설명된 모든 절차가 연구와 모든 동물의 프로토콜은 오레곤 보건 과학 대학 기관 애니멀 케어 및 사용위원회에 의해 승인된 동물의 보호 및 사용에 대한 건강 가이드 국립 연구소에 따라 실시하고 있습니다. 1. 수술 준비 <ol><li> 마우스의 무게를. 설명한 절차는 G. 20 ~ 25 무게 C57BL / 6 생쥐에서 수행됩니다 마취는 isoflurane 3-4%를 사용하여 유도 상자에 유도하고, 이후 공기 / 산소 혼합 가스에서 isoflurane 1.5-2.5 %를 사용하여 유지됩니다. </li><li> 눈을에 기름칠을하고 가열 패드에있는 동물 부정사의 위치. 테이프를 사용하여 네 사지를 무력화. 가슴 압박하는 동안 전체 가슴 벽 여행을 허용 가능한 뒷다리 - 발톱이 중립 위치에 녹화 수 있습니다 그러나, forepaws은 가슴 벽 가까이로 확보해야합니다. </li><li> 윤활 및 직장 온도 프로브를 놓으십시오. 온도는 37.0을 유지하기 위해 설정된 전자 온도 컨트롤러 (Digi - 센스, 콜 파머, 버논 힐스 IL), ° C.에 연결된 가열 패드와 램프를 사용하여 제어됩니다 그것은 동물 내에 온도 기울기가 노 흐름 상태 동안 개발할 수있는 가능성이 있기 때문에, 그것은 온도 측정과 관심의 장기 근처 제어하는​​ 것이 중요합니다. </li><li> 2.5 cm 22 GA 독보적인 카테 테르 (Insyte - W, BD, 프랭클린 NJ)과 직각 introducer (IN Frova Introducer, 쿡 의학, 블루밍턴)의 절단 말초 끝부분을 사용하여 기관을 Intubate. tracheal 삽관법의 다른 방법 허용되는 그러나, 정맥 카테 테르의 위치에 대한 수술 노출을 최적화 약간 확장된 위치에 목 적절한 위치를 수있는 직각 introducer 중 하나를 사용하십시오. endotracheal 카테 테르 허브는 앞니로 봉합의 루프와 함께 안전하고 가슴 압박하는 동안 머리를 고정하기 위해 약간의 긴장감과 함께 유지됩니다. </li><li> 기계 140 μL, 150 호흡 / 분으로 설정 쥐 환풍기와 마우스를 환기. 이 프로토콜은 항상 20-25그램 동물에서 수행됩니다로서 이것은 중량에 따라 조정되지 않습니다. 마취를 통해 - 깊게하지 마십시오. 이 impairs의 인공 호흡으로 날숨 끝에 압력을 적용하기 위해 환풍기를 설정하지 마십시오. </li><li> 무균 기술과 운영 현미경 사용, 경정맥 정맥에서 사전 빨개 PE - 10 카테터를 삽입. 양쪽 사용하지만, 운영자에 가장 가까운 쪽의 사용은 가슴 압박이나 다른 조작 중에 카테 테르 dislodgement의 기회를 줄일 수 있습니다. 0.5 % bupivicaine는, 0.1 ML은 수술 후 통증을 제어하는​​ 상처 가장자리에 infitrated입니다. </li><li> cyanoacrylate 접착제 수술과 피부 폐쇄에 PE - 10 카테터를 확보. </li><li> 피하 심전도 전극을 장소 및 모니터링 장치에 연결합니다. 신호 자체의 신호 경로와 극대화하기 위해 세심한주의가 소생의 성공에 중요합니다. 모든 전선이 운영 표면에 안전하게 있는지 확인, 신호 횡단을 최소화하고 신호 경로 내에서 절연체를 (홀로 바늘이나 좌초 와이어 공기 등) 최소화. nonstranded 리드선에 연결된 고체 바늘은 구입하거나 실험실에서 만들 수 있습니다. 연결되면, 모니터에서 심전도 신호를 최적화합니다. </li></ol> 2. 심장 마비 <ol><li> 37.5 ° C. - 직장 온도 36.5 ° C로 정의, 마우스 normothermic 있는지 확인 정맥 실온 0.5 M의 칼륨 염화물 40 μL를 관리하고 심전도에 대한 추적 isoelectric을 관찰. 체중에 대해 선량 조절 범위 내에서 20-25 G. 필요하지 않습니다 체포 타이머를 시작합니다. </li><li> 환풍기 연결을 끊습니다. 