미세아교세포 분리를 위한 생쥐 뇌 해부

분리된 쥐의 뇌 조직을 뇌당 1밀리리터의 소화 완충액에 넣고 얼음 위의 별도의 페트리 접시에 넣는 것으로 시작합니다. 깨끗한 메스 칼날을 사용하여 뇌 조직을 작은 조각으로 완전히 자릅니다. 팁이 잘린 플라스틱 이송 피펫을 사용하여 다진 뇌를 얼음 위의 24웰 플레이트 내부의 개별 웰로 조심스럽게 옮깁니다.

투명하고 유연한 큰 필름으로 접시를 덮고 뚜껑을 닫고 얼음 위에서 30분 동안 배양합니다. 다음으로, 소화된 뇌 용액을 5밀리리터의 차가운 FACS 완충액이 포함된 얼음 위의 개별 7밀리리터 아이스 글라스 룽스 균질화기로 옮깁니다. 단세포 현탁액이 얻어질 때까지 느슨한 유봉으로 각 뇌를 부드럽게 두드린다.

15밀리리터 폴리프로필렌 튜브로 옮기기 전에 단일 셀 현탁액을 보장하기 위해 단단한 유봉으로 3-4회 부드럽게 두드립니다.