우리는 그들의 지원을 위해 다음과 같은 감사 위치 : 연방 장학위원회 영국 기금 (HP), EPSRC (HP), BBSRC (MFN) 및 유럽 연합 (EU) 마리 퀴리의 작업 (MFN).

1. Parasagittal 슬라이스 준비 1.1 대뇌 반구를 해부 모든 동물 실험은 지역 윤리적 검토와 국가의 규정을 따라야합니다. 여기에서 설명한 실험의 경우, 작품은 영국의 동물 (과학적 절차) 법 1986 준수. 우리는 정기적으로 두뇌를 제거하기 전에 마우스를 안락사시키려는 마취없이 경추 탈구를 사용합니다. 또는 마우스들은 불치병 anesthetized 될 수 있지만,이 경우는 마취의 선택의 연결 속성에 영향을 미치는지 확인 할 수 있습니다. 마우스에서 두뇌를 제거하고 추위에 즉시 장소 (4-8 ° C) 인공 뇌척수 (ACSF)을 (용액 조성을위한 표 1 참조) 절삭하는 carbogen (95% O 2 5 % CO 2)와 채도로 부풀어 오른 모양이었다. 3 분 최대 후에 신중하게 C에서 두뇌를 제거utting ACSF는 주걱을 사용하여 부드럽게 커팅 ACSF (그림 1A)로 moistened되었습니다 거름종이를 향해 수직 위치 (위쪽으로 향하게 지느러미 쪽)에 넣습니다. 반구의 장착 정확하고 용이하게하기 위해 멕을 (뇌를의 꼬리 극단에 위치)에 영향을주지 않고 최대한 소뇌의를 제거하고 코로나 비행기에 sectioning에 의해 뇌를의 주동이의 세번째를 제거하는 면도날이나 메스를 사용하여 (그림 1B). 섹션 정확히 중간선 (그림 1C)의 수직 평면을 따라는 것을 돌보는 두뇌를 Hemisect. 1.5 분 동안 부풀어 오른 절단 ACSF로 반구를 반환합니다. 1.2 vibratome에 반구를 탑재 장착하기 전에 vibratome 블레이드의 첨단이 수평에서 20도 각도에서되도록 ( <strong&gt; 그림 1D). 장착 표면에서 약 vibratome 블레이드에 superglue 평행의 얕은 스트립, 반구의 넓이를 만들어 충분히 두 개의 반구 엔드 - 투 - 엔드를 수용합니다. 그 내측 표면이 주걱에 달려 있으며 지느러미 범위가 마이크로톰 블레이드 향해 직면 있도록 신체에 미치는 영향을 최소화하기 위해 돌보는 것은 주걱 및 위치와 절단 ACSF의 각 반구를 제거합니다. 부드럽게 각 반구의 내측 표면 마이크로톰 기지 평행한지 확인하는 것은 돌보는 superglue의 스트립에 각 반구를 끼웁니다. 우리는 최상의 결과를 위해 각 반구의 지느러미 표면에 평행하게 vibratome 블레이드 (그림 1D)을 직시해야 것으로 나타났습니다. 깔끔히 동안 준비 1.3 유지 보수 즉시 장착 차가운 절단 ACSF (- 8 ° C 4)에서 잠수함 반구에 이어. temperatur를 유지깔끔히 절차 전반에 걸쳐 전자와 carbogen 채도. 커팅 챔버의 솔루션의 직접적인 냉각 및 기포가 실용적이 아닌 경우, 정기적으로 신선한 차게하고 부풀어 오른 솔루션 챔버에서 절단 ACSF 솔루션을 보충. 1.4 컷 섹션 당신은 (그림 1 층) (측면 표면에서 일반적으로 ~ 1mm 다운) 멕의 측면에서 가장 범위를 식별할 때까지 vibratome 사용하여 화살 비행기의 양쪽 반구에서 피질을 제거하십시오. 상처가 너머로 칼날을 끌어 노출된 조직 손상을 방지하기 위해 ~ 최대 200 μm의를 vibratome 블레이드 리프트 사이. 멕의 중간 정도에 도달할 때까지 동시 (그림 1D와 같이 그들이 줄지어있다면 그들이 동시에 절단됩니다 모두) 양쪽 반구에서 400 μm의 parasagittal 섹션을 했네요. 이것은 전술 ventro - 꼬리 곡선 주위에 두꺼운 흰색 밴드의 부재에 의해 확인할 수 있습니다그는 해마 (외부 캡슐)의 주동이의 경계의 비 볼록 모양과 각도 dorso-꼬리 &#39;코너&#39;. 그림 1E는 멕의 측면 parasagittal 비행기에서 해마의 둥근 모양을 보여줍니다. 수치는 1 층-G 설명 깔끔히 때 멕 내의 섹션은 서로 다른 측면 - 중간 위치에 표시하는 방법. 보다 중간 위치에있는 해마의 점차적으로 더 많은 콩 모양의 외관을합니다. 각 반구는 일반적 멕을 포함한 두 세 400 μm의 두께 슬라이스를 얻을. 1.5 품어 조각 각 절단 직후 35 ° C.에 물 목욕 유지 carbogen - 포화 표준 ACSF의 조각을 배치 조각은 깔끔히 후 ACSF 약 15 분 동안 35 ° C에서 품어하도록 허용하는 것은 분명하다. 물 목욕에서 슬라이스 홀더를 제거하고 나에 대해 상온에서 carbogen으로 품어 계속동쪽 45분. 2. 예 Parasagittal의 슬라이스 실험 이러한 준비 과정을 사용하여 일반적인 실험 멕의 계층 II에 별 모양의 세포에서 electrophysiological 레코딩을하는 것입니다. 2.1 최적화 광학 녹음하기 전에, 콘덴서는 슬라이스 비행기 (쾰러 조명)에 초점에 있으며 높은 배율 (예 : 40x) 목표 아래 중앙에 있는지 확인하십시오. 관심 2.2 확인 세포 낮은 배율 멕 (그림 2A-B) 내에서 대략적인 녹화 영역을 식별할 (예 : 4X) 목표를 사용합니다. 이 영역 내에서 실행 가능한 세포 (그림 2C-D)를 식별하기 위해 높은 배율의 목표로 전환합니다. 예를 들어, putative 레이어 II 별 모양의 세포가 시각적으로 유사한 diame 자신의 다각형 또는 난형의 모양과 여러 주요 dendrites에 의해 식별됩니다ter, 그리고 dendrite 2,13,14 혀끝의 하나의 큰 직경의 부재. 그들이 소그룹 2,9 (그림 2C-D)에 나타나는 자주 풍부하고 어디에 그들이 안정적으로 레이어 I / II 테두리의 가장자리에 식별됩니다. 이러한 interneurons과 피라미드 세포 같은 다른 세포 유형도 식별해야합니다. 