마취 증기를 중단. 가열 패드와 심전도 모니터링에 방해가 될 수있는 전자 노이즈를 생성하는 다른 장비의 전원을 끄십시오. 마우스 절연 담요를 놓습니다. </li><li> 기록 온도 심장 마비 동안 모든 분. 필요한 경우, 가열 램프가 normothermic 범위 핵심 온도를 표시하는 데 사용할 수 있습니다. 심장 마비 동안, 인공 호흡을 위해 (예를 들어, 에피네프린 주사기) 용품 및 장비를 준비합니다. 점검은 생존을 위해 필수적이며, 중단 인공 호흡을하기 위해 도움이 될 수 있습니다. </li><li> 7분, 심장 마비 30 초 후, 호흡을 다시 연결하고 미리 체포 설정에 조수의 볼륨을 유지, 180 호흡 / 분에 속도를 높일 수 있습니다. </li><li> 팔분에서 300 BPM의 가슴 압박을 시작합니다. 심전도에서 모션 유물은 판단 심폐소생술 속도를 사용할 수 있습니다. 가슴 압박은 검지 손가락, 칼 모양의 과정 위에 5mm과 약간 정중선의 왼쪽 함께 전달해야합니다. 가슴은 anteroposterior 거리 1/3-1/2를 압축되어야하며 전체 반동은 압박 사이에 허용해야합니다. 핑거 위치와 최적의 압축 압력이 절대적으로 중요합니다. 이 모델에서 생존을 달성하지 않으면 거의 항상 suboptimal 심폐소생술에 의한 것입니다. </li><li> CPR의 첫 번째 30 초, 15 μg / ML로 희석 에피네프린의 0.5 ML를 달이다. 총 에피네프린 선량은 8-12 μg이다. 조심스럽게 자연 순환 (ROSC)의 반환에 대한 심전도를 관찰합니다. 좁은 QRS 복합의 단지는 압축 아티팩트 사이에서 볼 수 있습니다. ROSC은 보통 90초 및 심폐소생술을 시작하면 이분 사이에 발생합니다. ROSC 3 분 발생하지 않을 경우 인공 호흡을 포기합니다. 자주 조기 심실 수축과 심전도 축의 변화는 ROSC 후 첫 2 분 후에 관찰하고, 거의 항상 이분의 꾸준한 부비동 이라는데요으로 해결할 수 있습니다. </li><li> 인공 호흡과 에피네프린 선량 총 시간을 기록합니다. ROSC 후 10 분 정도 기록 온도는 모든 분. </li><li> 심전도 리드는 일반적으로 ROSC 후 12~15분 이내 자발적인 호흡이 시작되면 제거할 수 있습니다. </li><li> 자연 호흡 률&gt; 60/min있는 기관을 Extubate. </li><li> 37으로 설정 온도 제어 표면에 복구 새장에 마우스를 놓고 ° C 최초의 2 시간 postprocedure위한 음식과 물에 쉽게 접근할 수 있도록. 케이지는 다음 마우스가 완전히 마취에서 회복하고 활성화되면 표준 수술후의 주택 사정에 이동할 수 있습니다. </li></ol> 3. 과다 / 재관류 - 고정 및 신장 하베스트 <ol><li> CA / CPR 후 24 시간이 isoflurane 3-4%로 마취를 유도하고 포르말린과 함께 사용에 적합합니다 퓸 후드 이내에 수술 표면에 위로 향한 위치에 동물을 안전하게 ... </li><li> 점진적으로 5 % 마취 증기 농도를 증가하여 마취를 깊게하고 자발적인 호흡의 정지에 의해 입증으로 마우스를 깊이 anesthetized 있는지 확인하십시오. </li><li> 클램쉘 thoracotomy을 수행하고 표준 기술에 따라 심장 좌심실의 혀끝의 주사를 통해 마우스를 ...에게서 피를 뽑다. </li><li> 같은 바늘을 통해 주입 속도가 느린하여 호수 0.9 %를 관리할 수 있습니다. 닉 가위로 오른쪽 심방 부위요, 재관류 / 과다를 acclerate합니다. 개복술을 수행하고 신장을 관찰합니다. 그들이 blanched 때, 생리는 고정을 위해 포르말린 4%로 변경될 수 있습니다. 신장은 다음 관형 상피 괴사의 부량을위한 플루오로 - 자드와 B 파라핀과 스테인드에 포함됩니다. </li></ol> 4. 