このプロトコルは、研究者が男性と女性の両方のマウスの努力的な応答に慢性的なストレスの影響を調べることができます。この技術の利点は、男性と女性の両方のマウスが同時に検証された慢性的な社会的敗北パラダイムを受けることができ、報酬行動を直接比較できることです。歴史的に、気分障害に関する前臨床研究は、脅威的な環境の回避を伴う行動タスクを利用してきました。
ただし、報酬や動機付けのタスク (努力に関連する選択など) は、より多くの翻訳的な関連性を提供する可能性があります。車両溶液を調製するには、β-シクロデキストリンの3.375グラムを1リットルのスクリュートップガラス容器に750ミリリットルの水道水で溶解します。コルチコステロン溶液を調製するには、3.375グラムのβ-シクロデキストリンを水道水750ミリリットルに溶解し、続いて26.25ミリグラムのコルチコステロンを添加する。
液体が明確な外観を示すまで40キロヘルツで約30分間超音波洗浄水浴中のコルチコステロンを溶解し、車両とコルチコステロンマウス群の水筒を適切な溶液で満たし、週に2回消費される液体の体積を記録します。マウスをY迷路に慣れさせるには、 食糧不足の翌日、2つの50ミリリットル遠心分離管のキャップに20ミリグラムの穀物ベースの食品ペレットを多数入れ、Y迷路の各アームの端に1つのキャップを置き、その後、ディバイダーを取り外す前に、スタートボックス仕切りでY迷路のスタートボックスにマウスを置き、マウスがY迷路を探索できるようにします。分。Y迷路の習慣の2日後、高報酬アームのキャップにペレットを置き、低報酬アームのキャップに2つのペレットを入れる。
高い報酬の強制選択トライアルのために、低報酬アームへのアクセスをブロックし、ディバイダーを取り外す前に数秒間スタートボックスにマウスを置き、マウスが利用可能なペレットを消費するために高い報酬アームに入ることを60秒間可能にします。低報酬の強制選択トライアルの場合は、高い報酬アームへのアクセスをブロックします。無料選択トレーニングの場合は、10回のフリーチョイストライアルを完了する前に、1つのハイアームと1つのローアーム強制選択トライアルで各セッションを開始します。
マウスでいずれかの迷路アームを選択できます。マウスがペレットのキャップに腕の端まで移動したら、マウスの後ろに腕の仕切りを置き、ペレットを消費するまで動物にロックします。10回のフリーチョイストライアルで毎日どのアームが選択されているかを記録します。
マウスが自由選択トレーニング日に10回のトライアルのうち7回の高報酬アームを選択したら、Y迷路の高報酬アームの途中に10センチメートルの障壁を置き、バリアを配置した少なくとも2つの高いおよび低い腕の強制選択試験を行います。4つの試験をすべて完了した後、マウスをスタートボックスに入れ、マウスが高報酬アームに対する10センチメートルのバリアを備えた10回の自由選択トライアルのためにアームを選択できるようにします。翌日、デモンストレーションのようにマウスを習慣化してテストしますが、高い報酬アームには15センチメートルのバリアを使用します。
翌日、実演したように、20センチメートルのバリアでマウスをテストします。慢性的な無差別な社会的敗北ストレステストのために、CD1男性のケージをC57BL / 6Jの男性と女性の前部にCD1ケージ、社会的敗北室のCD1雄マウスに隣接するC57BL / 6Jケージと一致させる。試験を開始するには、1人の成人男性と1人の成人女性実験C57BL/ 6Jマウスを各CD1侵略者男性のホームケージに入れ、5分間の社会的敗北セッションを行い、オスとメスの両方の実験動物の攻撃遅延と攻撃頻度を記録します。
セッションの終わりに、雄のC57BL / 6Jマウスを、透明な穿刺されたプレキシガラスバリアで分離された共同収容CD1雄のケージに移します。同様の明確な穿ガラス付きプレキシガラスバリアを有する、攻撃CD1および雌のC57BL/6マウスを分離する。コントロールセッションの場合、1つのコントロールオスC57BL/6マウスのホームケージに1つのコントロールメスマウスを置きます。
5分後、動物の間に透明な穿ガラス製のプレキシガラス仕切り器を置きます。最初の実験の終わりに、残りの9つの敗北セッションのためにマウスを回転させ、各C57BL/ 6の男性と女性のペアが1つのケージを左に回転させ、セッションごとに新しいCD1マウスとの新しい相互作用を提供するようにします。慢性コルチコステロンおよび慢性非差別的社会的敗北ストレスマウスは、両方とも、車両および制御動物と比較して体重の平均減少を示す。
これらのマウスはまた、より少ない平均ホームケージラボチャウを消費しました.車両およびコルチコステロン投与マウスは、4週間の治療と3週間の行動検査で同様の量の液体を消費する。慢性的な非差別的な社会的敗北ストレスは、新しいCD1マウスを含む相互作用ゾーンで費やされた時間の減少を示す、慢性的な非差別的社会的敗北ストレスにさらされていない弾力性または対照マウスのいずれかに比べて、影響を受けやすいマウスで不適応な表現型を産生する。
慢性コルチコステロンと慢性的な非無差別社会的敗北ストレスマウスの両方は、バリア高さが15および20センチメートルに増加したときに努力的な応答のシフトを生成します。15センチメートルの障壁が付いている高いおよび低い報酬の腕の待ち時間はコルチコステロンの管理によって影響を受け、低報酬腕および高報酬腕の両方の両方のグループのために類似している。重要なのは、慢性コルチコステロンまたは慢性的な非無差別社会的敗北ストレスがY迷路バリアタスクの学習を損なう場合、これらのマウスは自由選択トレーニングセッションで基準に達できず、その後のバリア結果解釈に影響を与える可能性がある。
さらに、社会的相互作用タスクは、マウスを弾力性のある感受性の高い集団に、またセックスによって成層するために使用することができる。Y迷路バリアタスクを実施する場合、個々の試験で食品ペレット報酬に到達するために、選択した腕と待ち時間の両方を記録することが重要です。結果の切り下げや進行性の比率など、他の重要かつ翻訳的に関連する報酬関連の行動は、慢性コルチコステロンの社会的敗北または慢性的な非差別的社会的敗北プロトコルに従って行うことができる。
