We thank Dr. Roger Hopper and the Wyoming Department of Agriculture, Analytical Services Lab for the mass spectroscopy analysis of our samples. We would like to express our gratitude to the University of Wyoming, School of Pharmacy for allowing us to video this protocol in their laboratories. We would also like to thank the Theodore O. and Dorothy S. King Endowed Professorship Agreement for their graduate assistantship (SC), the University of Wyoming for the Graduate Assistantship support (JRS), and the Science Posse (NSF GK-12 Project # 084129) for the teaching fellowship (JRS). We would also like to thank Uranium One for allowing us to obtain samples and assisting us with questions. This work was supported by the School of Energy Resources, University of Wyoming.

모든 샘플은 와이오밍 우라늄 ISR 시설의 우라늄 액체 처리 건물에서 수집 하였다. 1. 생산 블리드 물 (PBW) <ol><li> ISR 우라늄 시설에서 물 샘플의 두 가지 유형의 수집 : PBW과 삼투압 (RO) 물을 역. 이온 교환 처리 후 모니터링 탭에서하지만 역삼 투 오염 제거하기 전에 PBW를 수집합니다. PBW가 역삼 투 처리에 의해 오염 제거 후 소유주 샘플을 수집합니다. 주 : Lixiviant는이 칼럼에서 수거하고, 이온 교환을 위해 준비된다 우라늄 액체 처리 건물, 여러 분야에서 잘 파이프 라인으로 반송된다. 약 이온 교환 후 lixiviant 1-3 %가 회로에서 제거 되나 생산 블리드 물 (PBW)입니다. PBW 마이닝 프로세스에서 재사용 또는 RO 여과하여 탈회 / 오염 제거된다. </li><li> 제로 헤드 공간이있어서 물과 고밀도 폴리에틸렌의 샘플 (HDPE) 병을 수집샘플 수집 및 환경 품질의 와이오밍 부 (WYDEQ) (23)의 분석을위한 표준 운영 절차에. </li><li> 멋진을 유지하기 위해 현장 얼음 ​​및 전송 샘플 온도와 산도를 측정한다. </li><li> 4 ℃에서 저장 PBW. 다음과 같은 프로토콜의 지침에 따라 미디어 제조시 첨가되는 농축 이글의 최소 필수 매체 (EMEM-10 배)이 끝날 때까지 멋진 PBW 솔루션을 유지합니다. 참고 : PBW 동결 할 수 또는 실온으로 가온하면 침전 것이다 산화 솔루션입니다. 희석 한 후 PBW 솔루션은 충분히있다가 세포 배양시 적용하기 전에 온수에 37 ℃를 침전되지 않습니다 희석. </li></ol> 의 CuO 나노 입자 2. 준비 (CuO를-NP에) <ol><li> (P의 CuCl를 2 • 2H 2 O, 0.4 M 수산화 나트륨 (NaOH) 및 5g의 폴리에틸렌 글리콜 250 ㎖의 0.2 M의 250 mL를 함유하는 순수 에탄올 용액 수확기육mm 붕규산 유리 공 둥근 바닥 플라스크에 EG). </li><li> 변성 전자 레인지 용액을 배치하고 20 % 전력 (6 초 간격, 24 초 OFF)에서 10 분 동안 주변 공기 압력으로 환류하에 반응 할 수있다. </li><li> 유리 볼을 이탈 한 후 50 ㎖ 원뿔형 튜브에 기울여 상온 (20 ° C) 용액에 쿨. </li><li> 원심 분리기 경사 30 분, 1,000 XG에 50 ML 원뿔 튜브에서 솔루션, 다음은 300 ml의 뜨거운 물 (60 ~ 65 ° C의), 100 ml의 에탄올의 순서로의 CuO-NPS를 세척하고, 100 mL의 아세톤. </li><li> 50 ML 원뿔 튜브의 상온 (20 ℃에서)에의 CuO-NPS를 건조. </li><li> 박격포로 자신의 튜브에서의 CuO-NPS를 쳤어요. 주석 호일의 CuO-NPS를 덮고 남은 액체를 제거하기 위해 오븐에서 110 ° C까지의 CuO-NPS를 가열한다. 하나의 배치로의 CuO-NPS를 결합하고의 CuO-NPS를 단다. 참고 : CuO를-NP에와 PBW의의 CuO-NP 처리의 제조는 물 Qual의에서 수행되었다생태계 과학 및 관리, 와이오밍 대학의 성만 연구소. 의 CuO-순이익은 합성 마틴과 레디 (2009 년) (11)의 절차를 따랐다. </li></ol> 의 CuO-NP에와 PBW 3. 치료 <ol><li> PBW 50 ㎖에 이어 50 ㎖ 원뿔형 튜브에 50 mg의 CuO를-NP (1 ㎎ / ㎖)을 추가한다. 튜브를 밀봉하고 250 rpm에서 벤치 정상 궤도 진탕 기에서 30 분간 반응시켰다. </li><li> 샘플을 원심 분리기 튜브에서 30 분 동안 250 XG에 다음 0.45 μm의 주사기 필터를 사용하여 상청액을 필터. 원심 분리 속도를 변화시키고 시간의 CuO-NPS에서 원심 분리 튜브에 콤팩트하게되도록하여 나노 입자에 의존 할 수있다. </li></ol> 4. 원소 분석 <ol><li> 다음과 같이 원소 분석에 대한 처리되지 않은 (제어)과의 CuO-NP 처리 된 PBW 샘플을 준비합니다. </li><li> 2.0의 pH로 트레이스 금속 등급 질산과의 CuO-NP 처리 및 미처리 PBW의 분취 량 (40 ml)로 산성화. 유도 COUPL에 의해 양이온 산성화 된 PBW 씩 분석ED 플라즈마 - 질량 레디와 로스 (2012) (13)에 설명 된대로 분광법 (ICP-MS). </li><li> 의 CuO-NP-처리 및 치료 PBW의 unacidified 분취 (20 ㎖)를 준비하고 레디와 로스 (2012) 13에 기술 된 바와 같이 이온 크로마토 그래피 (IC)에 의해 음이온의 unacidified 분취 량을 분석 할 수 있습니다. 