대표 결과 : CA가 유도되면 동맥 압력 (MAP) 및 제로 가까이 지역 신장 혈액의 흐름 (RRBCF) 드롭을 의미하고 인공 호흡이 시작하기 전까지 (그림 1) 안정 상태로 유지됩니다. 24 시간 CA / 심폐소생술, 신장 기능 (혈액 요소 질소, 크레아티닌 및 번)의 혈청 지표는 크게 가짜 운항 동물 상대적으로 고가 후. 대서양 표준시 / ALT가 깊은 전체 - 바디 국소 빈혈 (그림 2)의 증거를 제공, 또한 고가입니다. 호중구 - gelatinase 관련된 lipocalin (NGAL), 신장 허혈성 부상의 민감한 지표가 CA / 심폐소생술 (그림 3) 이후 대규모 upregulated 24 시간입니다. 마지막으로, photomicrographs은 (얼룩 (그림 4, 패널)와 플루오로 - 자드 B 물들일 골수의 관형 상피의 광범위한 세포 죽음 관 상피하고 hematoxylin 및 eosin에 luminal 충전이 얇아과 허혈성 신장 손상의 곳곳에, 골수의 괴사가 전형적인 입증 그림 4, 패널 B). <img src="/files/ftp_upload/3116/3116fig1.jpg" alt="그림 1" /> 그림 1. 심박 정지는 재관류 압력의 즉시 손실을 유도 같은 심장 마비의 기간에 걸쳐 지역의 신장 피질 혈류 (RRCBF)의 가까운 완전한 정지에 발생하는 대퇴 동맥에서 측정한 동맥 혈압 (MAP)을 (그늘 말은 여기에 표시 지역). 가슴 압박과 에피네프린의 반환과 인공 호흡은 정상으로지도와 RRCBF 꾸준히 게시물 인공 호흡 기간에 상승. 14의 허가 Reprinted. <img src="/files/ftp_upload/3116/3116fig2.jpg" alt="그림 2" /> 그림 2. 24 postprocedure, 혈액 요소 질소 (롤빵), 혈청 크레아티닌 및 관 세포 사망의 범위는 모든 CA / 심폐소생술로 가짜 절차로 치료 동물과 비교받은 데 동물 크게 상승하고 있습니다. CA / CPR는 여기에 간 기능 효소의 거대한 상승에 의해 입증 판 - organismal 허혈성 모욕을 유도 알라닌 아미노 transferase (ALT)와 가짜 - 치료 동물과 비교 CA / 심폐소생술 생쥐에서 (대서양 표준시) aminotransferase aspartate. <img src="/files/ftp_upload/3116/3116fig3.jpg" alt="그림 3" /> 그림 3. 서양 얼룩은 호중구 gelatinase - 관련 lipocalin (NGAL), 신장 허혈성 부상의 민감한 지표로 polyclonal 항체를 사용하여 수행했습니다. 소변 샘플은 이전에 ( &quot;사전&quot;)와 24 시간 후 ( &quot;24&quot;) CA / 4 동물의 심폐소생술 (A, B, C, 및 D 이상 라벨) 즉시 획득했다. NGAL은 매우 마우스 upregulated입니다CA / CPR 후 소변이. 14의 허가 Reprinted. <img src="/files/ftp_upload/3116/3116fig4.jpg" alt="그림 4" /> 그림 4.) Hematoxylin과 eosin는 CA / 심폐소생술 후 신장 조직 24 시간의 짧은 축 hilar 섹션의 얼룩. 관형 도전과 골수의 및 corticomedullary tubules에 곳곳에 있지만 명확한 손상이있다. 화살표 corticomedullary 교차점에 부풀어, pyknotic 핵 함께 손상된 tubules를 가리 킵니다. B) Flouro - 비취 B는 CA / 심폐소생술 후, 같은 동물에서 같은 지역의 24 시간을 얼룩. 플루오로 - 자드 B 얼룩이 괴사성 세포 밝은 녹색을 곳곳에 corticomedullary 관 괴사되었습니다. 화살표 corticomedullary 교차점에서 밝은 스테인드 손상 tubules를 가리 킵니다. 이러한 연구 결과는 아키를 개발 인간의 신장 생검 결과에 상당히 유사하고, 아키의 다른 동물 모델에 의해 만들어진 이들과는 달리.