이 시점에서 실험 기록된 신경 세포에 시냅스 입력을 활성화하기 위해 막 잠재적인 또는 확인된 뉴런에서 현재 멤브레인 및 전기 또는 optogenetic 방법을 기록하는 전체 세포 패치 - 클램프를 사용하여 예를 들어, 수행 할 수 있습니다. 신경 세포 정체성이 기록된 신경 세포의 electrophysiological 속성에서와 세포내 용액 내에서 형광 라벨을 포함하여 확인할 수 있습니다. 3. Dorso - 복부 축을 따라 위치를 측정 3.1 이미지 관심의 위치와 주변 슬라이스 recor의 위치를​​ 확인하려면지느러미 - 복부 축을 따라 ded 신경 세포가 첫 이미지 슬라이스와 주변 지역의 멕 지역에 낮은 배율 목표를 사용합니다. 이미지 (그림 3A) 또는 중복 이미지에 대한 관심의 위치 주위에 밝은 동그라미를 떠나 현장 아이리스 다이어프램을 스테핑하여 기록 전극을 포함 예를 들어 의한 관심의 위치, 표시한다. 중복 그때 녹음 위치와 그 주변 (그림 3B)의 초기 이미지가 겹쳐진 수있는 이미지 내의 녹화 위치를 파악합니다. 최대 이미지 멕의 지느러미 테두리에 복부 촬영 위치에서 지역을 충당하기 위해 필요할 수 있습니다 세 별도의 낮은 배율 (4X)에 적용됩니다. 이 이미지는 다음 거리를 측정합니다 (그림 3)에서 취할 수있는 이미지를 제공하기 위해 이미지 조작 소프트웨어를 사용하여 함께 맞춘 수 있습니다. 신경 세포의 신원과 위치의 추가 검증을 포함하여 녹음에 따라 수행하실 수 있습니다이러한 세포내 용액 내에서 다음 녹음이 따르는 조직의 적절한 처리를 사용 biocytin이나 알렉사 염료와 같은 비활성 마커. 3.2 멕의 지느러미 국경을 수립 멕의 지느러미 테두리는 지느러미-복부 위치를 측정할 수있는 편리한 랜드마크를 제공합니다. 멕의 복부 경계선은 잘 정의되지 않았습니다. 그림 4는 여러 중간 - 수평 위치에서 Nissl 스테인드 조각에 정의된 멕 세포 랜드마크가 DIC 조명 아래에 나타 방법을 보여줍니다. 그림 4는 원형 해마 (그림 4은 (i)) 및 계층 I (그림 4 (4)) 측면 Entorhinal 접속 (LEC)를 포함하는 parasagittal 조각과 연관된에 parasubicular 돌출부의 부족을 보여줍니다. 그림 4 기원전는 ME를 포함하는 전형적인 조각을 보여C.는 DIC 조명 조각에서 두드러진 어두운 지느러미 Parasubicular / Entorhinal 경계 지역의 지느러미 부분 parasubiculum의 영역을 포함하고 있습니다. parasubiculum 지역은 명확 칼럼 (3)의 해당 이미지 Nissl 염색법에 의해 드러났습니다. 멕 (4B와 4C 칼럼 (4)의 검은 화살표)의 지느러미 테두리는 레이어 I (4B와 4C 칼럼 (4)에서 빨간색 화살표)로 멀리 protrudes parasubicular 세포의 그룹에 복부이다. 그림 4B와 4C 열 (2)와 Nissl 섹션 멕의 지느러미 테두리가 DIC 슬라이스의 어두운 Parasubicular / Entorhinal 경계 지역의 지느러미 가장자리에 복부가 위치에 해당하는 (3) 쇼 (의 비교 검은색 화살표). 테두리의 위치는 (또한 심판. 14 참​​조) DIC 이미지와 비교에서 참조 이미지를 예상 할 수 있습니다. 분자 마커와 지느러미 멕 국경의 미래 검증이 추정의 정확도가 향상됩니다. 우리는 THA 있습니다지마 참조 섹션을 묻다, 그리고 라벨 뉴런의 형태학의 식별을 위해 처리되는 부분은 상당한 수축에 따라 달라질 수 있습니다. DIC 및 참조 섹션의 랜드마크에 상대적으로 절대적인 거리의 비교 그러므로 첫번째 측정 및 수축에 대한 수정 (예 : 심판 2 참조)이 필요합니다. 3.3 거리를 보정과 측정 거리 변환 비율 : 이미지의 거리를 쉽게 측정을 용이하게하기 위해 픽셀을 설정하기 위해 이미지 참조 격자에 동일한 낮은 배율 목표를 사용합니다. 그래픽 프로그램을 사용하여 멕의 등고선을 따라 흥미 위치 멕의 지느러미 테두리에서 픽셀 거리를 측정하고 μm의에서 거리 (그림 5A)으로 픽셀 거리를 변환합니다. 뉴런이 같은 biocytin 같은 표식으로 가득차있다면, 기록된 신경 세포의 위치는 다음에도 (예 : 심판 2 참조) 적절한 처리하여 복구할 수 있습니다. 4. Representative 결과 그림 5A는 예를 들어 낮은 배율 (4X) 겹쳐 녹음한 뉴런 및 측정 가이드의 위치와 녹음 후 parasagittal 슬라이스의 합성 이미지를 보여줍니다. 표시된 지느러미와 복부 별 모양의 세포에서 레코딩이 그림 5B에 표시됩니다. 이 녹음은 세포의 정체성을 확립하고 멕 레이어 II에 별 모양의 세포의 전기적 특성은 지느러미와 복부 위치에 차이가 방법을 설명하는 데 도움이됩니다. <img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/3802/3802fig1.jpg" /> 1 그림. parasagittal 조각의 작성. 필터 종이에 위쪽으로 향하게 지느러미 측면과 함께 휴식 전체 머리가 ACSF. B에게 절단과 moistened </strong은 장착 준비 전두엽 피질. C Hemisected 두뇌의 소뇌와 주동이의 세번째의 제거 후&gt; 브레인. D는 병렬 ACSF 절삭 년 전에 침수로 vibratome 블레이드의 가장자리를 절단하고 LEC를 포함하는 섹션. 전자 외관을 깔끔히에 동안 접착제 스트립의 반구를 마운트 조직 추가 400 μm의를 (표면에 표시된 것과 중간 400 μm의입니다 제거한 후 멕의 &#39;측면&#39;의 일부 측면 조직의 제거 후 절차를 깔끔히하고 표준 parasagittal 멕 슬라이스에 대해 아직 충분히 중간 없습니다. F 모양 . (F)) 400 μm의 parasagittal 슬라이스 후 멕의 &#39;중간&#39;부분의 G 외관이 절단되어 각각 해부 랜드마크, C 나타내는 EF의 HI 회로도 :. 