참고 : 분취 량은 농업 및 분석 서비스의 와이오밍 부, 라라 미 와이오밍 82070. IC와 ICPMS 절차에 대한 설명은 레디와 로스 (2012) (13)에서 찾을 수 있습니다에 의해 분석 하였다. </li></ol> PBW를 사용하여 세포 배양 미디어 5. 준비 <ol><li> 두 제어 (EMEM-1X 및 RO + 미디어)과 팔 PBW 테스트 미디어 솔루션 가능성 연구에서 (각 치료 PBW과의 CuO-NP 처리 된 미디어의 네 농도)를 사용합니다. 다음과 같이 솔루션의 개요는 다음과 같습니다 <ol><li> EMEM-1X 제어를 위해, L- 글루타민 및 중탄산 나트륨이 이미 추가로 이글의 최소 필수 매체 (EMEM-1X)를 구입. (FBS를 소 태아 혈청을 추가) 및 제조업체의 지침에 따라 항생제. 주 : EMEM-1X는 세포 성장 및 L- 글루타민 및 중탄산 나트륨을 함유위한 적절한 농도로 희석 구입. EMEM-1X는 소 태아 혈청 (FBS) 및 페니실린 및 스트렙토 마이신 (50 IU / ㎖ 페니실린, 50 μg의 / ㎖ 스트렙토 마이신)의 항생제 혼합물의 첨가를 필요로한다. 이 본 연구에 사용 된 두 종류의 세포에 대한 제조자의 권장 성장 배지이므로 EMEM-1X는 제어 매체로서 사용된다. 고농도 EMEM-10 배는 시험 용액을 제조 시설 또는 또는 미처리의 CuO-NP 처리 PBW에서 RO로 희석된다. 10 배 농축 된 EMEM-그래서 이들 소 태아 혈청 (FBS) 및 페니실린 및 스트렙토 마이신 항생제 믹스 이외에 추가 L 글루타민 또는 중탄산 나트륨을 함유하지 않는 경우 구입. </li><li> RO 제어 솔루션의 ISR 시설에서 수집 소유주 물을 사용합니다. PBW 테스트 미디어는 소유주 와트 100 % 대체와 같은 프로토콜을 사용하여PBW 대신에 ISR 시설에서 어. 실험실에서 치료와의 CuO-NP-처리 액을 사용 소유주 또는 초순수 물을 희석합니다. </li><li> 세포 배양 배지의 성분과 혼합하기 전에 4 개의 테스트 농도로 희석 미처리 PBW. 다음의 조합 (실험실에서) RO와 미처리 PBW 혼합하여 미처리 PBW 솔루션의 네 개의 다른 농도를 준비한다 : 100 % (순수 PBW +없는 RO 물), 75 % (PBW + 62.5 ml의 RO 물 187.5 ㎖) 50 % 또는 25 % (PBW RO 물 + 187.5 mL로 62.5 ㎖) (PBW RO + 물 125 ㎖를 125 ㎖). </li><li> 희석하여 세포 배양 배지의 성분과 혼합하기 전에 4 개의 테스트 농도에 PBW를 CuO를-NP는 처리. PBW를 혼합의 CuO-NP 처리 PBW 솔루션의 네 가지 상이한 농도를 준비 아래 조합 (1 mg의 사전 처리 된 / ㎖의 CuO-NP 30 분) (실험실에서) RO와 : 100 % (순수 CuO- NP 처리 된 PBW + NO RO 물), 75 % (CuO를-NP 처리 된 PBW + 62.5 ㎖의 RO 물 187.5 ㎖), 50 % (125ml의 소유주 물 PBW + 125 ㎖) 또는 25 % (CuO를-NP 처리 된 PBW RO 물 + 187.5 ㎖)의 62.5 mL로의 CuO-순이익은 처리. </li></ol></li><li> 100 % RO 190 ml의 100 %, 75 %, 50 %로 농축 EMEM-10 배의 25 ㎖를 첨가하여 RO + 미디어 미처리 PBW + 미디어와의 CuO-NP 처리 PBW + 미디어 농도 250㎖를 준비 단계 6.1.3과 6.1.4에서 만든 들어 찬 치료 또는 CuO를-NP 처리 된 PBW 농도의 25 %. </li><li> 수산화 나트륨 또는 염산 7.4 각 용액의 pH를 조정합니다. </li><li> 25 ㎖ (10 %) 소 태아 혈청 (FBS), 2.5 mL의 L- 글루타민, 0.55 g의 NaHCO3를 1.25 mL의 펜 각각 미처리의 CuO-NP 처리 PBW의 농도뿐만 아니라, RO + 미디어 다음의 표준 요소와 보충 / 연쇄상 구균 (50 IU / ml의 페니실린 및 / ml의 스트렙토 마이신 50 μg의). </li><li> 치료 PBW + 미디어의 각 농도의 삼투압을 조절, RO 물을 추가하고 측정 삼투압을 이용하여 290-310 mOSM / ㎏에 PBW + 미디어와 RO + 미디어의 CuO-순이익은 처리. </li><li> 사용하여 각 솔루션을 필터4 ℃에서 0.22 ㎛의 진공 필터 유닛, 및 저장. 주 : 미처리 PBW + 미디어 농도 56 %, 44 %로, 29 % 및 16.5 %, CuO 등-NP-와 5 %의 범위 내의 최종 미디어 농도가 달라, 삼투압을 조절하기 위해 사용 RO 물의 양에 약간의 차이로 인해 53 %, 45 %, 30 % 및 17 %에서 + PBW 미디어 농도를 처리 하였다. </li></ol> 6. 세포 생존 참고 : 신장과 간 중금속 독성의 표적 기관임을 감안할는 배양 된 인간 배아 신장 (HEK293) 세포 (HEK)과 인간의 간세포 암 (인 HepG2) 세포 (HEP) 시험 방법 24 ~ 26를 사용합니다. <ol><li> 2-3일 제조업체의 지침에 따라 실험에 사용 된 96 웰 플레이트 도금 전에 HEK 및 HEP 세포의 문화를 준비합니다. </li><li> 3- [4,5- 디메틸 티아 졸 -2- 일] -2,5- 디 페닐 테트라 졸륨 브로마이드 (MTT) 분석을 이용하여 세포 생존율을 측정한다. 참고 : MTT 분석 프로토콜을 미는에서 수정rloo 외. (2011) 27. <ol><li> 분말 형태로 MTT를 얻습니다. 50 ㎎ / ㎖의 재고 농도를 만들기 위해 인산염 완충 식염수 (PBS)를 추가합니다. 2 시간 동안 교반하여 용액을 1.5 ml의 후 안전한 냉동고 튜브에 0.45 ㎛의 주사기 필터로 필터링 및 분취. 4 ° C에서 빛과 가게에서 튜브를 보호합니다. </li></ol></li><li> 5 분 1,000 XG에서 트립신, 원심 분리기를 사용하여 배양 접시에서 HEK 및 HEP 세포를 제거하고 트립신을 가만히 따르다. PBS 5 mL를 첨가하고 용액을 단일 세포를 얻기 위해 세포를 섞는다. 이어서, 용액의 밀리리터 당 세포 수를 얻었다 혈구에 단일 세포 용액 20 μL를 적용. 5 분 동안 1,000 XG에 다시 세포를 원심 분리기와 PBS가 세포를 헹구어 사용 가만히 따르다. 500 세포로 세포의 농도를 조정하는 EMEM-1X의 적당량을 추가 / 100 μL (100 μL / 웰). </li><li> 증발 제어하기 위해 200 μL PBS로 판의 경계 우물을 입력합니다. </li><li> 종자 세포500 세포의 밀도에서의 잘 (세포 도금되지 않음) 둘레 웰을 제외한 각각의 웰에 100 μL를 추가 /. 