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	<li>Chertow, G. M., Lazarus, J. 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관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

마우스에서 심장 마비와 심폐 소생의 normothermic 모델 아키 전체 - 바디 hypoperfusion의 가장 흔한 임상 원인의 pathophysiology과 형태를 복제 모델의 평가의 여러 아베를 제공합니다. 가설 테스트는 유전자 조작 기술과 잘 이해하고 특징 해부학 및 실험실 마우스 생리학의 갑옷의 한 벌에 액세스하여 주었 수 있습니다. 여기에 설명한 바와 같이, 경험 손에 생존이 80 %입니다. 수술 준?...

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th></tr><tr><td> 염화칼륨 </td><td> 애보트 의료 </td><td> 06653-5 </td></tr><tr><td> Isoflurane </td><td> 애보트 의료 </td><td> 05260-05 (및 기타) </td></tr><tr><td> 에피네프린 HCL </td><td> 복수 </td><td> 복수 </td></tr><tr><td> Digi - 감지 온도 컨트롤러 </td><td> 콜 - 파머 </td><td> EW - 89000-00 </td></tr><tr><td> Angiocath IV 캐스 </td><td> VWR </td><td> 381134 </td></tr><tr><td> Frova 직각기도 introducer </td><td> 요리사 </td><td> G27282 </td></tr><tr><td> 마우스에 대한 MicroVent 환풍기 </td><td> 하버드 장치 </td><td> 733591 </td></tr></tbody></table>

normothermic cardiac arrest and cardiopulmonary resuscitation: a mouse model of ischemia-reperfusion injury

급성 신장 상해 (아키)는 높은 사망률 1-4과 가장 자주 전체 - 바디 hypoperfusion로 인해이 중요한 질병의 일반적인, 매우 치명적인, 복잡합니다. 설치류 모델에서 전체 - 몸 hypoperfusion의 5,6 성공적인 복제 어려움이 따른 다네되었습니다. 초점 국소 빈혈을 채용 7-9,9,10 모델은 반복적으로 임상 설정하고, 유전자 조작의 전체 도구 모음에 온 몸이 hypoperfusion의 부족 액세스를 허용 큰 동물 모델로 번역하지 검색 결과를 보여준 마우스 가능. 11,12 그러나, 최근에 심장 마비와 심폐 소생의 마우스 모델은 모델 아키 적응시킬 수있는 부상했다. 13이 모델은 안정적으로 임상 아키에서 본 physiologic, 기능 해부학, 그리고 histologic 결과를 재현 , 빠르게 반복하고, 유전자 조작 기술, 대형 동물 저렴한 비용으로 상대하고, 사용의 용이성에 대한 액세스 권한을 포함하여 murine 수술 모델의 중요한 장점을 모두 제공합니다. 우리 그룹은 아키의 기관 특정 결과의 숫자를 평가하기 위해이 모델의 사용 경험을 개발했습니다. 14,15

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Normothermic Cardiac Arrest and Cardiopulmonary Resuscitation: A Mouse Model of Ischemia-Reperfusion Injury

perioperative 그리고 중요한 치료 관련 급성 신장 손상에 대한 강력한 모델이 제공됩니다. 그것이 거의 임상 아키의 histologic 및 기능 변경 내용을 복제할 수 있습니다 심장 마비에 의해 유도 온 몸이 hypoperfusion을 사용합니다.

Normothermic 심장 마비와 심폐 소생술의 : 국소 빈혈 - Reperfusion 상해의 마우스 모델

Acute Kidney Injury (AKI) is a common, highly lethal, complication of critical illness which has a high mortality1-4 and which is most 
frequently caused ...

normothermic-cardiac-arrest-cardiopulmonary-resuscitation-mouse-model

Research

JoVE Journal

Medicine

17.9K 조회수.  Oregon Health & Sciences University. perioperative 그리고 중요한 치료 관련 급성 신장 손상에 대한 강력한 모델이 제공됩니다. 그것이 거의 임상 아키의 histologic 및 기능 변경 내용을 복제할 수 있습니다 심장 마비에 의해 유도 온 몸이 hypoperfusion을 사용합니다.