소뇌, L : 가로 entorhinal 피질 (LEC), 소 : 중간가 Entorhinal 접속 (멕), H : 해마, 오렌지 : 외부 캡슐, 파랑 : 코퍼스 callosum, 시안 : 이가있는 이랑, GR18 이요 : CA3 및 CA1. (H에 검은색 화살표) 만 멕 포함하는 슬라이스에있는 반면, 경계가 선형이 될 수있다 (빨간색 전에서 화살표) 또는 오목 (J에서 빨간색 화살표) LEC를 포함하는 슬라이스에있는 해마의 주동이의 경계의 모양이 오목입니다. 색깔의 해부 학적 경계표의 대략적인 모양은 앨런 뇌 아틀라스 (의 주석에서 얻은되었다 <a href="http://mouse.brain-map.org/atlas/ARA/Sagittal/browser.html">http://mouse.brain-map.org/atlas/ARA/Sagittal/browser.html</a> ). <img alt="그림 2" src="/files/ftp_upload/3802/3802fig2.jpg" /> 그림 2. DIC 조명 아래 멕 레이어 II 세포를 식별. 패러의 예제 합성 이미지<html> 낮은 배율의 화살 뇌 슬라이스 (4X). 별도의 이미지를 정렬하고 산만 가장자리와 vignetting를 제거하는 혼합되었습니다. 중요 획기적인 영역의 H : 해마, M :.. 높은 배율의 오른쪽 가장자리 근처에 어두운 세로 스트 라이프와 같은 눈에 띄는, 멕 C 멕 레이어 II의 계층 II를 (포함하는 개별 낮은 배율 (4X) 이미지에서 멕의 B 자르기 DIC 조명과 40x). 이미지는 여러 이미지의 정렬 및 혼합 합성입니다. 세포의 밀도 중심 &#39;열&#39;은 레이어 II에 건강한 putative 별 모양의 세포와 interneurons의 그룹을 보여주는 레이어 II. D 싱글 높은 배율 DIC 이미지입니다. 여기에 표시된 바와 같이, 세포가 자주 레이어 I / II의 경계에 그룹에서 발생하는 별 모양의. 피라미드 세포 가까이 레이어 II / III 국경에 발견되는 경향이 있습니다. 교류의 점선 윤곽선은 각각 BD의 범위를 나타냅니다. 스케일 바 : A와 B 500 μm의에서, C 및 D 100 μm의 인치 그림 3은 &quot;SRC =&quot;/ files/ftp_upload/3802/3802fig3.jpg &quot;/&gt; 그림 3. 관심 지역의 지느러미-복부 위치를 측정. 연합 낮은 배율 (4X)의 관심 위치 (기록 전극의 일각에 의해 표시)과 어두운 Entorhinal / Parasubicular 경계 지역 랜드마크 (지느러미 국경을 수립하는 데 사용 사이 멕의 전체 dorso-복부 범위를 포함 이미지 멕의 -. B는 마찬가지로) 그림 4를 참조하지만, 현장 아이리스 다이어프램 (감소 불투명도와 중첩) 대신 관심의 위치를 표시하는 기록 전극을 중지와 겹쳐 이미지를 포함합니다. <img alt="그림 4" src="/files/ftp_upload/3802/3802fig4.jpg" /> 4 그림. parasagittal 조각의 DIC 이미지에서 멕의 지느러미 테두리를 예측. Entorhinal 접속에서 AC Parasagittal 섹션 (중간에 가로). DIC와 Nissl 섹션은 서로 다른 마이크 출신전자 AC 칼럼은 (i) :.. 전체 parasagittal 조각 (400 μm의 두께) (정렬과 낮은 배율 (4X) 심상의 혼합 복합 재료) AC 칼럼 (2)는 :에 특징적인 진한 Parasubicular / Entorhinal 경계 지역으로 entorhinal 피질 부위 닫아 각 이미지의 상단 영역입니다. AC 칼럼 (3) Nissl 스테인드 조각 (두께 40 μm의)는 다른 마우스는 AC (2)에서 이미지를 정렬. 세포의 어둡고, 밀도 레이어는 레이어 II입니다. 비교 열 (2) 그리고 (iii) Nissl 스테인드 세포는 DIC 이미지에 표시되는 방법을 보여줍니다 교류 열 (IV) :. Nissl 스테인드 조각의 상세. B와 C 열 (IV)는 parasubiculum (DIC 이미지의 어두운 Parasubicular / Entorhinal 경계 지역의 지느러미 부분)와 지느러미 멕의 세포에서 세포를 포함합니다. B (4) 및 C (4) 계층에 깊이 뻗어 parasubicular 세포의 큰 지느러미 패치에서 나는 (빨간색 화살표)을 쉽게 볼 수 있습니다. 이러한 패치의 복부 가장자리는 지느러미 보에 해당멕의 rder (검은색 화살표). 년 (4) parasubicular 패치 슬라이스 표준 parasagittal 멕 슬라이스 준비도 측면임을 나타냅니다 결석입니다. 모든 패널에 검정색 화살표가 멕의 지느러미 테두리를 나타냅니다. 회색 화살표는 멕의 대략적인 복부 경계를 나타냅니다. <img alt="그림 5" src="/files/ftp_upload/3802/3802fig5.jpg" /> 그림 5. 대표 결과입니다. 그림 3에있는 이미지의 혼합과 자른 부분. 지느러미 전지 및 복부 세포의 위치는 각각 파란색과 녹색으로 채워진 동그라미로 표시됩니다. 검은색 화살표는 멕의 예상 지느러미 경계를 표시하고 흰색 점선으로 깊은 레이어로 연장됩니다. 솔리드 화이트 라인은 멕의 지느러미 국경에서 ventrally 위치한 세포까지 거리 픽셀 측정이 수행된 어떤 따라 윤곽 경로를 보여주는 가이드입니다. 스케일 바 : 500 μm의 B 전기주세요.세포의 생리 흔적이 왼쪽에서 오른쪽으로 A에서 표시 - 입력 저항을 계산하는 데 사용되는 현재의 단계에 subthreshold 응답을, 큰 긍정적인 전류 스텝, 스파이크 세부 사항에 대한 응답을 탔지.