주 : HEK 및 HEP 세포 파종 밀도는 성장의 피크가 4-5 일 주위 발생할 수 있도록 실험 성장 곡선에 기초한다. 모든 세포주는 파종 밀도를 추정하기 위해 성장 곡선을 준비한다. </li><li> 그들 세포 밀도의 기준 MTT 판독을 수행하기 전에 (판 형태 꽉 유착)를 복구 할 수 있도록 37 ℃에서 24 시간 동안 세포를 품어. </li><li> (경계 포함하지 않음) 첫 번째 열에서 시딩 배지를 제거하고, 1 시간 동안 웰에 MTT 100 ㎕ (배지에서 5 ㎎ / ㎖)을 첨가하여 세포 밀도의 MTT 기준선 판독을 수행한다. </li><li> 1 시간 후, MTT를 분리하고 생존 세포 (20 분)에 의해 생산 된 MTT-포르 마잔을 용해 디메틸 설폭 사이드 (DMSO) 100 ㎕를 추가한다. </li><li> 베이스를 얻었다 570 nm 인 흡수 파장에서 첫 번째 열의 광학 밀도 (OD)를 읽라인 읽기. <ol><li> 모든 플레이트가 제대로 시드와 세포가 판 사이 지속적으로 성장하고 있음을했다 확인하기 위해 기본 측정 값을 사용합니다. 열에서 DMSO를 제거 다음 24 시간 동안 배양하기 전에 테스트되고. 주 : DMSO가 플레이트에 밤새 방치하면 그것은 매체 볼륨의 감소를 일으키는 인접 열로부터 수분을 당긴다. </li></ol></li><li> 테스트 솔루션을 따뜻하게 (즉, EMEM-1X, RO, 치료 PBW과의 CuO-NP 처리 된 PBW 미디어 솔루션) 수욕에서 37 ° C까지. </li><li> 및 EMEM-1X, RO + 미디어, 치료 PBW + 미디어 농도 또는 CuO를-순이익 100 ㎕로 대체 (경계 또는베이스 라인 읽기에 사용 된 첫 번째 열 제외) 판의 나머지 부분에서 시드 용지를 제거 처리 된 PBW + 미디어 농도 (접시 당 하나의 솔루션). 칠일 (일 2-8)의 총 자신의 시험 농도 또는 제어 솔루션에서 세포를 품어. 참고 : 총이 10 판 : 1 EMEM-1X, 1 RO + 미디어, 각각의 치료 PBW + 미디어 농도의 1 (56 %, 44 %, 29 % 및 16.5 %)과 각각의 CuO-NP 처리 된 PBW + 미디어 농도의 한 판 (53 %, 45 % 셀 라인 당 실험 당 30 % 및 17 %). </li><li> 기준 MTT 읽기 다음 매일은, 각각의 플레이트의 다음 열에서 (6.11 아래에 노트에 나열된) 제어 및 테스트 솔루션을 제거합니다 (예 : 2 일 테스트 및 제어 미디어, 우물 BG 행 3에서 제거되고, 주 3 : 행 4 웰 BG 등) 및 상기 단계 6.7-6.9에 기재된 MTT 프로토콜을 반복한다. </li><li> 칠일의 프로토콜 매일 반복합니다. 각 행 (6 웰)에 대한 OD 결과를 평균 칠일 성장 곡선을 생성하기 위해 시간에 대하여보고 하였다. </li><li> 세포 생존 능력에 구리 킬레이트의 효과를 평가하기 PBW를 CuO를-NP를 처리 + 각 플레이트 용액을 첨가하기 전에 테스트 솔루션을 제어하는​​ D 페니 100 μM을 추가 및 제외 매체는, 상기와 동일한 절차를 따른다. 데이터 항문을 수행이 Analysis 과학 그래프 소프트웨어를 사용하여. </li></ol> 7. 지구 화학적 모델링 <ol><li> 다음 웹 사이트에서 비주얼 MINTEQ 버전 3.0 / 3.1 프리웨어 다운로드 <a href="http://www2.lwr.kth.se/English/Oursoftware/vminteq/">http://www2.lwr.kth.se/English/Oursoftware/vminteq/</a> . 참고 : 시각 MINTEQ 금속 분화, 용해도 평형, 자연수에 대한 흡착 등의 계산을위한 프리웨어 화학 평형 모델이다. 또한 그것은 이온 분화, 이온 활동, 이온 착체 및 소자 분리 (28)의 가능한 메커니즘을 조사하는 처리 (질량 분석 결과) 전후 원소의 농도와 비교된다 포화 인덱스를 예측하는데 사용된다. </li><li> 프로그램 및 입력 산도, 알칼리도 및 프로그램에 다른 원소의 농도를 포함한 4 단계에서 질량 분석 데이터를 연다. 참고 : 지하수가 현장 urani에있는 동안 산화되는 것을 감안할 때UM 추출 처리는, 입력 비소, 바나듐, 및 우라늄의 산화 종을 사용한다. </li></ol> 8. 억제 농도 50 (IC 50) <ol><li> 처음 세 개의 별도의 실행의 5 일에 생존 (외경 평균) 평균하여 치료와의 CuO-NP 처리 된 PBW + 미디어 농도의 IC (50)을 계산합니다. </li><li> EMEM-1X의 5 일째 생존 평균의 치료와의 CuO-NP 처리 된 PBW + 미디어 농도 빼기 5 일째 생존의 평균은 생존 능력의 차이를 계산합니다. 그런 다음 EMEM에서 5 일의 평균 생존 능력에 의해 생존의 차이를 분할, 그리고 %의 억제를 얻을 수 (100)에 의해 곱합니다. </li><li> 각각의 치료와의 CuO-NP 처리 된 PBW + 미디어 농도 %의 생존 능력을 얻기 위해 100 (EMEM-1X 생존)에서 %의 억제를 뺍니다. </li><li> 하나의 농도와 100 %의 생존 능력에 EMEM-1X을 설정하여 과학적 그래프 소프트웨어에 입력; 로그에 모든 농도 변환규모 (X = 로그 (X)) 및 최소 자승법 분석과 비선형 회귀 분석을 수행합니다. </li></ol> 9. 데이터 분석 <ol><li> 두 개의 꼬리, 쌍, 학생 T-test로 치료와의 CuO-NP 처리 된 PBW의 요소 농도를 비교. </li><li> 칠일 동안 수집 성장 곡선 데이터를 이용하여 곡선 (AUC) 아래의 면적을 계산하고 분산의 반복 측정 분석 (ANOVA)과 분산을 분석하고, 모든 그룹 간의 Tukey에의 사후 비교 하​​였다 (N = 3). </li><li> . 미처리의 CuO-NP 처리 + PBW (전술) 미디어 솔루션 모두 성장 곡선의 5 일째의 데이터를 사용하여 IC (50)를 계산 0.05 중요한 고려 &lt;P의 값. 주 : 통계 분석의 목적을 위해, 반 검출 한계 질량 분광법 값이 29 이하로 제한 이온 농도 레벨에 할당 하였다. </li></ol>

