Araştırmamız otizm spektrum bozukluğu, ASD'nin patofizyolojisine odaklanmaktadır. Ve özellikle, ASD'de yer alan moleküler mekanizmalara ve davranışsal bozukluklara neyin sebep olduğuna bakıyoruz. Bunlar birlikte ASD ile ilgili spesifik tedavileri içerecek ve ASD'den muzdarip bireylerin yaşamını iyileştirecektir.
Araştırmamızdaki zorluklardan biri, ASD ile ilgili davranışlarla ilgili araştırmaları geliştirmek ve bunu farklı laboratuvarlar arasında iletmektir. Farklı laboratuvarlar arasında, davranışsal değerlendirmeleri nasıl yaptıkları arasında çok fazla çeşitlilik vardır ve bu, tedavileri alana ilerletmek için büyük bir sorundur. Bu nedenle, protokollerimizle bu ilerlemeye ve dünyanın dört bir yanındaki laboratuvarlar arasındaki iletişime yardımcı olacağımızı umuyoruz.
Tımar ve üç odacıklı test protokollerini optimize ederek ve detaylandırarak, araştırmacıların ASD fare modellerinden güvenilir ve tekrarlanabilir sonuçlar elde etmek için güvenebilecekleri tutarlı bir çerçeve oluşturuyoruz. Bu standardizasyon, farklı laboratuvarlardan elde edilen bulguların daha iyi işbirliğini ve yorumlanmasını kolaylaştıracak, ASD'nin daha iyi anlaşılmasına ve potansiyel tedavilerin geliştirilmesine yol açacaktır. Laboratuvarımız, otizm benzeri davranışlarda hücre tipine özgü translasyon sürecini açıklamakla ilgilenmektedir.
Ek olarak, metformin gibi ASD fare modellerindeki potansiyel terapötik uygulamaları da inceledik. Başlamak için kısılmış ışıkları açın. Masayı temizleyin ve odayı kurun.
Her test kafesini ince bir tabaka taze yatak takımı ile hazırlayın. Masanın üzerine, beyaz plastik at gözlükleri ile birbirinden ve oda ortamından ayrılmış bir ila iki kafes yerleştirin. Ardından, test faresini yakalamak için her kafesin önüne bir kamera yerleştirin.
Kafesleri bir kumaş örtü ile örtün ve transfer işlemi sırasında stresi önlemek için tüm fareleri odaya aktarın. Fareler test odasına yerleştirildikten sonra kağıdı çıkarın. Deney başlamadan önce, en az 30 dakika boyunca loş ışıklı odada bırakın.
Testin başlangıcında, fare kimlik numarasını ve test bilgilerini bir beyaz tahtaya yazın. Test faresini yeni yatak takımlarıyla kafese yerleştirin. Kayda başlayın ve test faresini test kafesine yerleştirin.
20 dakikalık kayıt oturumu sırasında odadan çıkın. 20 dakika sonra odaya dönün. Beyaz tahtayı kameraya tutun ve kaydı durdurun.
Test faresini ev kafesine geri yerleştirin ve deneyi tekrarlayın. Deneylerden sonra fareleri barınma odalarına geri koyun. Kendi kendine tımar testi, Eif4ebp2 nakavt farelerinde kontrol farelerine kıyasla tımar süresinin arttığını ortaya koydu.
Eif4ebp2 nakavt fareleri, kontrol farelerinden önemli ölçüde daha fazla tımar nöbeti sergiledi. Başlamak için masayı temizleyin ve loş ışıkları açın. Üç odacıklı pleksiglas aleti, mahremiyet panjurlarıyla çevrili masanın üzerine yerleştirin.
Üç bölmenin de kameranın kayıt çerçevesinde olduğundan emin olarak bir kamerayı baş üstüne yerleştirin. Ardından, testi ve yabancı fareleri odaya aktarın ve transfer işlemi sırasında kafesleri bir kumaş örtü ile kaplayın. Odaya girdikten sonra çarşafı çıkarın.
Deney başlamadan önce fareleri en az 30 dakika loş ışıkla odada bırakın. Alışkanlık sırasında üç odayı boş tutun. Bir test faresi seçtikten sonra, kimlik numarasını beyaz tahtaya yazın.
Sürgülü kapılar kapalı kalırken test faresini orta bölmeye yerleştirin. Kapıları açın ve test faresinin üç boş odayı 10 dakika boyunca keşfetmesine izin vermek için kayda başlayın. 10 dakika sonra odaya dönün.
Test faresini yavaşça orta bölmeye yönlendirin ve sürgülü kapıları kapatın. Beyaz tahtayı görüntüleyin ve kamerayı durdurun. İki tel kafesi, sol ve sağ bölmelere, her bölmenin köşelerinde çapraz olarak birbirine zıt olacak şekilde yerleştirin.
Kafesler ve oda duvarları arasındaki mesafeyi ölçün. Kafeslerin doğrudan oda kapılarına bakmadığından emin olun. Yabancı bir fare seçin ve diğer kafesi boş bırakarak tel kafeslerden birine sokun.
Testi başlatmak için kayıt düğmesine basın ve odadan çıkmadan önce her iki sürgülü kapıyı da çıkarın. Test faresinin bir odadaki boş bir tel kafesi ve diğer odadaki yabancı bir fareyi içeren bir kafesi 10 dakika boyunca keşfetmesine izin verin. 10 dakika sonra odaya dönün.
Beyaz tahtayı kameraya gösterin ve kaydı sonlandırın. Fareyi orta bölmeye yeniden yerleştirin ve birbirine bağlanan kapıları kapatın. Daha önce boş olan tel kafese yeni, daha önce hiç karşılaşılmamış bir fare yerleştirin.
Kayda başlayın ve test faresinin odadan çıkmadan önce 10 dakika boyunca cihazı keşfetmesine izin vermek için birbirine bağlanan kapıları açın. Test faresi, biri daha önce karşılaşılan S1 faresi ve diğeri yeni tanıtılan S2 faresi ile 10 dakika boyunca iki tel kafesi keşfedecek. 10 dakika sonra odaya dönün.
Beyaz tahtayı kameraya gösterin ve kaydı sonlandırın. Tüm fareleri ev kafeslerine geri koyun. Koku içermeyen bir dezenfektan kullanarak hazneleri ve tel kafesleri iyice temizleyin ve bir sonraki deneyden önce cihazı kurulayın.
Testten sonra, fareleri barınma tesisine geri koyun. Fareler, yeni bir cansız nesne yerine S1 ile etkileşime girmeyi tercih etti. Benzer şekilde, C57BL / 6J fareleri, yeni tanıtılan bir S2'ye tanıdık bir S1'den daha fazla ilgi gösterdi.
