気で2回洗い流します。最終製品のバイアルが入ったポットをホットセルに移した後、M2バルブ5の位置からエンドチューブを製品バイアルフィルターに接続します。
[次へ]をクリックし、シンセサイザーが準備手順を実行するのを待ちます。「Ga-68ジェネレーターを溶出する準備ができました」というプロンプトが表示されたら、ユーザーインターフェースの「次へ」を押します。自動合成が開始されたら、戦略的に配置された3つの無線活動検出器、精製前カートリッジ、リアクター、精製後カートリッジの活動を観察して、回路図タブで無線ラベリングをリアルタイムで監視します。
あるいは、合成中の各検出器の活性プロファイルを示すトレンドタブをご覧ください。「合成が完了しました」というメッセージが表示されたら、滅菌ベントフィルターとろ過されたベントニードルを最終製品のバイアルから取り外し、ホットセルからタングステンポットを取り出します。