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Molecular, Clinical and Environmental Toxicology. 101, 133-164 (2012).</li><li>Meerloo, J., Kaspers, G., Cloos, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell+Sensitivity+Assays:+The+MTT+Assay.">Cell Sensitivity Assays: The MTT Assay.</a> Cancer Cell Culture. 731, 237-245 (2011).</li><li>Gustafsson, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Visual MINTEQ. , (2010).</li><li>Hallab, N., Caicedo, M., McAllister, K., Skipor, A., Amstutz, H., Jacobs, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Asymptomatic+prospective+and+retrospective+cohorts+with+metal-on-metal+hip+arthroplasty+indicate+acquired+lymphocyte+reactivity+varies+with+metal+ion+levels+on+a+group+basis.">Asymptomatic prospective and retrospective cohorts with metal-on-metal hip arthroplasty indicate acquired lymphocyte reactivity varies with metal ion levels on a group basis.</a> Journal of Orthopaedic Research. 31 (2), 173-182 (2013).</li><li>Goswami, A., Raul, P., Purkait, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arsenic+adsorption+using+copper+(II)+oxide+nanoparticles.">Arsenic adsorption using copper (II) oxide nanoparticles.</a> Chemical Engineering Research and Design. 90 (9), 1387-1396 (2011).</li><li>Pillewan, P., Mukherjee, S., Roychowdhury, T., Das, S., Bansiwal, A., Rayalu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Removal+of+As(III)+and+As(V)+from+water+by+copper+oxide+incorporated+mesoporous+alumina.">Removal of As(III) and As(V) from water by copper oxide incorporated mesoporous alumina.</a> Journal of Hazardous Materials. 186 (1), 367-375 (2011).</li><li>Kroll, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cytotoxicity+screening+of+23+engineered+nanomaterials+using+a+test+matrix+of+ten+cell+lines+and+three+different+assays.">Cytotoxicity screening of 23 engineered nanomaterials using a test matrix of ten cell lines and three different assays.</a> Particle and fibre toxicology. 8 (9), 1-19 (2011).</li><li>Fahmy, B., Cormier, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Copper+oxide+nanoparticles+induce+oxidative+stress+and+cytotoxicity+in+airway+epithelial+cells.">Copper oxide nanoparticles induce oxidative stress and cytotoxicity in airway epithelial cells.</a> Toxicology in vitro: an international journal published in association with BIBRA. 23 (7), 1365-1371 (2009).</li><li>Radike, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Distribution+and+accumulation+of+a+mixture+of+arsenic,+cadmium,+chromium,+nickel+and+vanadium+in+mouse+small+intestin,+kidney,+pancreas,+and+femur+following+oral+administration+in+water+or+feed.">Distribution and accumulation of a mixture of arsenic, cadmium, chromium, nickel and vanadium in mouse small intestin, kidney, pancreas, and femur following oral administration in water or feed.</a> Journal of Toxicology and Environmental Health, Part A. 65 (23), 2029-2052 (2002).</li><li>Barbier, O., Jacquillet, G., Tauc, M., Cougnon, M., Poujeol, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+heavy+metals+on,+and+handling+by,+the+kidney.">Effect of heavy metals on, and handling by, the kidney.</a> Nephron. Physiology. 99 (4), 105-110 (2005).</li><li>Zheng, X., Watts, G., Vaught, S., Gandolfi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Low-level+arsenite+induced+gene+expression+in+HEK293+cells.">Low-level arsenite induced gene expression in HEK293 cells.</a> Toxicology. 187 (1), 39-48 (2003).</li><li>Li, Z., Piao, F., Liu, S., Wang, Y., Qu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subchronic+exposure+to+arsenic+trioxide-induced+oxidative+DNA+damage+in+kidney+tissue+of+mice.">Subchronic exposure to arsenic trioxide-induced oxidative DNA damage in kidney tissue of mice.</a> Experimental and Toxicologic Pathology. 62 (5), 543-547 (2010).</li><li>Farombi, E., Akintunde, J., Nzute, N., Adedara, I., Arojojoye, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Municipal+landfill+leachate+induces+hepatotoxicity+and+oxidative+stress+in+rats.">Municipal landfill leachate induces hepatotoxicity and oxidative stress in rats.</a> Toxicology and Industrial Health. 28 (6), 532-541 (2011).</li><li>Das, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Arsenic+exposure+through+drinking+water+increases+the+risk+of+liver+and+cardiovascular+diseases+in+the+population+of+West+Bengal.">Arsenic exposure through drinking water increases the risk of liver and cardiovascular diseases in the population of West Bengal.</a> India. BMC public health. 12 (1), 639-648 (2012).</li><li>Valko, M., Morris, H., Cronin, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Metals,+toxicity+and+oxidative+stress.">Metals, toxicity and oxidative stress.</a> Current Medicinal Chemistry. 12 (10), 1161-1208 (2005).</li><li>Horie, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Protein+Adsorption+of+Ultrafine+Metal+Oxide+and+Its+Influence+on+Cytotoxicity+toward+Cultured+Cells.">Protein Adsorption of Ultrafine Metal Oxide and Its Influence on Cytotoxicity toward Cultured Cells.</a> Chemical Research in Toxicology. 22 (3), 543-553 (2009).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

