Данный метод представляет собой автоматизированное изготовление позитронно-эмиссионной томографии или ПЭТ-индикатора галлия-68 FAPI-46 на синтезаторе медицины iPHASE. Галлий-68 FAPI-46 — это новый ПЭТ-индикатор для визуализации, нацеленный на белок активации фибробластов, или FAP. FAP чрезмерно экспрессируется ассоциированными с раком фибробластами в микроокружении большинства солидных опухолей.
Было показано, что галлий-68 FAPI-46 является очень многообещающим индикатором ПЭТ с диагностическим преимуществом перед золотым стандартом фтор-18 FDG при множественных видах рака. Несмотря на то, что ранее сообщалось о ручной радиомаркировке галлия-68 FAPI-46, использование автоматизированного синтезатора в большей степени соответствует требованиям GMP и представляет меньший риск облучения для персонала. Описан автоматизированный синтез галлия-68 FAPI-46 на различных коммерческих синтезаторах с использованием генераторного и циклотронного производства галлия-68.
Продукт был синтезирован с курируемым выходом 89,8%. Конечный продукт соответствовал всем рекомендованным требованиям контроля качества и был стабильным в течение трех часов после синтеза. Мы предполагаем, что любое предприятие, производящее галлий-68, PSMA-11 или галлий-68 на синтезаторе MultiSyn, должно быть полностью оборудовано для производства галлия-68 FAPI-46 с использованием этого протокола.
Чтобы подготовить синтезатор МС, включите горячую ячейку сжатого воздуха, подачу азота, вентиляцию, свет и питание ноутбука и программируемого логического контроллера. Проверьте уровень отработанной бутылки модуля и замените ее пустой бутылкой, если она заполнена на три четверти. После входа в программное обеспечение синтезатора нажмите кнопку «Скачать рецепт».
Выберите файл последовательности Excel для производства галлия-68 FAPI-46 и нажмите открыть. Нажмите кнопку «ОК» после успешной загрузки последовательности. Нажмите «Пуск», введите номер партии, номер партии набора реагентов и любые комментарии во всплывающем окне, прежде чем нажать кнопку «ОК».
Следуя пошаговому сообщению в пользовательском интерфейсе, извлеките старый комплект оборудования и нажмите кнопку «Далее». Затем, в соответствии с инструкцией пользовательского интерфейса, извлеките шприц для элюирования генератора из синтезатора, вытащив упор для большого пальца из слота для драйвера шприца и открутив шприц от входной линии генератора. Нажмите кнопку «Далее» в пользовательском интерфейсе.
Для начала налейте примерно два миллилитра воды в колпачок 50-миллилитровой трубки. Наберите один миллилитр воды в пятимиллилитровый шприц с маркировкой «Шприц А» и заколите его иглой. Пипетка 400 микролитров воды.
Добавьте его во флакон с аскорбиновой кислотой объемом семь миллиграммов, помеченный флаконом А, и осторожно встряхните, чтобы он растворился. Откройте прилагаемый флакон с буфером из ацетата натрия 0,25 мкм и стеклянный флакон FAPI-46 50 мкг. С помощью пипетки переложите 0,9 миллилитра буфера в стеклянный флакон FAPI-46 с маркировкой В и аккуратно перемешайте.
Наберите содержимое флакона А и флакона В в шприц А и осторожно перемешайте. Пометьте пятимиллилитровый шприц, входящий в комплект вспомогательного оборудования, как шприц В. С помощью шприца В извлеките пять миллилитров 0,1 молярной соляной кислоты из пакета 0,1 молярной соляной кислоты и закройте его прилагаемым дозатором. Пометьте трехмиллилитровый шприц, входящий в комплект вспомогательного оборудования, как шприц C. Из подкисленного флакона с пятью молярами раствора хлорида натрия налейте пипеткой один миллилитр раствора в шприц C и закройте его прилагаемым дозатором.
Наберите один миллилитр 0,9% физиологического раствора в пятимиллилитровый шприц с маркировкой D и добавьте его во флакон C.To соберите специальную стерильную кассету из галлия-68, разверните конверт кассеты и проверьте на наличие повреждений. Затяните соединение каждой приманки, поверните и выровняйте каждый запорный кран на кассете, чтобы убедиться, что они не застряли и подходят к модулю. Снимите все колпачки с шипами.
