먼저 8주에서 10주 된 마취된 C57 블랙 6 마우스를 수술대에 눕힙니다. 뭉툭한 집게를 사용하여 혀를 빼내고 잡습니다. 후두경을 입에 삽입하고 성대를 시각화합니다.
가이드 와이어를 20게이지 정맥 카테터에 삽입합니다. 그런 다음 날개 부분이 코끝과 평평해질 때까지 카테터를 기관으로 부드럽게 밀어 넣습니다. 마우스를 환풍기에 연결하고 열 램프 아래 누운 자세로 놓습니다.
직장 온도를 섭씨 37도로 유지하십시오. 수술 부위를 면도하고 소독한 후 대퇴동맥에 접근하기 위해 좌우 서혜부 부위를 1cm 정도 절개합니다. 그런 다음 대퇴 원위 동맥을 소독하고 결찰하고 리도카인 한 방울을 바릅니다.
근위 대퇴 동맥에 클립을 놓고 클립의 원위 동맥을 약간 절개합니다. 폴리에틸렌 10 카테터를 좌측 및 우측 대퇴 동맥에 삽입합니다. 1-10 헤파린화 식염수 50 마이크로리터를 각 동맥 라인에 주입합니다.
라인의 응고를 방지하려면 마우스를 엎드린 위치로 돌리고 입체 헤드 프레임에 장착합니다. 심전도 모니터링을 위해 왼쪽 팔, 왼쪽 다리, 오른쪽 팔에 3개의 바늘 전극을 연결합니다. 그런 다음 정수리를 면도하고 요오드와 알코올 면봉을 번갈아 세 번 번갈아 가며 소독합니다.
2.5cm의 정중선 피부를 절개하고 4개의 작은 견인기를 사용하여 뇌 영상을 위해 전체 두개골 표면을 노출시킵니다. 그런 다음 Laser Speckle Contrast Imager를 머리 위에 놓습니다. Laser Speckle Imager를 조정하여 심정지 전 뇌혈관의 기준선을 확인합니다.
심정지를 유발하기 전에 1밀리리터 플라스틱 주사기에 26마이크로리터의 소생술 칵테일 스톡 용액을 채웁니다. 체온이 섭씨 37도에 도달하면 산소 측정기를 100%로 조정하여 2분 동안 혈액에 산소를 공급합니다. 그런 다음 오른쪽 대퇴 동맥을 통해 최대 200마이크로리터의 혈액을 소생술 칵테일이 들어 있는 플라스틱 주사기로 채취합니다.
심정지를 유도하려면 산소를 끄고 질소를 100%로 증가시켜 무산소증을 유도합니다. 환풍기, 이소플루란 기화기, 온도 조절기, 질소 유량계를 끕니다. 심정지 시 뇌혈류가 없는지 확인합니다.
레이저 스페클 영상을 관찰하여 산소를 100%로 조절하고 심정지 발병 후 8분 후에 인공호흡기를 켭니다. 소생술과 섞은 빼낸 산소를 즉시 우측 대퇴동맥을 통해 혈액순환에 주입하여 심박수, 혈압 등의 활력을 회복시킨다. 뇌의 성공적인 재관류를 확인하기 위해 Laser Speckle Image를 참조하십시오.
수술 후 회복을 위해 머리에서 견인기를 제거하고 피부 절개 부위에 0.25% 부피바카인을 바르고 6-0 나일론 봉합사를 사용하여 절개 부위를 봉합합니다. 그런 다음 닫힌 피부 절개면에 항생제 연고를 바릅니다. 생쥐에서 심정지를 유도한 결과 45초 이내에 심각한 서맥이 발생했습니다.
2분 동안 산소결핍증을 앓았을 때, 심장 박동수가 현저히 감소했다. 혈압은 수은 20mm 이하로 떨어졌고 뇌혈류도 멈췄다. 또한 심정지 말기에는 체온이 섭씨 32도 정도로 서서히 떨어졌다.
소생술을 주사한 후, 모든 중요한 기능이 회복되기 시작하였습니다. Laser Speckle Contrast Imaging은 심정지 시 뇌의 혈류가 완전히 없음을 확인했으며, 광음향 영상을 통해 심정지 절차 중 혈류, 구조 및 산소 공급의 변화를 식별할 수 있었습니다.