이전의 연구의 CuO-NPS에서 지하수 11,13,30,31에서 비소를 제거 보도했다. 본 연구는 이러한 이전의 연구 결과를 지원하며 CuO를 - 국민 연금 PBW에서 추가 오염 물질을 제거하는 것이보고합니다. 이 연구는 또한의 CuO-NP에 다른 오염 물질과 잠재적 경쟁 이온 (11)의 존재에도 불구하고, 비소 제거에 효과적이라는 이전의 보고서를 확인합니다. 분화 모델링의 CuO-NP에에 흡착을 허용, PBW에서...

약 US 전기 공급의 20 %가 에너지 자립을 높이기 위해 전국 인센티브에 부분적으로 기초하여 핵 에너지가 제공되고, US 원자력 용량이 1 증가 할 것으로 예상된다. 핵 에너지의 세계적인 성장은 미국이 외부에 발생하는 성장의 많은으로 계속 될 것으로 예상된다. 2013 년으로, 미국 우라늄의 83 %를 수입했지만, 준비금의 952,544 톤은 미국 3,4에 존재합니다. 2013 년 7 새로운 시설 응용 프로그램 및 와이오밍, 뉴 멕시코, 네브라스카 5 ~ 14 재시작 / 확장 응용 프로그램이 있었다. 미국에서는 우라늄은 주로 현장 복구 (ISR) (6) 처리에 통해 추출된다. ISR은 적은 토지 지장을하고 환경 오염 물질 (7)을 해제 할 수 있습니다 미행 더미를 만드는 방지 할 수 있습니다. ISR는 우라늄 통해 침출수로부터 추출 된 후 지하 광석 본체로부터 우라늄 침출 수계 산화제 용액을 사용하여이온 교환 과정 (8). 광석 본체 네거티브 물 균형을 유지하기 위해, 침출수의 일부라는 생산 물 (PBW)를 출혈 빠졌을. PBW의 일부가 역삼 투 (RO)과 사용 정화된다 마이닝 프로세스에 재 도입하지만 독성 오염물이 허용되는 표면 상태를 관리 기관에 의해 결정된 레벨로 감소 될 수 있다면 PBW 또한 유익한 산업용 또는 농업 용도를 가질 수있다 지하수 9. 현재, 대부분의 ISR 우라늄 시설 PBW에서 오염 물질을 제거하는 RO를 사용합니다. 그러나, RO 처리는 에너지 집약적이며, 규제 처분을 필요로 유독성 폐기물에 소금물을 생산하고 있습니다. 많은 물 제염 방법은 흡착제, 막, 및 이온 교환을 포함하여 존재한다. 이들 중, 흡착 가장 흔히 사용되며, 합성 된 나노 입자의 최근 발전은 흡착 계 물 제염의 기능 (10)을 처리를 개선하고있다. 구리 OXI이전 광범위 우라늄 ISR PBW에 조사되지 않았던 데 나노 입자 (CuO를-NP에), 지하수의 오염 물질 제거에 대한 최근 연구에서의 CuO-된 NP는 전후 수처리 단계를 필요로하지 않는 포함한 독특한 특성을, (이 밝혀졌다 예를 들어, pH와 산화 환원 전위)을 조정하고 다른 pH 값, 염분 농도, 또는 경쟁 이온) (11), 예 (다른 물 조성물에 실적. 또한, CuO를-NP에 쉽게 재생의 CuO-NP에 재사용 할 수있는 후 수산화 나트륨 (NaOH)으로 침출에 의해 재생된다. 자연수에서의 CuO-NP 미량 금속 필터링 기능의 세부 사항은 이전에 11 ~ 14을 발표했다. 수처리에 유용하지만, 금속 산화물 나노 입자는 살아있는 유기체에 독성이있을 수 있지만, 독성의 정도는 나노 입자의 특성과 성분 10,15,16에 부분적으로 의존한다. 따라서 simult을 연구하는 것이 중요하다필드 애플리케이션 전에 aneous 오염 물질 제거 및 나노 입자 독성. 현재의 연구는 (비소, 셀레늄, 바나듐 및 우라늄 포함) PBW 우선 오염물을 제거의 CuO-NP에의 능력을 결정하고, 세포 독성에 PBW의 CuO-NP 치료의 효과를 평가 하였다. PBW 활성 ISR 우라늄 시설에서 수거하고, 우선 순위에 오염물 제거의 CuO-NP 치료의 효능을 결정하기 위해 이용 하였다. 의 CuO-NP 치료 전후 PBW 세포 독성도 평가 하였다. PBW는 환경 관련 혼합물을 포함하는 혼합물의 독성 연구에 중점을 배치하는 유해 물질 및 질병 레지스트리 (ASTDR)에 대한 복잡한 지질 학적 (환경 / 산업) 혼합물 모두 환경 보건 과학 (NIEHS)의 국립 연구소 및 기관입니다 그들이 자연 또는 산업 환경뿐만 아니라 시험 관내 시험에서 촉진 존재하는 추가 생체 내 실험을위한 화학 물질의 우선 순위17-19. 저용량 혼합물 만성 노출은 적어도 대부분의 실험 연구의 짧은 기간 내에 명백한 효과를 생산하지 만성 때문에, 저용량 혼합물 노광들의 연구에 도전한다. 유사하게, 화학 혼합물의 시험 관내 연구에서 대부분은 2 이상의 금속 (20, 21)의 정의 연구소에서 만든 혼합물에 셀을 노출. 이러한 연구는 기준 정보를 제공하지만, 단순화 된 혼합물은 혼합물의 성분들의 전체 범위가 존재하는 고유의 환경 샘플에서 발생할 수있는 복잡한 길항제와 상승 작용을 복제하지 않는다. 본 연구의 목표는 PBW에 대한 대체 오염물 제거 공정을 검사 및 배양 된 세포를 사용하여 세포 독성에 PBW (CuO를-NP)의 치료 효과를 평가했다. 결과는 오염 제거를 위해보다 효율적으로 또는 환경 친화적 인 방법의 개발을 통해 우라늄 산업 유익 할 수있다. 이 연구는 제공첫 번째 증거의 CuO-NPS에서 PBW의 우선 순위 오염 물질의 감소는 포유 동물 세포 (22)에 세포 독성을 줄일 수 있습니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="892">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:243px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:315px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">CuCl2</td>
			<td style="width:243px;">Sigma</td>
			<td align="right" style="width:119px;">203149</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Borosilicate glass balls</td>
			<td style="width:243px;">VWR</td>
			<td>26396-639</td>
			<td>6 mm</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Nitric Acid</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td>A509-P500</td>
			<td>Trace metal grade</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.45 mm syringe filter</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">SLHA 033S S</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">10X EMEM</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">BW12-684F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Fetal Bovine Serum</td>
			<td style="width:243px;">ATCC</td>
			<td>30-2020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">L-glutamine</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">BP379-100</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NaHCO3</td>
			<td style="width:243px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">S5761</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Penicillin/Streptomycin</td>
			<td style="width:243px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">30-2300</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">0.22 mm vacuum filter unit</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">09-740-28C</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">HEK293</td>
			<td style="width:243px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">CRL-1573</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">HEPG2</td>
			<td style="width:243px;">ATCC</td>
			<td style="width:119px;">HB-8065</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Trypsin</td>
			<td style="width:243px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">SV3003101</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">MTT</td>
			<td style="width:243px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">M2128</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">D-penicillamine</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">ICN15180680</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">96-well plates</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">07-200-92</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">DMSO</td>
			<td style="width:243px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">D12814</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Spectra Max 190</td>
			<td style="width:243px;">Molecular Devices</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Visual MINTEQ version 3.0</td>
			<td style="width:243px;">KTH Royal Institute of Technology</td>
			<td></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">ICP-MS&#160;</td>
			<td style="width:243px;">Agilent</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Details of instruments, models and detection limits were published in Reddy et al., 2013.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">IC DIONEX DX 500</td>
			<td style="width:243px;">Dionex</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Details of instruments, models and detection limits were published in Reddy et al., 2013.&#160;</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">VWR Incubator</td>
			<td style="width:243px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

removal of trace elements by cupric oxide nanoparticles from uranium in situ recovery bleed water and its effect on cell viability

