본 연구는 신경 발달의 다양한 단계에서 외상 노출로 인한 회로 수준의 이상을 확인하는 것을 목표로 하며, 아동기 외상이 성인의 뇌 기능에 미치는 영향을 더 잘 이해하기 위해 청소년기 조기 신체적 외상 모델을 개발했습니다. 행동 건강 전문가들은 아동 학대의 지속적인 영향으로 고통받는 환자가 증가하고 있는 것을 보고 있습니다. 그러나 대부분의 최신 설치류 연구는 성인기의 외상 노출이나 유아 방치의 영향에 초점을 맞추고 있습니다.
이 중 어느 것도 아동 학대 이력이 있는 성인에게서 볼 수 있는 독특한 문제를 직접적으로 다루지 않습니다. 우리의 프로토콜은 성체가 되었을 때 패배한 동물의 2/3 이상에서 일관된 회피 표현형을 생성합니다. 또한, 암컷과 함께 사육 경험이 없는 어린 수컷을 사용함으로써, 당사의 프로토콜은 공격성을 선동하기 위해 추가 성인 B6 마우스를 사용하지 않고도 강력하게 공격적인 CFW 수컷을 생산할 수 있으며, 프로토콜의 용이성과 철저함을 높일 수 있습니다.
우리의 연구는 다양한 발달 단계에서 트라우마 노출이 어떻게 뇌에 독특한 생물학적, 행동적, 해부학적 영향을 미치는지에 대한 이해를 높이는 데 도움이 될 것이며, 아동 학대를 경험한 개인을 위한 새로운 치료 기술 개발에 도움이 되기를 바랍니다. 우선, 일주일 동안 CFW OVX 암컷과 CFW 수컷을 짝지어 성적 경험을 허용하고 수컷의 영역 공격성을 증가시킵니다. 일주일 후, 케이지에서 CFW OVX 암컷을 꺼내 깨끗하고 빈 케이지에 넣습니다.
그런 다음 1분 동안 CFW 수컷과 함께 케이지에 자극 C57 수컷을 도입하고 공격의 잠복기를 기록합니다. 그 후, 자극 C 57 남성을 제거하고 CFW OVX 여성을 CFW 남성과 함께 케이지에 다시 배치한 후 공격하지 않거나 2일 이상 30초 이상의 공격 잠복도를 보이는 그룹 하우스 CFW 남성. 이 비공격적인 CFW 수컷을 오픈 필드 사회적 상호 작용 테스트 중에 자극 동물로 사용하십시오.
사춘기 C57 수컷이 생후 4주가 되면 각 동물의 무게를 측정하고 체중을 기록합니다. 동물을 두 개의 동일한 코호트로 분리하고, 두 코호트 간의 가중치가 크게 다르지 않도록 하면서 대조군과 패배군을 통제합니다. 플렉시글라스 칸막이의 한쪽 면에는 대조군 청소년 C57이 있고, 칸막이의 다른 쪽에는 다른 대조군 청소년 C57이 있습니다.
11일째 되는 날, 각 대조군 청소년은 실험의 나머지 기간 동안 플렉시글라스 칸막이를 사이에 두고 다른 대조군 청소년 옆에 둡니다. 쓰러뜨려야 할 사춘기 C57의 무게를 달고 기록한다. 여기에 표시된 직경 4mm보다 큰 상처는 실험 동물의 즉각적인 안락사가 필요합니다.
그런 다음 상주하는 CFW 수컷과 함께 케이지에서 CFW OVX 암컷을 제거하고 다른 OVX 암컷과 함께 수용합니다. 그 후, 청소년 C 57을 상주 CFW 남성의 케이지에 소개하고 스톱워치를 시작하십시오. 30 번 물린 후 또는 5 분 중 먼저 발생하는 시점 후에 청소년을 케이지에서 꺼내고 공격 데이터를 기록하십시오.
그런 다음 플렉시글라스 칸막이를 CFW 남성 레지던트 케이지 중앙에 놓고 CFW 레지던트가 한쪽에 있고 패배한 청소년이 다른 쪽에 있는지 확인합니다. 11일째 되는 날, 실험이 진행되는 동안 패배한 청소년들을 다른 패배한 청소년들 옆에 수용하고, 그들 사이에 플렉시글라스 칸막이를 설치한다. 대조군과 패배한 동물을 1시간 동안 실험장에 길들이십시오.
동물 추적 소프트웨어로 모든 세션을 기록합니다. 와이어 컵을 벽의 중간 지점에 있는 44 x 44 x 44cm 아크릴 경기장의 왼쪽 벽에 놓습니다. 컵 주위에 2cm의 원형 상호작용 영역을 그립니다.
이제 C 57을 빈 철사 컵과 함께 경기장 구석에 150초 동안 놓습니다. 그런 다음 투기장에서 C 57을 제거하고 깨끗하고 빈 케이지에 넣으십시오. 공격적이지 않은 낯선 CFW 성인 남성을 와이어 컵 안에 넣고 와이어 컵을 경기장 내부에 놓습니다.
C 57을 150초 동안 와이어 컵이 들어있는 CFW와 함께 투기장에 다시 도입하십시오. 두 동물을 각각의 우리로 되돌려 보낸 후 물과 70% 에탄올로 경기장을 청소하여 소변이나 대변이 있는 모든 부위를 청소한 후 다음 C 57을 테스트하십시오. 바디 포인트가 빈 컵이 있는 세션과 컵이 포함된 CFW가 있는 세션 모두에 대해 상호 작용 영역 내에 있는 시간을 계산합니다.
CFW가 들어있는 컵과의 상호 작용 영역에서 보낸 시간을 빈 컵과의 상호 작용 영역에서 보낸 시간으로 나누어 사회적 상호 작용 비율을 산출합니다. 관심 있는 발달 창에 따라 10일의 패배 기간 이후 언제든지 열린 필드 사회적 상호 작용을 수행합니다. 패배한 동물은 테스트된 모든 시점에서 대조군에 비해 사회적 상호 작용 비율과 원시 사회적 상호 작용 시간 모두에서 상당한 감소를 보였습니다.
사회적 상호작용 비율과 시간의 가장 두드러진 감소는 패배 후 2주 후에 발생했으며, 패배한 동물들은 빈 컵을 가지고 보내는 시간이 증가한 것으로 나타났습니다. 히트 맵은 모든 시점에서 패배한 쥐가 코너에서 더 많은 시간을 보내고 상호 작용 영역에서 더 적은 시간을 보내는 것을 확인했습니다.