<ol>
	<li>O'Donnell, C., Nolan, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tuning+of+synaptic+responses:+an+organizing+principle+for+optimization+of+neural+circuits.">Tuning of synaptic responses: an organizing principle for optimization of neural circuits.</a> Trends Neurosci. 34, 51-60 (2011).</li><li>Garden, D. L. F., Dodson, P. D., O'Donnell, C., White, M. D., Nolan, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tuning+of+synaptic+integration+in+the+medial+entorhinal+cortex+to+the+organization+of+grid+cell+firing+fields.">Tuning of synaptic integration in the medial entorhinal cortex to the organization of grid cell firing fields.</a> Neuron. 60, 875-889 (2008).</li><li>Kuba, H., Yamada, R., Fukui, I., Ohmori, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tonotopic+specialization+of+auditory+coincidence+detection+in+nucleus+laminaris+of+the+chick.">Tonotopic specialization of auditory coincidence detection in nucleus laminaris of the chick.</a> Journal of Neuroscience. 25, 1924-1934 (2005).</li><li>Hafting, T., Fyhn, M., Molden, S., Moser, M. -. B., Moser, E. I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microstructure+of+a+spatial+map+in+the+entorhinal+cortex.">Microstructure of a spatial map in the entorhinal cortex.</a> Nature. 436, 801-806 (2005).</li><li>Sargolini, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conjunctive+representation+of+position,+direction,+and+velocity+in+entorhinal+cortex.">Conjunctive representation of position, direction, and velocity in entorhinal cortex.</a> Science. 312, 758-762 (2006).</li><li>Fyhn, M., Hafting, T., Witter, M. P., Moser, E. I., Moser, M. -. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Grid+cells+in+mice.">Grid cells in mice.</a> Hippocampus. 18, 1230-1238 (2008).</li><li>Giocomo, L. M., Zilli, E. A., Frans&#233;n, E., Hasselmo, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Temporal+frequency+of+subthreshold+oscillations+scales+with+entorhinal+grid+cell+field+spacing.">Temporal frequency of subthreshold oscillations scales with entorhinal grid cell field spacing.</a> Science. 315, 1719-1722 (2007).</li><li>Giocomo, L. M., Hasselmo, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Time+constants+of+h+current+in+layer+II+stellate+cells+differ+along+the+dorsal+to+ventral+axis+of+medial+entorhinal+cortex.">Time constants of h current in layer II stellate cells differ along the dorsal to ventral axis of medial entorhinal cortex.</a> Journal of Neuroscience. 28, 9414-9425 (2008).</li><li>Burgalossi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microcircuits+of+functionally+identified+neurons+in+the+rat+medial+entorhinal+cortex.">Microcircuits of functionally identified neurons in the rat medial entorhinal cortex.</a> Neuron. 70, 773-786 (2011).</li><li>Dodson, P. D., Pastoll, H., Nolan, M. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dorsal-ventral+organization+of+theta-like+activity+intrinsic+to+entorhinal+stellate+neurons+is+mediated+by+differences+in+stochastic+current+fluctuations.">Dorsal-ventral organization of theta-like activity intrinsic to entorhinal stellate neurons is mediated by differences in stochastic current fluctuations.</a> J. Physiol. (Lond). 589, 2993-3008 (2011).</li><li>Nolan, M., Dudman, J., Dodson, P., Santoro, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=HCN1+channels+control+resting+and+active+integrative+properties+of+stellate+cells+from+layer+II+of+the+entorhinal+cortex.">HCN1 channels control resting and active integrative properties of stellate cells from layer II of the entorhinal cortex.</a> Journal of Neuroscience. 27, (2007).</li><li>Boehlen, A., Heinemann, U., Erchova, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+range+of+intrinsic+frequencies+represented+by+medial+entorhinal+cortex+stellate+cells+extends+with+age.">The range of intrinsic frequencies represented by medial entorhinal cortex stellate cells extends with age.</a> Journal of Neuroscience. 30, 4585-4589 (2010).</li><li>Klink, R., Alonso, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphological+characteristics+of+layer+II+projection+neurons+in+the+rat+medial+entorhinal+cortex.">Morphological characteristics of layer II projection neurons in the rat medial entorhinal cortex.</a> Hippocampus. 7, 571-583 (1997).</li><li>van Groen, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Entorhinal+cortex+of+the+mouse:+cytoarchitectonical+organization.">Entorhinal cortex of the mouse: cytoarchitectonical organization.</a> Hippocampus. 11, 397-407 (2001).</li><li>Dolorfo, C. L., Amaral, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Entorhinal+cortex+of+the+rat:+organization+of+intrinsic+connections.">Entorhinal cortex of the rat: organization of intrinsic connections.</a> The Journal of Comparative Neurology. 398, 49-82 (1998).</li></ol>

