Questo metodo presenta la produzione automatizzata della tomografia a emissione di positroni o tracciante PET gallio-68 FAPI-46 sul sintetizzatore di farmaci iPHASE. Gallio-68 FAPI-46 è un nuovo tracciante di imaging PET che ha come bersaglio la proteina di attivazione dei fibroblasti, o FAP. La FAP è sovraespressa dai fibroblasti associati al cancro nel microambiente della maggior parte dei tumori solidi.
Il gallio-68 FAPI-46 ha dimostrato di essere un tracciante PET molto promettente con un vantaggio diagnostico rispetto al gold standard fluoro-18 FDG in diversi tumori. Sebbene la marcatura radio manuale del gallio-68 FAPI-46 sia stata segnalata in precedenza, l'uso di un sintetizzatore automatizzato è più conforme alle GMP e pone un minor rischio di radiazioni per il personale. La sintesi automatizzata del gallio-68 FAPI-46 è stata descritta su diversi sintetizzatori commerciali utilizzando il gallio-68 prodotto dal generatore e il ciclotrone.
Il prodotto è stato sintetizzato con una resa curata con decadimento dell'89,8%. Il prodotto finale ha soddisfatto tutte le specifiche di controllo qualità raccomandate ed è rimasto stabile per tre ore dopo la sintesi. Prevediamo che qualsiasi sito di produzione di gallio-68 PSMA-11 o gallio-68 sul sintetizzatore MultiSyn dovrebbe essere completamente attrezzato per produrre gallio-68 FAPI-46 utilizzando questo protocollo.
Per preparare il sintetizzatore MS, accendere l'aria compressa a celle calde, l'alimentazione di azoto gassoso, la ventilazione, la luce e l'alimentazione al laptop e al controller logico programmabile. Controllare il livello del flacone di scarico del modulo e sostituirlo con un flacone vuoto se è pieno per tre quarti. Dopo aver effettuato l'accesso al software del sintetizzatore, premere scarica ricetta.
Selezionare il file di sequenza Excel per la produzione di gallio-68 FAPI-46 e premere per aprire. Fare clic su OK dopo che la sequenza è stata scaricata correttamente. Premere start, inserire il numero di lotto, il numero di lotto del kit di reagenti ed eventuali commenti nella finestra popup prima di premere OK.
Seguendo il messaggio di passaggio sull'interfaccia utente, rimuovere il vecchio kit hardware e premere Avanti. Successivamente, secondo le istruzioni dell'interfaccia utente, rimuovere la siringa di eluizione del generatore dal sintetizzatore estraendo il poggiapollice dalla fessura del driver della siringa e svitando la siringa dalla linea di ingresso del generatore. Premere Avanti sull'interfaccia utente.
Per iniziare, versare circa due millilitri di acqua nel tappo di un tubo da 50 millilitri. Aspirare un millilitro d'acqua in una siringa da cinque millilitri etichettata siringa A e tapparla con un ago. Pipettare 400 microlitri di acqua.
Aggiungilo alla fiala di acido ascorbico da sette milligrammi etichettata con la fiala A e agita delicatamente per scioglierla. Aprire la fiala di tampone di acetato di sodio molare da 0,25 molari in dotazione e la fiala di vetro FAPI-46 da 50 microgrammi. Utilizzando una pipetta, trasferire 0,9 millilitri di tampone nel flaconcino di vetro FAPI-46 etichettato con il flaconcino B e mescolare delicatamente.
Estrarre il contenuto del flaconcino A e del flaconcino B nella siringa A e mescolare delicatamente. Etichettare la siringa da cinque millilitri fornita nel set ausiliario come siringa B.Con la siringa B, prelevare cinque millilitri di acido cloridrico molare da 0,1 molari dalla sacca di acido cloridrico molare da 0,1 e tapparla con il perno di erogazione fornito. Etichettare la siringa da tre millilitri fornita nel kit ausiliario come siringa C.Dalla fiala acidificata della soluzione di cloruro di sodio a cinque molari, pipettare un millilitro di soluzione nella siringa C e tapparla con il perno di erogazione fornito.
Prelevare un millilitro di soluzione fisiologica allo 0,9% in una siringa da cinque millilitri etichettata come siringa D e aggiungerlo alla fiala C.To assemblare una cassetta sterile dedicata al gallio-68, scartare la busta della cassetta e verificare la presenza di eventuali danni. Stringere ogni connessione dell'esca e ruotare e allineare ogni rubinetto sulla cassetta per assicurarsi che non siano bloccati e si adattino al modulo. Rimuovere tutti i cappucci delle punte.