Для кондиционирования сильного катионного обмена картриджа предварительной очистки SPE извлеките картридж, расположенный на коллекторе на третьем клапане семь из кассеты. Прикрепите шприц, содержащий два миллилитра соляной кислоты трех моляров, входящих в комплект реактивов, к картриджу SPE и медленно вытрите его через картридж по каплям в специальную стеклянную бутылку для отходов. Извлеките шприц, наберите пять миллилитров воздуха и промойте им картридж SPE.
Присоедините шприц, содержащий пять миллилитров воды, входящий в комплект реагентов, к картриджу SPE и медленно выведите его по каплям в стеклянную бутылку для отходов. Промойте картридж воздухом, как показано ранее. Нажмите кнопку «Далее» в пользовательском интерфейсе.
Как показано в пользовательском интерфейсе, перейдите к сборке и установке новой кассеты без каких-либо реагентов после соответствующих соединений. Сначала подсоедините шприц на 10 миллилитров от вспомогательного набора к коллектору два клапана шесть. Установите четыре коллектора и заблокируйте кассету с помощью магнитных замков синтезатора.
Поместите реактор в духовку. Подсоедините трубки к портам G1, W2, W1, R и G2. Подсоедините коллектор одним клапаном трех правых боковых трубок к катионитановому картриджу на коллекторе три клапана семь.
Установите картридж для последующей очистки SPE на коллектор два клапана четыре. Наконец, нажмите кнопку «Далее» в пользовательском интерфейсе. Для начала снимите крышки флаконов с этанолом, физиологическим раствором и водой из набора реагентов и промокните каждую перегородку спиртовой салфеткой.
По запросу синтезатора установите соответствующие флаконы в положения M4 valve 10, M4 valve 11 и M4 valve 12, прежде чем нажать далее в пользовательском интерфейсе. Извлеките иглу из шприца А и наберите поршень до пяти миллилитров. После отсоединения линии от среднего порта реактора передайте содержимое шприца А в пробирку реактора через средний порт реактора.
Снова подключите линию к среднему порту реактора и нажмите кнопку «Далее» в пользовательском интерфейсе. Установите выходные линии генератора на кассету в положение M1 клапан два и нажмите кнопку «Далее». После извлечения дозирующей иглы из шприца С установите ее в положение М1 клапана три и нажмите кнопку «Далее».
Извлеките дозирующую иглу из шприца B. Подключите шприц B к блокировке Люэра на фитинге входной линии генератора и нажмите на шприц B так, чтобы упор для большого пальца поршня скользнул в слот для водителя шприца, прежде чем нажать далее. Чтобы приготовить флакон с конечным продуктом, поместите в шкаф биологической безопасности второго класса или эквивалентный контейнер с маркировкой объемом 25 миллилитров в вольфрамовый или соответствующим образом экранированный сосуд. Промокнув перегородку флакона спиртовой салфеткой, накройте кастрюлю крышкой и вставьте в нее отфильтрованную вентиляционную иглу.
Подсоедините выходное отверстие стерилизующего фильтра 0,22 микрона PVDF с низким связыванием белка к стерильной игле для подкожных инъекций 20 калибра. Наклейте на фильтр маркировку с номером партии продукта и вставьте иглу в вентилируемый флакон с конечным продуктом объемом 25 миллилитров. Выведите содержимое флакона С в пустой шприц D и добавьте четыре миллилитра воздуха.
Подсоедините шприц D к входному отверстию вентилируемого фильтра 0,22 микрона и протолкните содержимое шприца через фильтр и иглу в флакон с конечным продуктом. Дважды промойте фильтр пятью миллилитрами воздуха, прежде чем извлечь шприц из вентилируемого фильтра. После переноса кастрюли с конечным продуктом в горячую камеру подсоедините концевую трубку из положения M2 клапана 5 к фильтру флакона с продуктом.
Нажмите далее и подождите, пока синтезатор выполнит предварительные шаги. Когда появится подсказка «Генератор Ga-68 готов к элюированию», нажмите «Далее» в пользовательском интерфейсе. Как только начнется автоматический синтез, отслеживайте маркировку радиочастот в режиме реального времени на вкладке схемы, наблюдая за активностью трех стратегически расположенных детекторов радиоактивности, картриджа предварительной очистки, реактора и картриджа для последующей очистки.
В качестве альтернативы можно посмотреть вкладку «Тренды», показывающую профиль активности каждого детектора во время синтеза. Когда появится сообщение «Синтез завершен», извлеките стерилизующий вентиляционный фильтр и отфильтрованную вентиляционную иглу из флакона с конечным продуктом и извлеките вольфрамовый горшок из горячей камеры.