공개하는 아무것도.

우리가 상세하게 여기 멕의 지느러미-복부 정도를 유지 parasagittal 슬라이스 준비 생산을위한 절차를 설명했습니다 지느러미-복부 조직을 따라 멕 회로 특성 조사를 용이하게합니다. 중요 단계 동물의 두뇌를 제거하고. 두뇌에 exerting 압력을 피하기 위해 특별한주의를 기울입니다. 이것은 뇌의 급격한 제거보다 더 중요하다. <p class="jove_conten...

<table border="1"><tbody><tr><td></td><td> 절단 ACSF (㎜) </td><td> 표준 ACSF (㎜) </td><td> 내부 용액 (㎜) </td><td> CASNumber </td><td> 공급 업체 카탈로그 번호 </td></tr><tr><td> NaCl </td><td> 86 </td><td> 124 </td><td></td><td> 7647-14-5 </td><td> 시그마 S9888 </td></tr><tr><td> 아뇨 2 PO 4 </td><td> 1.2 </td><td> 1.2 </td><td></td><td> 13472-35-0 </td><td> 시그마 71,505 </td></tr><tr><td> KCl </td><td> 2.5 </td><td> 2.5 </td><td> 10 </td><td> 7447-40-7 </td><td> 시그마 P3911 </td></tr><tr><td> NaHCO 3 </td><td> 25 </td><td> 25 </td><td></td><td> 144-55-8 </td><td> 피셔 S/4240 </td></tr><tr><td> 포도당 </td><td> 25 </td><td> 20 </td><td></td><td> 50-99-7 </td><td> 시그마 G5767 </td></tr><tr><td> 자당 </td><td> 75 </td><td></td><td></td><td> 57-50-1 </td><td> 시그마 S5​​016 </td></tr><tr><td> 칼슘CL이 </td><td> 0.5 </td><td> 2 </td><td></td><td> 10043-52-4 </td><td> VWR 190464K </td></tr><tr><td> MgCl 2 </td><td> 7 </td><td> 일 </td><td> 2 </td><td> 7786-30-3 </td><td> 시그마 63,020 </td></tr><tr><td> K 글루 콘 산 </td><td></td><td></td><td> 130 </td><td> 299-27-4 </td><td> 시그마 G4500 </td></tr><tr><td> HEPES </td><td></td><td></td><td> 10 </td><td> 7365-45-9 </td><td> 시그마 H3375 </td></tr><tr><td> EGTA </td><td></td><td></td><td> 0.1 </td><td> 67-42-5 </td><td> 시그마 E4378 </td></tr><tr><td> 나이 ATP </td><td></td><td></td><td> 2 </td><td> 34369-07-8 </td><td> 시그마 A7699 </td></tr><tr><td> 나이 GTP </td><td></td><td></td><td> 0.3 </td><td> 36051-31-7 </td><td> 시그마 G8877 </td></tr><tr><td> NaPhospho - 크레아틴 </td><td></td><td></td><td> 10 </td><td> 19333-65-4 </td><td> 시그마 P7936 </td></tr><tr><td> Biocytin (옵션) </td><td></td><td></td><td> 2.7 </td><td> 576-19-2 </td><td&gt; 시그마 B4261 </td></tr></tbody></table> 표 1. ACSF 표준 ACSF와 K-글루 콘 산 내부 솔루션 요리법을 절단.

preparation of parasagittal slices for the investigation of dorsal-ventral organization of the rodent medial entorhinal cortex

두뇌의 계산들은 시냅스 입력을 적절하게 응답 뉴런에 의존합니다. 뉴런들은 보완하고 그들이 시냅스 입력에 응답하는 방법을 결정 멤브레인 이온 채널의 배포판에 다릅니다. 그러나 이러한 세포 특성과 동물 행동에의 연결을 함수 간의 관계가 잘 이해되지 않습니다. 이 문제에 대한 하나의 접근 방식들은 인코딩 정보 또는 계산을 향해 개별 뉴런지도의 위치들이 1을 수행하는 topographically 조직 신경 회로를 조사하는 것입니다. 이 접근법을 사용하는 실험은 감각과인지 회로 2,3 년 정보 인코딩을 밑에있는 시냅스 반응의 튜닝을위한 원리를 제안합니다. 중간 entorhinal 피질 (멕)의 지느러미 - 복부 축에 대한 공간적 표현의 지형 조직은 세포 메커니즘과 계산 사이의 관계를 확립하는 기회를 제공하고 전공간 인식을위한 mportant. 쥐 멕의 계층 II에 뉴런은 사용 위치 필드에게 4-6를 해고 그리드와 같은 인코딩. 점차적으로 더 많은 복부 자세에서 뉴런이 거리보다 1m로 증가하는 반면 멕의 지느러미 위치에서 찾을 뉴런에 격자를 형성하는 개별 발사 필드 간의 거리는 30cm의 순서에 있습니다. 몇몇 연구들은 이러한 세포 특성이 공간적 계산 2,7-10을 위해 중요하다는 것을 제안하고, 그리드 해고 필드 사이의 간격처럼, 또한 그들의 지느러미 - 복부 위치에 따라 다르다, 그렇게 멕의 계층 II에 뉴런의 세포 특성을 발표했습니다. 여기 멕 뉴런의 biophysical 및 해부 학적 특성의 지형 조직의 멕있게 조사 지느러미-복부 정도를 유지하고 뇌 조각의 준비와 electrophysiological 레코딩을위한 절차를 설명합니다. 확인된 N의 지느러미-복부 위치그것이 슬라이스의 정확한 지느러미-복부 위치에 대한 기준점을 확립하기 어려운이기 때문에 해부 학적 경계표에 상대적 eurons는, 멕 7,8,11,12의 수평 조각을 사용하는 프로토콜과 정확하게 설정할 어렵습니다. 우리가 설명하는 절차는 멕뿐만 아니라 분자 그라디언트 2,10의 시각화의 지느러미 - 복부 축을 따라 기록된 세포의 위치를 정확하고 일관성있는 측정을 가능하게합니다. 절차는 성인 쥐 (&gt; 28일)와 함께 사용하기 위해 개발되었습니다 성공적으로 1.5 년 이전에 쥐가 함께 근무하고있다. 조정을 통해 그들은 어린 쥐 또는 다른 설치류 종과 함께 사용할 수 있습니다. 준비 및 측정의 표준 시스템이 해당 지역의 셀룰러 및 microcircuit 속성의 체계적인 조사를 도움이됩니다.