Per condizionare la cartuccia SPE di pre-purificazione a forte scambio cationico, rimuovere dalla cassetta la cartuccia posizionata sul collettore tre valvole sette. Collegare la siringa contenente due millilitri di acido cloridrico a tre molari fornita nel kit di reagenti sulla cartuccia SPE ed eluirla lentamente attraverso la cartuccia goccia a goccia in un apposito flacone di rifiuti in vetro. Rimuovere la siringa, prelevare cinque millilitri d'aria e sciacquare con essa la cartuccia SPE.
Collegare la siringa contenente cinque millilitri di acqua fornita nel kit di reagenti alla cartuccia SPE ed eluire lentamente goccia a goccia nel flacone di scarto di vetro. Sciacquare la cartuccia con aria come dimostrato in precedenza. Premere Avanti sull'interfaccia utente.
Come mostrato nell'interfaccia utente, procedere al montaggio e all'installazione della nuova cassetta senza alcun reagente seguendo gli opportuni collegamenti. Innanzitutto, collegare la siringa da 10 millilitri dal set ausiliario al collettore due valvole sei. Installare i quattro collettori e bloccare la cassetta utilizzando i blocchi magnetici del sintetizzatore.
Mettere il reattore nel forno. Collegare i tubi alle porte G1, W2, W1, R e G2. Collegare il collettore una valvola tre tubi sul lato destro alla cartuccia di scambio cationico sul collettore tre valvola sette.
Installare una cartuccia di post-purificazione SPE sul collettore due valvole quattro. Infine, premi Avanti sull'interfaccia utente. Per iniziare, rimuovere i tappi delle fiale di etanolo, soluzione salina e acqua dal kit di reagenti e tamponare ogni setto con una salvietta imbevuta di alcol.
Quando richiesto dal sintetizzatore, installare le rispettive fiale nelle posizioni M4 valvola 10, M4 valvola 11 e valvola M4 12 prima di fare clic su Avanti nell'interfaccia utente. Rimuovere l'ago dalla siringa A e portare lo stantuffo a cinque millilitri. Dopo aver scollegato la linea dalla porta centrale del reattore, trasferire il contenuto della siringa A nella fiala del reattore tramite la porta centrale del reattore.
Ricollegare la linea alla porta centrale del reattore e fare clic su Avanti nell'interfaccia utente. Installare le linee di uscita del generatore sulla cassetta in posizione M1 valvola due e fare clic su Avanti. Dopo aver rimosso l'ago di erogazione dalla siringa C, installarlo in posizione M1 valvola tre e fare clic su Avanti.
Rimuovere l'ago di erogazione dalla siringa B.Collegare la siringa B Luer lock sul raccordo della linea di ingresso del generatore e spingere la siringa B in modo che il poggiapollice dello stantuffo scivoli nella fessura del driver della siringa prima di fare clic su Avanti. Per preparare la fiala del prodotto finale, in una cappa di sicurezza biologica di classe due o equivalente, posizionare una fiala sterile da 25 millilitri etichettata in un vaso di tungsteno o adeguatamente schermato. Dopo aver tamponato il setto della fiala con una salvietta imbevuta di alcol, posizionare un coperchio sul vaso e inserire un ago di sfiato filtrato.
Collegare l'uscita di un filtro ventilato in PVDF da 0,22 micron sterilizzante a basso legame proteico a un ago ipodermico sterile da 20 gauge. Etichettare il filtro con il numero di lotto del prodotto e inserire l'ago nel flaconcino di prodotto finale da 25 millilitri ventilato. Prelevare il contenuto del flaconcino C nella siringa D vuota e aggiungere quattro millilitri di aria.
Collegare la siringa D all'ingresso del filtro ventilato da 0,22 micron e spingere il contenuto della siringa attraverso il filtro e l'ago nella fiala del prodotto finale. Sciacquare il filtro due volte con cinque millilitri d'aria prima di rimuovere la siringa dal filtro ventilato. Dopo aver trasferito il recipiente contenente il flacone del prodotto finale nella cella calda, collegare il tubo terminale dalla valvola M2 cinque al filtro del flaconcino del prodotto.
Fare clic su Avanti e attendere che il sintetizzatore esegua i passaggi preliminari. Quando viene visualizzato il messaggio "Pronto per eluire il generatore di Ga-68", premere Avanti sull'interfaccia utente. Una volta avviata la sintesi automatizzata, monitorare l'etichettatura radio in tempo reale sulla scheda schematica osservando l'attività dei tre rilevatori di attività radio posizionati strategicamente, della cartuccia di pre-purificazione, del reattore e della cartuccia di post-purificazione.
In alternativa, vedere la scheda delle tendenze che mostra il profilo di attività di ciascun rivelatore durante la sintesi. Quando viene visualizzato il messaggio "Sintesi completata", rimuovere il filtro di sfiato sterilizzante e l'ago di sfiato filtrato dalla fiala del prodotto finale e recuperare il vaso di tungsteno dalla cella calda.