현장 복구에 (ISR)는 미국에서 우라늄 추출의 주된 방법이다. ISR 동안 우라늄 광석 본체로부터 침출 및 이온 교환을 통해 추출 하였다. 결과 생산 블리드 물 (PBW)은 비소 및 기타 중금속과 같은 오염 물질이 포함되어 있습니다. 활성 ISR 우라늄 PBW 시설에서의 시료는 구리 산화물 나노 입자 (NP에의 CuO-)으로 처리 하였다. 비소, 셀레늄, 우라늄, 바나듐을 포함 PBW 감소 우선 순위 오염 물질의 CuO를-NP 처리. 미처리의 CuO-NP는 PBW는 MTT (3- (4,5- 디메틸 티아 졸 -2- 일) -2,5- 디 페닐 테트라 졸륨 브로마이드)에 의해 결정 하였다 세포 성장과 생존 미디어 변화 액체 성분으로서 사용 하였다 처리 분석법 인간 배아 신장 (HEK 293)과 인간의 간세포 암 (간염의 G2) 세포에서. NP-CuO를 치료 및 개선 HEP HEK 세포 생존율과 연관이 있었다. 이 방법의 제한은 성장 미디어 구성 요소에 의해 osmol 동안 PBW의 희석을 포함품 질 조정뿐만 아니라 필요한 pH 조정. 이 방법은 희석에 의한 효과와 그러나 전통적 약산성이다 PBW의 pH 변화에 그 넓은 문맥으로 제한된다; 이 방법은 중립 해역에서의 CuO-NP 치료를 평가하는 폭 넓은 사용을 가질 수있다.

치료와의 CuO-NP 처리 된 PBW에 PBW 구성 요소의 농도와 pH를 표 1에보고됩니다. 마틴과 레디 (2009)의 CuO-NP의 영전 점은 9.4 ± 0.4로 추정되는 것을보고했다. 이러한 조건에서, PBW의 pH가 7.2-7.4임을 감안할 때, 물은 나노 입자 표면이 양으로 음전하 종의 흡착을 가능하게 청구되어 일으키는의 CuO-NP에 양성자를 기부. 비소, 셀레늄, 우라늄 및 바나듐 (표 1)을 포함 PBW에서의 CuO-NP 처?...

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Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

Production bleed water (PBW) was treated with cupric oxide nanoparticles (CuO-NPs) and cellular toxicity was assessed in cultured human cells. The goal of this protocol was to integrate the native environmental sample into a cell culture format assessing the changes in toxicity due to CuO-NP treatment.

우라늄에서 구리 산화물 나노 입자에 의한 미량 원소의 제거<em&gt; 현장에서</em&gt; 복구 블리드 물과 세포 생존에 미치는 영향

In situ recovery (ISR) is the predominant method of uranium extraction in the United States. During ISR, uranium is leached from an ore body and extracted ...

removal-trace-elements-cupric-oxide-nanoparticles-from-uranium-situ

Research

JoVE Journal

Environment

Removal of Trace Elements by Cupric Oxide Nanoparticles from Uranium In Situ Recovery Bleed Water and Its Effect on Cell Viability

9.7K 조회수.  University of New Mexico. Production bleed water (PBW) was treated with cupric oxide nanoparticles (CuO-NPs) and cellular toxicity was assessed in cultured human cells. The goal of this protocol was to integrate the native environmental sample into a cell culture format assessing the changes in toxicity due to CuO-NP treatment.

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Laboratory Estimation of Net Trophic Transfer Efficiencies of PCB Congeners to Lake Trout (Salvelinus namaycush) from Its Prey

A technique for laboratory estimation of net trophic transfer efficiency (&#947;) of polychlorinated biphenyl (PCB) congeners to piscivorous fish from their prey is described herein. During a 135-day laboratory experiment, we fed bloater (Coregonus hoyi) that had been caught in Lake Michigan to lake trout (Salvelinus namaycush) kept in eight laboratory tanks. Bloater is a natural prey for lake trout. In four of the tanks, a relatively high flow rate was used to ensure relatively high activity by the lake trout, whereas a low flow rate was used in the other four tanks, allowing for low lake trout activity. On a tank-by-tank basis, the amount of food eaten by the lake trout on each day of the experiment was recorded. Each lake trout was weighed at the start and end of the experiment. Four to nine lake trout from each of the eight tanks were sacrificed at the start of the experiment, and all 10 lake trout remaining in each of the tanks were euthanized at the end of the experiment. We determined concentrations of 75 PCB congeners in the lake trout at the start of the experiment, in the lake trout at the end of the experiment, and in bloaters fed to the lake trout during the experiment. Based on these measurements, &#947; was calculated for each of 75 PCB congeners in each of the eight tanks. Mean &#947; was calculated for each of the 75 PCB congeners for both active and inactive lake trout. Because the experiment was replicated in eight tanks, the standard error about mean &#947; could be estimated. Results from this type of experiment are useful in risk assessment models to predict future risk to humans and wildlife eating contaminated fish under various scenarios of environmental contamination.

Laboratory Estimation of Net Trophic Transfer Efficiencies of PCB Congeners to Lake Trout Salvelinus namaycush from Its Prey

A technique for laboratory estimation of net trophic transfer efficiency of polychlorinated biphenyl (PCB) congeners to piscivorous fish from their prey is presented. To maximize applicability of the laboratory results to the field, the piscivorous fish should be fed prey fish that are typically eaten in the field.

호수 송어에 PCB의 동족체의 순 영양 전송 효율의 실험실 평가 (<em&gt; Salvelinus namaycush</em&gt;) 먹이에서

A technique for laboratory estimation of net trophic transfer efficiency (&#947;) of polychlorinated biphenyl (PCB) congeners to piscivorous fish from ...