Watch this Scientific Journal Video about Preparation of Parasagittal Slices for the Investigation of Dorsal-ventral Organization of the Rodent Medial Entorhinal Cortex at JoVE.com

Preparation of Parasagittal Slices for the Investigation of Dorsal-ventral Organization of the Rodent Medial Entorhinal Cortex

우리는 중간 entorhinal 피질 (멕)의 지느러미-복부 축을 유지 뇌 조각의 준비와 electrophysiological 레코딩을위한 절차를 설명합니다. 위치의 신경 인코딩 멕 내에서 지느러미-복부 조직을 따르기 때문에,이 절차는 탐색 및 메모리에 중요한 세포 메커니즘 조사를 용이하게합니다.

설치류 중간 Entorhinal 피질의 지느러미 - 복부 기관의 조사를 위해 Parasagittal 조각의 작성

Computation in the brain relies on neurons responding appropriately to their synaptic inputs. Neurons differ in their complement and distribution of ...

preparation-parasagittal-slices-for-investigation-dorsal-ventral

Research

JoVE Journal

Neuroscience

15.5K 조회수.  University of Edinburgh. 우리는 중간 entorhinal 피질 (멕)의 지느러미-복부 축을 유지 뇌 조각의 준비와 electrophysiological 레코딩을위한 절차를 설명합니다. 위치의 신경 인코딩 멕 내에서 지느러미-복부 조직을 따르기 때문에,이 절차는 탐색 및 메모리에 중요한 세포 메커니즘 조사를 용이하게합니다.

비디오: Preparation of Parasagittal Slices for the Investigation of Dorsal-ventral Organization of the Rodent Medial Entorhinal Cortex

Brain Imaging Investigation of the Neural Correlates of Emotion Regulation

The ability to control/regulate emotions is an important coping mechanism in the face of emotionally stressful situations. Although significant progress has been made in understanding conscious/deliberate emotion regulation (ER), less is known about non-conscious/automatic ER and the associated neural correlates. This is in part due to the problems inherent in the unitary concepts of automatic and conscious processing1. Here, we present a protocol that allows investigation of the neural correlates of both deliberate and automatic ER using functional magnetic resonance imaging (fMRI). This protocol allows new avenues of inquiry into various aspects of ER. For instance, the experimental design allows manipulation of the goal to regulate emotion (conscious vs. non-conscious), as well as the intensity of the emotional challenge (high vs. low). Moreover, it allows investigation of both immediate (emotion perception) and long-term effects (emotional memory) of ER strategies on emotion processing. Therefore, this protocol may contribute to better understanding of the neural mechanisms of emotion regulation in healthy behaviour, and to gaining insight into possible causes of deficits in depression and anxiety disorders in which emotion dysregulation is often among the core debilitating features.

We present a protocol that allows investigation of the neural correlates of deliberate and automatic emotion regulation, using functional magnetic resonance imaging. This protocol can be used in healthy participants, both young and older, as well as in clinical patients.

감정 규정의 신경 상호의 두뇌 이미징 조사

The ability to control/regulate emotions is an important coping mechanism in the face of emotionally stressful situations. Although significant progress ...

연구

신경과학

Brain Imaging Investigation of the Memory-Enhancing Effect of Emotion

Emotional events tend to be better remembered than non-emotional events1,2. One goal of cognitive and affective neuroscientists is 
to understand the neural mechanisms underlying this enhancing effect of emotion on memory. A method that has proven particularly influential in the 
investigation of the memory-enhancing effect of emotion is the so-called subsequent memory paradigm (SMP). This method was originally used to investigate the 
neural correlates of non-emotional memories3, and more recently we and others also applied it successfully to studies of emotional memory (reviewed in4, 5-7). 
Here, we describe a protocol that allows investigation of the neural correlates of the memory-enhancing effect of emotion using the SMP in conjunction with 
event-related functional magnetic resonance imaging (fMRI). An important feature of the SMP is that it allows separation of brain activity specifically 
associated with memory from more general activity associated with perception. Moreover, in the context of investigating the impact of emotional stimuli, 
SMP allows identification of brain regions whose activity is susceptible to emotional modulation of both general/perceptual and memory-specific processing. 
This protocol can be used in healthy subjects8-15, as well as in clinical patients where there are alterations in the neural correlates of emotion perception 
and biases in remembering emotional events, such as those suffering from depression and post-traumatic stress disorder (PTSD)16, 17.

We present a protocol that uses functional magnetic resonance imaging to investigate the neural correlates of the memory-enhancing effect of emotion. This protocol allows identification of brain activity specifically linked to memory-related processing, contrary to more general perceptual processing, and can be used with healthy and clinical populations.

감정 메모리 강화 효과의 두뇌 이미징 조사

Emotional events tend to be better remembered than non-emotional events1,2. One goal of cognitive and affective neuroscientists is 
to understand the ...

Brain Imaging Investigation of the Impairing Effect of Emotion on Cognition

Emotions can impact cognition by exerting both enhancing (e.g., better memory for emotional events) and impairing (e.g., increased emotional distractibility) effects (reviewed in 1). Complementing our recent protocol 2 describing a method that allows investigation of the neural correlates of the memory-enhancing effect of emotion (see also 1, 3-5), here we present a protocol that allows investigation of the neural correlates of the detrimental impact of emotion on cognition. The main feature of this method is that it allows identification of reciprocal modulations between activity in a ventral neural system, involved in 'hot' emotion processing (HotEmo system), and a dorsal system, involved in higher-level 'cold' cognitive/executive processing (ColdEx system), which are linked to cognitive performance and to individual variations in behavior (reviewed in 1). Since its initial introduction 6, this design has proven particularly versatile and influential in the elucidation of various aspects concerning the neural correlates of the detrimental impact of emotional distraction on cognition, with a focus on working memory (WM), and of coping with such distraction 7,11, in both healthy 8-11 and clinical participants 12-14.

We present a protocol that allows investigation of the neural mechanisms mediating the detrimental impact of emotion on cognition, using functional magnetic resonance imaging. This protocol can be used with both healthy and clinical participants.

인식에 대한 감정의 혼란 효과의 두뇌 이미징 조사

Emotions can impact cognition by exerting both enhancing (e.g., better memory for emotional events) and impairing (e.g., increased emotional ...