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Ischemia-reperfusion Model of Acute Kidney Injury and Post Injury Fibrosis in Mice

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often unreported mortality rates that may confound analyses. Bilateral renal pedicle clamping is commonly used to induce IR-AKI, but differences between effective clamp pressures and/or renal responses to ischemia between kidneys often lead to more variable results. In addition, shorter clamp times are known to induce more variable tubular injury, and while mice undergoing bilateral injury with longer clamp times develop more consistent tubular injury, they often die within the first 3 days after injury due to severe renal insufficiency. To improve post-injury survival and obtain more consistent and predictable results, we have developed two models of unilateral ischemia-reperfusion injury followed by contralateral nephrectomy. Both surgeries are performed using a dorsal approach, reducing surgical stress resulting from ventral laparotomy, commonly used for mouse IR-AKI surgeries. For induction of moderate injury BALB/c mice undergo unilateral clamping of the renal pedicle for 26 min and also undergo simultaneous contralateral nephrectomy. Using this approach, 50-60% of mice develop moderate AKI 24 hr after injury but 90-100% of mice survive. To induce more severe AKI, BALB/c mice undergo renal pedicle clamping for 30 min followed by contralateral nephrectomy 8 days after injury. This allows functional assessment of renal recovery after injury with 90-100% survival. Early post-injury tubular damage as well as post injury fibrosis are highly consistent using this model.

We describe models of moderate and severe ischemia-reperfusion-induced kidney injury in which the mice undergo unilateral renal pedicle clamping followed by simultaneous or delayed contralateral nephrectomy, respectively. These models consistently give rise to renal dysfunction and post-injury fibrosis, but injury severity and survival are dependent on mouse background, age and surgical equipment.

마우스의 급성 신장 손상 및 사후 상해 섬유증의 허혈 - 재관류 모델

Ischemia-reperfusion induced acute kidney injury (IR-AKI) is widely used as a model of AKI in mice, but results are often quite variable with high, often ...

연구

의학

Induction and Assessment of Ischemia-reperfusion Injury in Langendorff-perfused Rat Hearts

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for myocardial infarction and cardiac complications of thoracic surgery. The ability of certain drugs to precondition the myocardium against ischemia reperfusion injury has led to multiple clinical trials, with little success. The isolated heart model allows acute observation of the functional effects of ischemia reperfusion injury in real time, including the effects of various pharmacological interventions administered at any time-point before or within the ischemia-reperfusion injury window. Since brief periods of ischemia can precondition the heart against ischemic injury, in situ aortic cannulation is performed to allow for functional assessment of non-preconditioned myocardium. A saline filled balloon is placed into the left ventricle to allow for real-time measurement of pressure generation. Ischemic injury is simulated by the cessation of perfusion buffer flow, followed by reperfusion. The duration of both ischemia and reperfusion can be modulated to examine biochemical events at any given time-point. Although the Langendorff isolated heart model does not allow for the consideration of systemic events affecting ischemia and reperfusion, it is an excellent model for the examination of acute functional and biochemical events within the window of ischemia reperfusion injury as well as the effect of pharmacological intervention on cardiac pre- and postconditioning. The goal of this protocol is to demonstrate how to perform in situ aortic cannulation and heart excision followed by ischemia/reperfusion injury in the Langendorff model.

The isolated rat heart is an enduring model for ischemia reperfusion injury. Here, we describe the process of harvesting the beating heart from a rat via in situ aortic cannulation, Langendorff perfusion of the heart, simulated ischemia-reperfusion injury, and infarct staining to confirm the extent of ischemic insult.

랑겐 돌프 - 관류 쥐 마음에 유도 및 허혈 - 재관류 손상의 평가

The biochemical events surrounding ischemia reperfusion injury in the acute setting are of great importance to furthering novel treatment options for ...

Murine Model of Intestinal Ischemia-reperfusion Injury

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, hypotension, necrotizing enterocolitis, bowel transplantation, trauma and chronic inflammation. Intestinal ischemia-reperfusion (IR) injury is a consequence of acute mesenteric ischemia, caused by inadequate blood flow through the mesenteric vessels, resulting in intestinal damage. Reperfusion following ischemia can further exacerbate damage of the intestine. The mechanisms of IR injury are complex and poorly understood. Therefore, experimental small animal models are critical for understanding the pathophysiology of IR injury and the development of novel therapies.
Here we describe a mouse model of acute intestinal IR injury that provides reproducible injury of the small intestine without mortality. This is achieved by inducing ischemia in the region of the distal ileum by temporally occluding the peripheral and terminal collateral branches of the superior mesenteric artery for 60 min using microvascular clips. Reperfusion for 1 hr, or 2 hr after injury results in reproducible injury of the intestine examined by histological analysis. Proper position of the microvascular clips is critical for the procedure. Therefore the video clip provides a detailed visual step-by-step description of this technique. This model of intestinal IR injury can be utilized to study the cellular and molecular mechanisms of injury and regeneration.