연구

환경과학

Laboratory-determined Phosphorus Flux from Lake Sediments as a Measure of Internal Phosphorus Loading

Eutrophication is a water quality issue in lakes worldwide, and there is a critical need to identify and control nutrient sources. Internal phosphorus (P) loading from lake sediments can account for a substantial portion of the total P load in eutrophic, and some mesotrophic, lakes. Laboratory determination of P release rates from sediment cores is one approach for determining the role of internal P loading and guiding management decisions. Two principal alternatives to experimental determination of sediment P release exist for estimating internal load: in situ measurements of changes in hypolimnetic P over time and P mass balance. The experimental approach using laboratory-based sediment incubations to quantify internal P load is a direct method, making it a valuable tool for lake management and restoration.
Laboratory incubations of sediment cores can help determine the relative importance of internal vs. external P loads, as well as be used to answer a variety of lake management and research questions. We illustrate the use of sediment core incubations to assess the effectiveness of an aluminum sulfate (alum) treatment for reducing sediment P release. Other research questions that can be investigated using this approach include the effects of sediment resuspension and bioturbation on P release.
The approach also has limitations. Assumptions must be made with respect to: extrapolating results from sediment cores to the entire lake; deciding over what time periods to measure nutrient release; and addressing possible core tube artifacts. A comprehensive dissolved oxygen monitoring strategy to assess temporal and spatial redox status in the lake provides greater confidence in annual P loads estimated from sediment core incubations.

Lake eutrophication is a water quality issue worldwide, making the need to identify and control nutrient sources critical. Laboratory determination of phosphorus release rates from sediment cores is a valuable approach for determining the role of internal phosphorus loading and guiding management decisions.

호수 퇴적물에서 실험실 결정 인 플럭스 내부 인 로딩의 측정으로

Eutrophication is a water quality issue in lakes worldwide, and there is a critical need to identify and control nutrient sources. Internal phosphorus (P) ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. I. Collection of Virus Samples

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. The standardized sampling component of the method concentrates viruses that may be present in water by passage of a minimum specified volume of water through an electropositive cartridge filter. The minimum specified volumes for surface and finished/ground water are 300 L and 1,500 L, respectively. A major method limitation is the tendency for the filters to clog before meeting the sample volume requirement. Studies using two different, but equivalent, cartridge filter options showed that filter clogging was a problem with 10% of the samples with one of the filter types compared to 6% with the other filter type. Clogging tends to increase with turbidity, but cannot be predicted based on turbidity measurements only. From a cost standpoint one of the filter options is preferable over the other, but the water quality and experience with the water system to be sampled should be taken into consideration in making filter selections.

EPA Method 1615 uses an electropositive filter to concentrate enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. This manuscript describes the procedure for collecting samples for Method 1615 analyses.

엔테로 바이러스 및 문화 RT-qPCR에 의해 물에서 노로 바이러스의 발생의 EPA 방법 1615 측정. 바이러스 샘플의 I. 컬렉션

EPA Method 1615 was developed with a goal of providing a standard method for measuring enteroviruses and noroviruses in environmental and drinking waters. ...

EPA Method 1615. Measurement of Enterovirus and Norovirus Occurrence in Water by Culture and RT-qPCR. Part III. Virus Detection by RT-qPCR

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a standardized method for use in multiple analytical laboratories during monitoring period 3 of the Unregulated Contaminant Monitoring Rule. Herein we present the protocol for extraction of viral ribonucleic acid (RNA) from water sample concentrates and for quantitatively measuring enterovirus and norovirus concentrations using reverse transcription-quantitative PCR (RT-qPCR). Virus concentrations for the molecular assay are calculated in terms of genomic copies of viral RNA per liter based upon a standard curve. The method uses a number of quality controls to increase data quality and to reduce interlaboratory and intralaboratory variation. The method has been evaluated by examining virus recovery from ground and reagent grade waters seeded with poliovirus type 3 and murine norovirus as a surrogate for human noroviruses. Mean poliovirus recoveries were 20% in groundwaters and 44% in reagent grade water. Mean murine norovirus recoveries with the RT-qPCR assay were 30% in groundwaters and 4% in reagent grade water.

Here we present a procedure to quantify enterovirus and norovirus in environmental and drinking waters using reverse transcription-quantitative PCR. Mean virus recovery from groundwater with this standardized procedure from EPA Method 1615 was 20% for poliovirus and 30% for murine norovirus.

엔테로 바이러스 및 문화와 RT-qPCR에 의해 물에서 노로 바이러스의 발생의 EPA 방법 1615 측정. 파트 III. RT-qPCR에 의한 바이러스 검출

EPA Method 1615 measures enteroviruses and noroviruses present in environmental and drinking waters. This method was developed with the goal of having a ...

A CO2 Concentration Gradient Facility for Testing CO2 Enrichment and Soil Effects on Grassland Ecosystem Function

Continuing increases in atmospheric carbon dioxide concentrations (CA) mandate techniques for examining impacts on terrestrial ecosystems. Most experiments examine only two or a few levels of CA concentration and a single soil type, but if CA can be varied as a gradient from subambient to superambient concentrations on multiple soils, we can discern whether past ecosystem responses may continue linearly in the future and whether responses may vary across the landscape. The Lysimeter Carbon Dioxide Gradient Facility applies a 250 to 500 &#181;l L-1 CA gradient to Blackland prairie plant communities established on lysimeters containing clay, silty clay, and sandy soils. The gradient is created as photosynthesis by vegetation enclosed in in temperature-controlled chambers progressively depletes carbon dioxide from air flowing directionally through the chambers. Maintaining proper air flow rate, adequate photosynthetic capacity, and temperature control are critical to overcome the main limitations of the system, which are declining photosynthetic rates and increased water stress during summer. The facility is an economical alternative to other techniques of CA enrichment, successfully discerns the shape of ecosystem responses to subambient to superambient CA enrichment, and can be adapted to test for interactions of carbon dioxide with other greenhouse gases such as methane or ozone.

A CO2 Concentration Gradient Facility for Testing CO2 Enrichment and Soil Effects on Grassland Ecosystem Function

The Lysimeter Carbon Dioxide Gradient Facility creates a 250 to 500 &#181;l L-1 linear carbon dioxide gradient in temperature-controlled chambers housing grassland plant communities on clay, silty clay, and sandy soil monoliths. The facility is used to determine how past and future carbon dioxide levels affect grassland carbon cycling.

CO<sub&gt; 2</sub테스트 주식에 대한&gt; 농도 구배 시설<sub&gt; 2</sub초원 생태계 기능에&gt; 농축 및 토양 효과

Continuing increases in atmospheric carbon dioxide concentrations (CA) mandate techniques for examining impacts on terrestrial ecosystems. Most ...

Evaluating the Effect of Environmental Chemicals on Honey Bee Development from the Individual to Colony Level

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be brought back to the beehive after the bees have foraged on flowers that have been sprayed with pesticides. Pesticide contaminated food can be exchanged between workers which then feed larvae and therefore can potentially affect the development of honey bees. Thus, residual pesticides in the environment can become a chronic damaging factor to honey bee populations and gradually lead to colony collapse. In the presented protocol, honey bee feeding methods are described and applied to either an individual honey bee or to a colony. Here, the insect growth regulator (IGR) pyriproxyfen (PPN), which is widely used to control pest insects and is harmful to the development of honey bee larvae and pupae, is used as the pesticide. The presenting procedure can be applied to other potentially harmful chemicals or honeybee pathogens for further studies.