Simultaneous Electroencephalography, Real-time Measurement of Lactate Concentration and Optogenetic Manipulation of Neuronal Activity in the Rodent Cerebral Cortex

Although the brain represents less than 5% of the body by mass, it utilizes approximately one quarter of the glucose used by the body at rest1. The function of non rapid eye movement sleep (NREMS), the largest portion of sleep by time, is uncertain. However, one salient feature of NREMS is a significant reduction in the rate of cerebral glucose utilization relative to wakefulness2-4. This and other findings have led to the widely held belief that sleep serves a function related to cerebral metabolism. Yet, the mechanisms underlying the reduction in cerebral glucose metabolism during NREMS remain to be elucidated.
	One phenomenon associated with NREMS that might impact cerebral metabolic rate is the occurrence of slow waves, oscillations at frequencies less than 4 Hz, in the electroencephalogram5,6. These slow waves detected at the level of the skull or cerebral cortical surface reflect the oscillations of underlying neurons between a depolarized/up state and a hyperpolarized/down state7. During the down state, cells do not undergo action potentials for intervals of up to several hundred milliseconds. Restoration of ionic concentration gradients subsequent to action potentials represents a significant metabolic load on the cell8; absence of action potentials during down states associated with NREMS may contribute to reduced metabolism relative to wake.
	Two technical challenges had to be addressed in order for this hypothetical relationship to be tested. First, it was necessary to measure cerebral glycolytic metabolism with a temporal resolution reflective of the dynamics of the cerebral EEG (that is, over seconds rather than minutes). To do so, we measured the concentration of lactate, the product of aerobic glycolysis, and therefore a readout of the rate of glucose metabolism in the brains of mice. Lactate was measured using a lactate oxidase based real time sensor embedded in the frontal cortex. The sensing mechanism consists of a platinum-iridium electrode surrounded by a layer of lactate oxidase molecules. Metabolism of lactate by lactate oxidase produces hydrogen peroxide, which produces a current in the platinum-iridium electrode. So a ramping up of cerebral glycolysis provides an increase in the concentration of substrate for lactate oxidase, which then is reflected in increased current at the sensing electrode. It was additionally necessary to measure these variables while manipulating the excitability of the cerebral cortex, in order to isolate this variable from other facets of NREMS.
	We devised an experimental system for simultaneous measurement of neuronal activity via the elecetroencephalogram, measurement of glycolytic flux via a lactate biosensor, and manipulation of cerebral cortical neuronal activity via optogenetic activation of pyramidal neurons. We have utilized this system to document the relationship between sleep-related electroencephalographic waveforms and the moment-to-moment dynamics of lactate concentration in the cerebral cortex. The protocol may be useful for any individual interested in studying, in freely behaving rodents, the relationship between neuronal activity measured at the electroencephalographic level and cellular energetics within the brain.

A procedure is described for manipulating the activity of cerebral cortical pyramidal neurons optogenetically while the electroencephalogram, electromyogram, and cerebral lactate concentration are monitored. Experimental recordings are performed on cable-tethered mice while they undergo spontaneous sleep/wake cycles. Optogenetic equipment is assembled in our laboratory; recording equipment is commercially available.

동시 Electroencephalography, 설치류 대뇌 피질의 젖산 농도와 Neuronal 활동 Optogenetic 조작의 실시간 측정

Although the brain represents less than 5% of the body  by mass, it utilizes approximately one quarter of the glucose used by the body  at rest1. The ...

A Comprehensive Protocol for Manual Segmentation of the Medial Temporal Lobe Structures

The present paper describes a comprehensive protocol for manual tracing of the set of brain regions comprising the medial temporal lobe (MTL): amygdala, hippocampus, and the associated parahippocampal regions (perirhinal, entorhinal,&#160;and parahippocampal proper). Unlike most other tracing protocols available, typically focusing on certain MTL areas (e.g., amygdala and/or hippocampus), the integrative perspective adopted by the present tracing guidelines allows for clear localization of all MTL subregions. By integrating information from a variety of sources, including extant tracing protocols separately targeting various MTL structures, histological reports, and brain atlases, and with the complement of illustrative visual materials, the present protocol provides an accurate, intuitive, and convenient guide for understanding the MTL anatomy. The need for such tracing guidelines is also emphasized by illustrating possible differences between automatic and manual segmentation protocols. This knowledge can be applied toward research involving not only structural MRI investigations but also structural-functional colocalization and fMRI signal extraction from anatomically defined ROIs, in healthy and clinical groups alike.

The present work provides a comprehensive set of guidelines for manually tracing the medial temporal lobe (MTL) structures. This protocol can be applied to research involving structural and/or combined structural-functional magnetic resonance imaging (MRI) investigations of the MTL, in both healthy and clinical groups.

내측 측두엽 구조의 수동 분할을위한 포괄적 인 프로토콜

The present paper describes a comprehensive protocol for manual tracing of the set of brain regions comprising the medial temporal lobe (MTL): amygdala, ...

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have validated the utility of this method for enhancing neuronal preservation and overall brain slice viability. The implementation of this technique by early adopters has facilitated detailed investigations into brain function using diverse experimental applications and spanning a wide range of animal ages, brain regions, and cell types. Steps are outlined for carrying out the protective recovery brain slice technique using an optimized NMDG artificial cerebrospinal fluid (aCSF) media formulation and enhanced procedure to reliably obtain healthy brain slices for patch clamp electrophysiology. With this updated approach, a substantial improvement is observed in the speed and reliability of gigaohm seal formation during targeted patch clamp recording experiments while maintaining excellent neuronal preservation, thereby facilitating challenging experimental applications. Representative results are provided from multi-neuron patch clamp recording experiments to assay synaptic connectivity in neocortical brain slices prepared from young adult transgenic mice and mature adult human neurosurgical specimens. Furthermore, the optimized NMDG protective recovery method of brain slicing is compatible with both juvenile and adult animals, thus resolving a limitation of the original methodology. In summary, a single media formulation and brain slicing procedure can be implemented across various species and ages to achieve excellent viability and tissue preservation.

Preparation of Acute Brain Slices Using an Optimized N-Methyl-D-glucamine Protective Recovery Method

This protocol demonstrates the implementation of an optimized N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. A single media formulation is used to reliably obtain healthy brain slices from animals of any age and for diverse experimental applications.