Here we describe the detailed procedure of intestinal ischemia-reperfusion in mice which results in reproducible injury without mortality to encourage the standardization of this technique across the field. This model of intestinal ischemia-reperfusion injury can be utilized to study the cellular and molecular mechanisms of injury and regeneration.

창자 허혈 - 재관류 손상의 쥐 모델

Intestinal ischemia is a life-threatening condition associated with a broad range of clinical conditions including atherosclerosis, thrombosis, ...

A Mouse Model of Retinal Ischemia-Reperfusion Injury Through Elevation of Intraocular Pressure

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, diabetic retinopathy, and retinal vascular occlusions. Rodent models of I/R injury are providing significant insights into mechanisms and treatment strategies for human I/R injury, especially with regard to neurodegenerative damage in the retinal neurovascular unit. Presented here is a protocol for inducing retinal I/R injury in mice through elevation of intraocular pressure (IOP). In this protocol, the ocular anterior chamber is cannulated with a needle, through which flows the drip of an elevated saline reservoir. Using this drip to raise IOP above systolic arterial blood pressure, a practitioner temporarily halts inner retinal blood flow (ischemia). When circulation is reinstated (reperfusion) by removal of the cannula, severe cellular damage ensues, resulting ultimately in retinal neurodegeneration. Recent studies demonstrate inflammation, vascular permeability, and capillary degeneration as additional elements of this model. Compared to alternative retinal I/R methodologies, such as retinal arterial ligation, retinal I/R injury by elevated IOP offers advantages in its&#160;anatomical specificity, experimental tractability, and technical accessibility, presenting itself as a valuable tool for examining neuronal pathogenesis and therapy in the retinal neurovascular unit.

This article describes a procedure for inducing retinal ischemia-reperfusion injury by elevated intraocular pressure in mice. Retinal ischemia-reperfusion injury by elevated intraocular pressure serves to model human pathologies characterized by compromised oxygen and nutrient delivery in the retina, enabling researchers to examine potential cellular mechanisms and treatments for human diseases of the retinal neurovascular unit.

안압 상승을 통해 망막 허혈 - 재관류 손상의 마우스 모델

Retinal ischemia-reperfusion (I/R) is a pathophysiological process contributing to cellular damage in multiple ocular conditions, including glaucoma, ...

Ultrasonographic Assessment During Cardiopulmonary Resuscitation

The US-CAB (Ultrasound, Circulation/Airway/Breathing) protocol integrates several sonographic techniques into a structured assessment of the circulation, airway, and breathing status of a patient during cardiopulmonary resuscitation (CPR) in an advanced life support-compliant manner. US-C provides a subxiphoid view of the heart, to look for potentially reversible causes of disease, such as pericardial effusion, pulmonary embolism, hypovolemia, and acute coronary thrombosis. Sonographic cardiac activity during CPR not only helps differentiate pseudo-pulseless electrical activity (PEA) from true PEA but also represents a higher chance of the return of spontaneous circulation (ROSC) and survival. Evaluation of the inferior vena cava (IVC) shows the fluid status of the patient and indicates the best methods to use for fluid resuscitation. If aortic dissection is suspected, a subxiphoid view of the aorta is suggested for identifying an intimal flap. Once intubation is done, tracheal ultrasound (US-A) at the suprasternal notch helps differentiate endotracheal intubation (one air-mucosal interface with one comet-tail) from esophageal intubation (double tract sign). Immediately following US-A, bilateral lung US (US-B) should be done to confirm proper bilateral ventilation using the lung sliding sign. In addition, US-C can be serially followed to see the dynamic changes in the cardiac chambers and IVC, or any cardiac contraction suggestive of ROSC. US-B can also detect coexisting lung or pleural pathologies without interfering with the performance of CPR. The main concern when implementing this method is maintaining high-quality CPR without delays in chest compressions when performing US-CAB. Rigorous training and continued practice are key to minimize any interruptions during resuscitation.

