המחקר שלנו מתמקד בפתופיזיולוגיה של הפרעת הספקטרום האוטיסטי, ASD. ובאופן ספציפי, אנו בוחנים את המנגנונים המולקולריים המעורבים ב-ASD ומה גורם לליקויים ההתנהגותיים. אלה יחד יכללו טיפולים ספציפיים הקשורים לאוטיזם וישפרו את חייהם של אנשים הסובלים מ-ASD.
אחד האתגרים במחקר שלנו הוא לשפר את המחקר עם התנהגות הקשורה לאוטיזם ולתקשר זאת בין מעבדות שונות. יש שונות רבה בין המעבדות השונות, האופן שבו הן מבצעות את ההערכות ההתנהגותיות, וזו בעיה גדולה לקדם טיפולים בתחום. לכן אנו מקווים שבעזרת הפרוטוקולים שלנו, נעזור להתקדמות זו ולתקשורת בין מעבדות ברחבי העולם.
על ידי אופטימיזציה ופירוט של הטיפוח ופרוטוקולי הבדיקה של שלושת החדרים, אנו מקימים מסגרת עקבית שחוקרים יכולים להסתמך עליה כדי להשיג תוצאות אמינות וניתנות לשחזור ממודלים של עכברים ASD. סטנדרטיזציה זו תאפשר שיתוף פעולה ופרשנות טובים יותר של ממצאים ממעבדות שונות, מה שיוביל להבנה טובה יותר של ASD ופיתוח טיפולים פוטנציאליים. המעבדה שלנו מעוניינת להסביר תהליך תרגום ספציפי לסוג התא בהתנהגות דמוית אוטיזם.
בנוסף, חקרנו גם את היישומים הטיפוליים הפוטנציאליים במודלים של עכברי ASD, כגון מטפורמין. כדי להתחיל, הפעל אורות מעומעמים. נקו את השולחן והקימו את החדר.
הכן כל כלוב בדיקה בשכבה דקה של מצעים טריים. הניחו כלוב אחד או שניים על השולחן, מופרדים זה מזה ומסביבת החדר על ידי תריסי פלסטיק לבנים. לאחר מכן, הנח מצלמה לפני כל כלוב כדי ללכוד את עכבר הבדיקה.
מכסים את הכלובים ביריעת בד, ומעבירים את כל העכברים לחדר כדי למנוע לחץ בתהליך ההעברה. לאחר הנחת העכברים בחדר הבדיקות, הסר את הסדין. לפני תחילת הניסוי, השאירו אותם בחדר עם אורות מעומעמים למשך 30 דקות לפחות.
בתחילת הבדיקה, רשום את מספר זיהוי העכבר ופרטי הבדיקה על לוח ציור. הנח את עכבר הבדיקה בכלוב עם מצעים טריים. התחל להקליט והנח את עכבר הבדיקה בכלוב הבדיקה.
צא מהחדר במהלך סשן ההקלטה בן 20 הדקות. לאחר 20 דקות, חזור לחדר. הצג את לוח הציור למצלמה והפסק את ההקלטה.
החזירו את עכבר הבדיקה לכלוב הביתי וחזרו על הניסוי. לאחר הניסויים, החזירו את העכברים לחדר המגורים שלהם. בדיקת הטיפוח העצמי חשפה זמן טיפוח מוגבר בעכברי נוקאאוט Eif4ebp2 בהשוואה לעכברי ביקורת.
עכברי נוקאאוט Eif4ebp2 הפגינו הרבה יותר התקפי טיפוח מאשר עכברי ביקורת. כדי להתחיל, נקו את השולחן והדליקו את האורות המעומעמים. הניחו את מכשיר הפרספקס בעל שלושה תאים על השולחן מוקף בתריסי פרטיות.
הנח מצלמה אחת מעל, וודא שכל שלושת התאים נמצאים במסגרת ההקלטה של המצלמה. לאחר מכן, העבירו את הבדיקה ועכברים זרים לחדר, כסו את הכלובים ביריעת בד במהלך תהליך ההעברה. הסר את הסדין ברגע שהם בחדר.
השאירו את העכברים בחדר לפחות 30 דקות עם תאורה מעומעמת לפני תחילת הניסוי. שמור את שלושת התאים ריקים במהלך ההתרגלות. לאחר בחירת עכבר בדיקה, כתוב את מספר הזיהוי על לוח הציור.
הנח את עכבר הבדיקה בתא המרכזי בזמן שדלתות ההזזה נשארות סגורות. פתח את הדלתות והתחל להקליט כדי לאפשר לעכבר הבדיקה לחקור את שלושת התאים הריקים למשך 10 דקות. לאחר 10 דקות, חזור לחדר.
הנח בעדינות את עכבר הבדיקה לתא המרכזי וסגור את דלתות ההזזה. הצג את לוח הציור ועצור את המצלמה. מקם שני כלובי תיל בתא השמאלי והימני באלכסון זה מול זה בפינות כל תא.
מדוד את המרחק בין הכלובים לקירות החדר. ודא שהכלובים אינם פונים ישירות לדלתות החדר. בחרו עכבר זר אחד והכניסו אותו לאחד מכלובי התיל, והשאירו את הכלוב השני ריק.
כדי להתחיל את הבדיקה, לחץ על הקלטה והסר את שתי דלתות ההזזה לפני היציאה מהחדר. אפשרו לעכבר הניסוי לחקור כלוב תיל ריק בתא אחד וכלוב המכיל עכבר זר בתא השני למשך 10 דקות. לאחר 10 דקות, חזור לחדר.
הצג את לוח הציור למצלמה וסיים את ההקלטה. הכנס מחדש את העכבר לתא המרכזי וסגור את הדלתות המחוברות. הנח עכבר חדש שמעולם לא נתקל בו בכלוב התיל הריק בעבר.
התחל להקליט ופתח את הדלתות המחוברות כדי לאפשר לעכבר הבדיקה לחקור את המכשיר במשך 10 דקות לפני היציאה מהחדר. עכבר הבדיקה יחקור שני כלובי תיל, האחד עם עכבר S1 שנתקל בו בעבר והשני עם עכבר S2 שהוצג לאחרונה, למשך 10 דקות. לאחר 10 דקות, חזור לחדר.
הצג את הלוח למצלמה וסיים את ההקלטה. החזירו את כל העכברים לכלובי הבית שלהם. נקו היטב את התאים וכלובי התיל באמצעות חומר חיטוי נטול ריח, וייבשו את המכשיר לפני הניסוי הבא.
לאחר הבדיקה, החזירו את העכברים למתקן הדיור. עכברים העדיפו אינטראקציה עם S1 על פני חפץ דומם חדש. באופן דומה, עכברי C57BL/6J הראו עניין רב יותר ב-S2 שהוצג לאחרונה מאשר ב-S1 מוכר.