최적화 된 N를 사용 하 여 급성 뇌 조각의 준비-메 틸-D-glucamine 보호 복구 방법

This protocol is a practical guide to the N-methyl-D-glucamine (NMDG) protective recovery method of brain slice preparation. Numerous recent studies have ...

The Preparation of Oblique Spinal Cord Slices for Ventral Root Stimulation

Electrophysiological recordings from spinal cord slices have proven to be a valuable technique to investigate a wide range of questions, from cellular to network properties. We show how to prepare viable oblique slices of the spinal cord of young mice (P2 - P11). In this preparation, the motoneurons retain&#160;their axons coming out from the ventral roots of the&#160;spinal cord. Stimulation of these axons elicits back-propagating action potentials invading the motoneuron&#160;somas and exciting the motoneuron&#160;collaterals within the spinal cord. Recording of antidromic action potentials is an immediate, definitive and elegant way to characterize motoneuron identity, which surpasses&#160;other identification methods. Furthermore, stimulating the motoneuron collaterals is a simple and reliable way to excite the collateral targets of the motoneurons within the spinal cord, such as other motoneurons or Renshaw cells. In this protocol, we present antidromic recordings from the motoneuron somas as well as Renshaw cell excitation, resulting from ventral root stimulation.

We show how to prepare oblique slices of the spinal cord in young mice. This preparation allows for the stimulation of the ventral roots.

복부 루트 자극에 대한 사선 척수 조각의 준비

Electrophysiological recordings from spinal cord slices have proven to be a valuable technique to investigate a wide range of questions, from cellular to ...

Effects of Transcranial Alternating Current Stimulation on the Primary Motor Cortex by Online Combined Approach with Transcranial Magnetic Stimulation

Transcranial Alternating Current Stimulation (tACS) is a neuromodulatory technique able to act through sinusoidal electrical waveforms in a specific frequency and in turn modulate ongoing cortical oscillatory activity. This neurotool allows the establishment of a causal link between endogenous oscillatory activity and behavior. Most of the tACS studies have shown online effects of tACS. However, little is known about the underlying action mechanisms of this technique because of the AC-induced artifacts on Electroencephalography (EEG) signals. Here we show a unique approach to investigate online physiological frequency-specific effects of tACS of the primary motor cortex (M1) by using single pulse Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) to probe cortical excitability changes. In our setup, the TMS coil is placed over the tACS electrode while Motor Evoked Potentials (MEPs) are collected to test the effects of the ongoing M1-tACS. So far, this approach has mainly been used to study the visual and motor systems. However, the current tACS-TMS setup can pave the way for future investigations of cognitive functions. Therefore, we provide a step-by-step manual and video guidelines for the procedure.

Transcranial Alternating Current Stimulation (tACS) allows the modulation of cortical excitability in a frequency-specific fashion. Here we show a unique approach which combines online tACS with single pulse Transcranial Magnetic Stimulation (TMS) in order to "probe" cortical excitability by means of Motor Evoked Potentials.

Transcranial Alternating Current Stimulation (tACS) is a neuromodulatory technique able to act through sinusoidal electrical waveforms in a specific ...

Evaluation of Synapse Density in Hippocampal Rodent Brain Slices

In the brain, synapses are specialized junctions between neurons, determining the strength and spread of neuronal signaling. The number of synapses is tightly regulated during development and neuronal maturation. Importantly, deficits in synapse number can lead to cognitive dysfunction. Therefore, the evaluation of synapse number is an integral part of neurobiology. However, as synapses are small and highly compact in the intact brain, the assessment of absolute number is challenging. This protocol describes a method to easily identify and evaluate synapses in hippocampal rodent slices using immunofluorescence microscopy. It includes a three-step procedure to evaluate synapses in high-quality confocal microscopy images by analyzing the co-localization of pre- and postsynaptic proteins in hippocampal slices. It also explains how the analysis is performed and gives representative examples from both excitatory and inhibitory synapses. This protocol provides a solid foundation for the analysis of synapses and can be applied to any research investigating the structure and function of the brain.

A protocol for accurately identifying and analyzing synapses in hippocampal slices using immunofluorescence is outlined in this article.

시 냅 스 밀도 Hippocampal 설치류 두뇌 분할 영역에서의 평가

In the brain, synapses are specialized junctions between neurons, determining the strength and spread of neuronal signaling. The number of synapses is ...

Preparation of Rhythmically-active In Vitro Neonatal Rodent Brainstem-spinal Cord and Thin Slice

Mammalian inspiratory rhythm is generated from a neuronal network in a region of the medulla called the preB&#246;tzinger complex (pBC), which produces a signal driving the rhythmic contraction of inspiratory muscles. Rhythmic neural activity generated in the pBC and carried to other neuronal pools to drive the musculature of breathing may be studied using various approaches, including en bloc nerve recordings and transverse slice recordings. However, previously published methods have not extensively described the brainstem-spinal cord dissection process in a transparent and reproducible manner for future studies. Here, we present a comprehensive overview of a method used to reproducibly cut rhythmically-active brainstem slices containing the necessary and sufficient neuronal circuitry for generating and transmitting inspiratory drive. This work builds upon previous brainstem-spinal cord electrophysiology protocols to enhance the likelihood of reliably obtaining viable and rhythmically-active slices for recording neuronal output from the pBC, hypoglossal premotor neurons (XII pMN), and hypoglossal motor neurons (XII MN). The work presented expands upon previous published methods by providing detailed, step-by-step illustrations of the dissection, from whole rat pup, to in vitro slice containing the XII rootlets.

This protocol both visually communicates the brainstem-spinal cord preparation and clarifies the preparation of brainstem transverse slices in a comprehensive step-by-step manner. It was designed to increase reproducibility and enhance the likelihood of obtaining viable, long lasting, rhythmically-active slices for recording neural output from the respiratory regions of the brainstem.

리듬-액티브의 준비 체 외 신생아 설치류 Brainstem-척수와 얇은 슬라이스

Mammalian inspiratory rhythm is generated from a neuronal network in a region of the medulla called the preB&#246;tzinger complex (pBC), which produces a ...