Here, we present a US-CAB (Ultrasound, Circulation/Airway/Breathing) protocol for use during cardiopulmonary resuscitation (CPR). US-C evaluates the subxiphoid view of the heart and inferior vena cava. After intubation, tracheal US (US-A) and lung US (US-B) help confirm endotracheal intubation and proper ventilation.

심폐 소생술 중 초음파 검사

The US-CAB (Ultrasound, Circulation/Airway/Breathing) protocol integrates several sonographic techniques into a structured assessment of the circulation, ...

A Pre-clinical Rat Model for the Study of Ischemia-reperfusion Injury in Reconstructive Microsurgery

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many areas of biomedical research due to its cost-effectiveness and its translation to humans. This protocol describes a method to create a preclinical free skin flap model in rats with ischemia-reperfusion injury. The described 3 cm x 6 cm rat free skin flap model is easily obtained after the placement of several vascular ligatures and the section of the vascular pedicle. Then, 8 h after the ischemic insult and completion of the microsurgical anastomosis, the free skin flap develops the tissue damage. These ischemia-reperfusion injury-related damages can be studied in this model, making it a suitable model for evaluating therapeutic agents to address this pathophysiological process. Furthermore, two main monitoring techniques are described in the protocol for the assessment of this animal model: transit-time ultrasound technology and laser speckle contrast analysis.

Here, we describe a pre-clinical animal model for studying the pathophysiology of ischemia-reperfusion injury in reconstructive microsurgery. This free skin flap model based on the superficial caudal epigastric vessels in the rat may also allow for the evaluation of different therapies and compounds to counteract ischemia-reperfusion injury-related damage.

재건 미세 수술에서 허혈 재관류 손상의 연구를위한 전 임상 쥐 모델

Ischemia-reperfusion injury is the main cause of flap failure in reconstructive microsurgery. The rat is the preferred preclinical animal model in many ...

Delayed Intramyocardial Delivery of Stem Cells after Ischemia Reperfusion Injury in a Murine Model

There is significant interest in the use of stem cells (SCs) for the recovery of cardiac function in individuals with myocardial injuries. Most commonly, cardiac stem cell therapy is studied by delivering SCs concurrently with the induction of myocardial injury. However, this approach presents two significant limitations: the early hostile pro-inflammatory ischemic environment may affect the survival of transplanted SCs, and it does not represent the subacute infarction scenario where SCs will likely be used. Here we describe a two-part series of surgical procedures for the induction of ischemia-reperfusion injury and delivery of mesenchymal stem cells (MSCs). This method of stem cell administration may allow for the longer viability and retention around damaged tissue by circumventing the initial immune response. A model of ischemia reperfusion injury was induced in mice accompanied by the delivery of mesenchymal stem cells (3.0 x 105), stably expressing the reporter gene firefly luciferase under the constitutively expressed CMV promoter, intramyocardially 7 days later. The animals were imaged via ultrasound and bioluminescent imaging for confirmation of injury and injection of cells, respectively. Importantly, there was no added complication rate when performing this two-procedure approach for SC delivery. This method of stem cell administration, collectively with the utilization of state-of-the-art reporter genes, may allow for the in vivo study of viability and retention of transplanted SCs in a situation of chronic ischemia commonly seen clinically, while also circumventing the initial pro-inflammatory response. In summary, we established a protocol for the delayed delivery of stem cells into the myocardium, which can be used as a potential new approach in promoting regeneration of the damaged tissue.

Stems cells are continuously investigated as potential treatments for individuals with myocardial damage, however, their decreased viability and retention within injured tissue can impact their long-term efficacy. In this manuscript we describe an alternative method for stem cell delivery in a murine model of ischemia reperfusion injury.

뮤린 모델에서 허혈혈 재관류 부상 후 줄기 세포의 지연 된 자궁 내 납품

There is significant interest in the use of stem cells (SCs) for the recovery of cardiac function in individuals with myocardial injuries. Most commonly, ...

