Наше исследование сосредоточено на патофизиологии расстройств аутистического спектра, РАС. В частности, мы рассматриваем молекулярные механизмы, участвующие в РАС, и причины, вызывающие поведенческие нарушения. Вместе они будут включать в себя специфические методы лечения, связанные с РАС, и улучшат жизнь людей, страдающих от РАС.
Одна из задач нашего исследования заключается в том, чтобы улучшить исследования поведения, связанного с РАС, и распространить их между различными лабораториями. Существует много различий между различными лабораториями, в том, как они проводят поведенческие оценки, и это большая проблема для продвижения методов лечения в полевых условиях. Поэтому мы надеемся, что с помощью наших протоколов мы поможем этому прогрессу и коммуникации между лабораториями по всему миру.
Оптимизируя и детализируя протоколы груминга и трехкамерных тестов, мы создаем последовательную структуру, на которую исследователи могут положиться для получения надежных и воспроизводимых результатов на мышиных моделях с РАС. Такая стандартизация будет способствовать лучшему сотрудничеству и интерпретации результатов из различных лабораторий, что приведет к лучшему пониманию РАС и разработке потенциальных методов лечения. Наша лаборатория заинтересована в объяснении процесса трансляции типа клеток в поведении, подобном аутизму.
Кроме того, мы также изучили потенциальные терапевтические применения в мышиных моделях с РАС, такие как метформин. Для начала включите приглушенный свет. Уберите со стола и наведите порядок в комнате.
Подготовьте каждую испытательную клетку тонким слоем свежей подстилки. Поставьте на стол одну-две клетки, отделенные друг от друга и комнатной обстановки белыми пластиковыми шорами. Затем поместите камеру перед каждой клеткой, чтобы захватить тестовую мышь.
Накройте клетки тканевым листом, и перенесите всех мышей в помещение, чтобы избежать стресса в процессе переноса. Как только мыши будут помещены в помещение для тестирования, снимите лист. Перед началом эксперимента оставьте их в комнате с приглушенным светом не менее чем на 30 минут.
В начале теста запишите идентификационный номер мыши и информацию о тестировании на доске. Поместите тестовую мышь в клетку со свежей подстилкой. Начните запись и поместите тестовую мышь в тестовую клетку.
Покиньте комнату во время 20-минутной сессии записи. Через 20 минут вернитесь в номер. Поднесите доску к камере и остановите запись.
Поместите тестовую мышь обратно в домашнюю клетку и повторите эксперимент. После экспериментов верните мышей в их жилую комнату. Тест на самогруминг показал увеличенное время груминга у мышей с нокаутом Eif4ebp2 по сравнению с контрольными мышами.
Мыши с нокаутом Eif4ebp2 продемонстрировали значительно больше приступов груминга, чем контрольные мыши. Для начала уберите со стола и включите приглушенный свет. Поместите трехкамерный инструмент из плексигласа на стол в окружении жалюзи для уединения.
Поместите одну камеру над головой, убедившись, что все три камеры находятся в кадре записи камеры. Затем перенесите тестовых и чужих мышей в комнату, накрыв клетки тканевым листом во время процесса переноса. Снимите простыню, как только они окажутся в комнате.
Перед началом эксперимента оставьте мышей в комнате минимум на 30 минут при приглушенном освещении. Держите три камеры пустыми во время привыкания. После выбора тестовой мыши запишите идентификационный номер на доске.
Поместите тестовую мышь в центральное отделение, пока раздвижные дверцы остаются закрытыми. Откройте дверцы и начните запись, чтобы тестовая мышь могла исследовать три пустые камеры в течение 10 минут. Через 10 минут вернитесь в номер.
Аккуратно направьте тестовую мышь к центральному отсеку и закройте сдвижные дверцы. Отобразите доску и остановите камеру. Расположите две проволочные клетки в левой и правой камерах по диагонали друг напротив друга в углах каждой камеры.
Измерьте расстояние между клетками и стенками камеры. Убедитесь, что клетки не обращены непосредственно к дверям камеры. Выберите одну незнакомую мышь и введите ее в одну из проволочных клеток, оставив другую клетку пустой.
Чтобы начать тест, нажмите кнопку «Запись» и снимите обе раздвижные двери, прежде чем покинуть комнату. Дайте тестовой мыши в течение 10 минут исследовать пустую проволочную клетку в одной камере и клетку, содержащую незнакомую мышь, в другой камере. Через 10 минут вернитесь в номер.
Покажите доску на камере и завершите запись. Снова поместите мышь в центральное отделение и закройте соединительные дверцы. Поместите новую, никогда не встречавшуюся мышь в ранее пустую проволочную клетку.
Начните запись и откройте соединительные дверцы, чтобы тестовая мышь могла исследовать устройство в течение 10 минут, прежде чем покинуть комнату. Тестовая мышь будет исследовать две проволочные клетки, одну с ранее встреченной мышью S1, а другую с недавно представленной мышью S2, в течение 10 минут. Через 10 минут вернитесь в номер.
Покажите доску на камеру и завершите запись. Верните всех мышей в их домашние клетки. Тщательно очистите камеры и проволочные клетки с помощью дезинфицирующего средства без запаха и высушите аппарат перед следующим экспериментом.
После тестирования верните мышей в жилищный объект. Мыши предпочитали взаимодействовать с S1, а не с новым неодушевленным объектом. Аналогичным образом, мыши C57BL/6J проявили больший интерес к недавно представленному S2, чем к знакомому S1.
