私たちの研究は、自閉症スペクトラム障害(ASD)の病態生理学に焦点を当てています。具体的には、ASDに関与する分子メカニズムと、行動障害の原因について見ていきます。これらが一緒になって、ASDに関連する特定の治療が含まれ、ASDに苦しむ人々の生活を改善します。
私たちの研究における課題の一つは、ASD関連の行動に関する研究を改善し、それを異なる研究室間で伝達することです。異なる研究所間、行動評価の方法には多くのばらつきがあり、それが治療を現場に進めるための大きな問題です。ですから、私たちのプロトコルにより、これらの進歩と世界中の研究所間のコミュニケーションに役立つことを願っています。
グルーミングと3チャンバー試験プロトコルを最適化し、詳細化することで、研究者がASDマウスモデルから信頼性と再現性のある結果を得るために信頼できる一貫したフレームワークを確立します。この標準化により、さまざまな研究所からの知見のより良い協力と解釈が促進され、ASDの理解と潜在的な治療法の開発につながります。当研究室では、自閉症様行動における細胞型特異的な翻訳過程の解明に関心を持っています。
さらに、メトホルミンなどのASDモデルマウスにおける治療応用の可能性についても研究しました。まず、調光照明のスイッチを入れます。テーブルを掃除し、部屋をセッティングします。
各テストケージには、新鮮な寝具を薄く敷き詰めます。テーブルの上に1〜2個のケージを置き、白いプラスチック製の目隠しで互いに、部屋の環境から分離します。次に、各ケージの前にカメラを配置して、テストマウスをキャプチャします。
ケージを布シートで覆い、すべてのマウスを部屋に移して、移乗プロセス中のストレスを避けます。マウスを試験室に置いたら、シートをはがします。実験を開始する前に、照明を暗くした部屋に少なくとも 30 分間置いておきます。
テストの開始時に、マウスの識別番号とテスト情報をホワイトボードに書き留めます。テストマウスを新しい寝具と一緒にケージに入れます。録音を開始し、テストマウスをテストケージに入れます。
20分間の録音セッション中に部屋を出てください。20分後、部屋に戻ります。ホワイトボードをカメラに提示し、録音を停止します。
テストマウスをホームケージに戻し、実験を繰り返します。実験が終わったら、マウスを住居に戻します。セルフグルーミング試験では、Eif4ebp2ノックアウトマウスでは対照マウスと比較してグルーミング時間が長いことが明らかになりました。
Eif4ebp2ノックアウトマウスは、対照マウスよりも有意に多くのグルーミング発作を示しました。まず、テーブルを掃除し、調光されたライトをオンにします。3室のプレキシガラス製器具を、プライバシーブラインドで囲まれたテーブルの上に置きます。
1台のカメラを頭上に配置し、3つのチャンバーすべてがカメラの録画フレーム内にあることを確認します。次に、テストマウスと見知らぬマウスを部屋に移し、移し替えプロセス中にケージを布シートで覆います。シートが部屋に入ったら、シートをはがします。
実験を開始する前に、照明を暗くしてマウスを部屋に少なくとも30分間放置します。慣れるまでは、3つの部屋を空に保ちます。テストマウスを選択したら、ホワイトボードに識別番号を記入します。
スライドドアを閉じたまま、テストマウスを中央のコンパートメントに置きます。ドアを開けて記録を開始し、テストマウスが3つの空のチャンバーを10分間探索できるようにします。10分後、部屋に戻ります。
テストマウスを中央のコンパートメントにそっと導き、スライドドアを閉じます。ホワイトボードを表示し、カメラを停止します。左右のチャンバーに2つのワイヤーケージを配置し、各チャンバーの角で互いに対角線上に配置します。
ケージとチャンバーの壁の間の距離を測定します。ケージがチャンバードアに直接向かっていないことを確認してください。見知らぬマウスを1つ選択し、ワイヤーケージの1つに導入し、もう1つのケージを空のままにします。
テストを開始するには、部屋を出る前に録音を押して両方のスライドドアを取り外します。テストマウスが、一方のチャンバー内の空のワイヤーケージともう一方のチャンバー内の見知らぬマウスを含むケージを10分間探索できるようにします。10分後、部屋に戻ります。
ホワイトボードをカメラに表示し、録画を終了します。マウスを中央のコンパートメントに再度導入し、相互接続ドアを閉じます。以前に空だったワイヤーケージに、遭遇したことのない新しいマウスを置きます。
録音を開始し、相互接続ドアを開いて、テストマウスが部屋を出る前に10分間装置を探索できるようにします。テストマウスは、以前に遭遇したS1マウスと新しく導入されたS2マウスの2つのワイヤーケージを10分間探索します。10分後、部屋に戻ります。
ホワイトボードをカメラに表示し、録音を終了します。すべてのマウスを自宅のケージに戻します。無臭の消毒剤を使用してチャンバーとワイヤーケージを徹底的に洗浄し、次の実験の前に装置を乾燥させます。
試験後、マウスを飼育施設に戻します。マウスは、新しい無生物よりもS1と対話することを好みました。同様に、C57BL/6Jマウスは、馴染みのあるS1よりも新しく導入されたS2に強い関心を示しました。