A Rat Lung Transplantation Model of Warm Ischemia/Reperfusion Injury: Optimizations to Improve Outcomes

From our experience with rat lung transplantation, we have found several areas for improvement. Information in the existing literature regarding methods for choosing appropriate cuff sizes for the pulmonary vein (PV), pulmonary artery (PA), or bronchus (Br) are varied, thus making the determination of proper cuff size during rat lung transplantation an exercise of trial and error. By standardizing the cuffing technique to use the smallest effective cuff appropriate for the size of the vessel or bronchus, one can make the transplantation procedure safer, faster, and more successful. Since diameters of the PV, PA, and Br are related to the body weight of the rat, we present a strategy to choosing an appropriate size using a weight-based guide. Since lung volume is also related to body weight, we recommend that this relationship should also be considered when choosing the proper volume of air for donor lung inflation during warm ischemia as well as for the proper volume of PBS to be instilled during bronchoalveolar lavage (BAL) fluid collection. We also describe methods for 4th intercostal space dissection, wound closure, and sample collection from both the native and transplanted lobes.

Here, we present optimizations to a rat lung transplantation model that serve to improve outcomes. We provide a size guide for cuffs based on body weight, a measurement strategy to ascertain the 4th intercostal space, and methods of wound closure and BAL (bronchoalveolar lavage) fluid and tissue collection.

온난 허혈/재관류 손상의 쥐 폐 이식 모델: 결과 개선을 위한 최적화

From our experience with rat lung transplantation, we have found several areas for improvement. Information in the existing literature regarding methods ...

An Effective Mouse Model of Unilateral Renal Ischemia-Reperfusion Injury

Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the leading cause of acute renal failure and is a significant contributor to delayed graft function. Animal models are the only available resources that mimic the complexities of the IRI-associated damage encountered in vivo. This paper describes an effective mouse model of unilateral renal IRI that delivers highly reproducible data. Ischemia is induced by occluding the right renal pedicle for 30 min followed by reperfusion. In addition to the surgical procedure, a sequential overview of the expected physiological and histopathological changes following renal IRI will be provided by comparing data from seven different reperfusion times (4 h, 8 h, 16 h, 1 day, 2 days, 4 days, and 7 days). Critical data for planning experiments ahead, such as mean surgical time, average anesthetic consumption, and body weight changes over time, will be shared. This work will help researchers implement a reliable renal IRI model and select the appropriate reperfusion time that aligns with their intended investigative goals.

Renal ischemia-reperfusion injury is associated with high morbidity and mortality in hospitalized patients. Here, we present a simple and effective mouse model of unilateral renal ischemia-reperfusion injury and provide a sequential overview of representative pathological changes observed in the kidney.

일방적 인 신장 허혈 - 재관류 손상의 효과적인 마우스 모델

Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the leading cause of acute renal failure and is a significant contributor to delayed graft function. Animal models ...

A Piglet Perinatal Asphyxia Model to Study Cardiac Injury and Hemodynamics after Cardiac Arrest, Resuscitation, and the Return of Spontaneous Circulation

Neonatal piglets have been extensively used as translational models for perinatal asphyxia. In 2007, we adapted a well-established piglet asphyxia model by introducing cardiac arrest. This enabled us to study the impact of severe asphyxia on key outcomes, including the time taken for the return of spontaneous circulation (ROSC), as well as the effect of chest compressions according to alternative protocols for cardiopulmonary resuscitation. Due to the anatomical and physiological similarities between piglets and human neonates, piglets serve as good models in studies of cardiopulmonary resuscitation and hemodynamic monitoring. In fact, this cardiac arrest model has provided evidence for guideline development through research on resuscitation protocols, pathophysiology, biomarkers, and novel methods for hemodynamic monitoring. Notably, the incidental finding that a substantial fraction of piglets have pulseless electrical activity (PEA) during cardiac arrest may increase the applicability of the model (i.e., it may be used to study pathophysiology extending beyond the perinatal period). However, the model generation is technically challenging and requires various skill sets, dedicated personnel, and a fine balance of the measures, including the surgical protocols and the use of sedatives/analgesics, to ensure a reasonable rate of survival. In this paper, the protocol is described in detail, as well as experiences with adaptations to the protocol over the years.

This piglet model involves surgical instrumentation, asphyxiation until the cardiac arrest, resuscitation, and post-resuscitation observation. The model allows for multiple sampling per animal, and by using continuous invasive arterial blood pressure, ECG, and non-invasive cardiac output monitoring, it provides knowledge about hemodynamics and cardiac pathophysiology in perinatal asphyxia and neonatal cardiopulmonary resuscitation.

심정지, 소생술 및 자발순환 회복 후 심장 손상 및 혈역학을 연구하기 위한 새끼돼지 주산기 질식 모델

Neonatal piglets have been extensively used as translational models for perinatal asphyxia. In 2007, we adapted a well-established piglet asphyxia model ...