Herein we present a method to feed pesticide contaminated food to both an individual honey bee and a beehive colony. The procedure evaluates the pesticide effect on individual honey bees by in vivo feeding of basic larval diet and also on the natural condition of beehive colony.

식민지 수준에 개인에서 꿀 꿀벌 개발에 대한 환경 화학 물질의 효과를 평가

The presence of pesticides in the beekeeping environment is one of the most serious problems that impacts the life of a honey bee. Pesticides can be ...

Determination of Inorganic Arsenic in a Wide Range of Food Matrices using Hydride Generation - Atomic Absorption Spectrometry.

The European Food Safety Authority (EFSA) underlined in its Scientific Opinion on Arsenic in Food that in order to support a sound exposure assessment to inorganic arsenic through diet, information about distribution of arsenic species in various food types must be generated. A method, previously validated in a collaborative trial, has been applied to determine inorganic arsenic in a wide variety of food matrices, covering grains, mushrooms and food of marine origin (31 samples in total). The method is based on detection by flow injection-hydride generation-atomic absorption spectrometry of the iAs selectively extracted into chloroform after digestion of the proteins with concentrated HCl. The method is characterized by a limit of quantification of 10 &#181;g/kg dry weight, which allowed quantification of inorganic arsenic in a large amount of food matrices. Information is provided about performance scores given to results obtained with this method and which were reported by different laboratories in several proficiency tests. The percentage of satisfactory results obtained with the discussed method is higher than that of the results obtained with other analytical approaches.

The usefulness of an analytical method to determine inorganic arsenic in a wide range of food matrices is demonstrated. The method consists of selective extraction of inorganic arsenic into chloroform with a final determination by hydride generation-atomic absorption spectrometry.

The European Food Safety Authority (EFSA) underlined in its Scientific Opinion on Arsenic in Food that in order to support a sound exposure assessment to ...

Experimental Column Setup for Studying Anaerobic Biogeochemical Interactions Between Iron (Oxy)Hydroxides, Trace Elements, and Bacteria

Fate and speciation of trace elements (TEs), such as arsenic (As) and mercury (Hg), in aquifers are closely related to physio-chemical conditions, such as redox potential (Eh) and pH, but also to microbial activities that can play a direct or indirect role on speciation and/or mobility. Indeed, some bacteria can directly oxidize As(III) to As(V) or reduce As(V) to As(III). Likewise, bacteria are strongly involved in Hg cycling, either through its methylation, forming the neurotoxin monomethyl mercury, or through its reduction to elemental Hg&#176;. The fates of both As and Hg are also strongly linked to soil or aquifer composition; indeed, As and Hg can bind to organic compounds or (oxy)hydroxides, which will influence their mobility. In turn, bacterial activities such as iron (oxy)hydroxide reduction or organic matter mineralization can indirectly influence As and Hg sequestration. The presence of sulfate/sulfide can also strongly impact these particular elements through the formation of complexes such as thio-arsenates with As or metacinnabar with Hg.
Consequently, many important questions have been raised on the fate and speciation of As and Hg in the environment and how to limit their toxicity. However, due to their reactivity towards aquifer components, it is difficult to clearly dissociate the biogeochemical processes that occur and their different impacts on the fate of these TE.
To do so, we developed an original, experimental, column setup that mimics an aquifer with As- or Hg-iron-oxide rich areas versus iron depleted areas, enabling a better understanding of TE biogeochemistry in anoxic conditions. The following protocol gives step by step instructions for the column set-up either for As or Hg, as well as an example with As under iron and sulfate reducing conditions.

Experimental Column Setup for Studying Anaerobic Biogeochemical Interactions Between Iron OxyHydroxides, Trace Elements, and Bacteria

Fate and speciation of arsenic and mercury in aquifers are closely related to physio-chemical conditions and microbial activity. Here, we present an original experimental column setup that mimics an aquifer and enables a better understanding of trace element biogeochemistry in anoxic conditions. Two examples are presented, combining geochemical and microbiological approaches.

(옥 시) 철 수 산화물, 성분, 및 박테리아 혐 기성 생물 지구 화학적 상호 작용을 공부에 대 한 실험 열 설정

Fate and speciation of trace elements (TEs), such as arsenic (As) and mercury (Hg), in aquifers are closely related to physio-chemical conditions, such as ...

Bioindication Testing of Stream Environment Suitability for Young Freshwater Pearl Mussels Using In Situ Exposure Methods

Knowledge of habitat suitability for freshwater mussels is an important step in the conservation of this endangered species group. We describe a protocol for performing in situ juvenile exposure tests within oligotrophic river catchments over one-month and three-month periods. Two methods (in both modifications) are presented to evaluate the juvenile growth and survival rate. The methods and modifications differ in value for the locality bioindication and each has its benefits as well as limitations. The sandy cage method works with a large set of individuals, but only some of the individuals are measured and the results are evaluated in bulk. In the mesh cage method, the individuals are kept and measured separately, but a low individual number is evaluated. The open water exposure modification is relatively easy to apply; it shows the juvenile growth potential of sites and can also be effective for water toxicity testing. The within-bed exposure modification needs a high workload but is closer to the conditions of a natural juvenile environment and it is better for reporting the real suitability of localities. On the other hand, more replications are needed in this modification due to its high-hyporheic environment variability.

Bioindication Testing of Stream Environment Suitability for Young Freshwater Pearl Mussels Using In Situ Exposure Methods

In situ bioindications enable determination of the suitability of an environment for endangered mussel species. We describe two methods based on the juvenile exposure of freshwater pearl mussels in cages to oligotrophic river habitats. Both methods are implemented in variants for open water and hyporheic water environments.

Bioindication 영 민물 진주 홍합에 현장 노출 방법을 사용 하 여에 대 한 스트림 환경 적합성의 테스트

Knowledge of habitat suitability for freshwater mussels is an important step in the conservation of this endangered species group. We describe a protocol ...

Assessing the Particulate Matter Removal Abilities of Tree Leaves

Based on the conventional cleaning methods (water cleaning (WC) + brush cleaning (BC)), this study evaluated the influence of ultrasonic cleaning (UC) on collecting various sized particulate matter (PM) retained on leaf surfaces. We further characterized the retention efficiency of leaves to various sized PM, which will help to assess the abilities of urban trees to remove PM from ambient air quantitatively. 
Taking three broadleaf tree species (Ginkgo biloba, Sophora japonica, and Salix babylonica) and two needleleaf tree species (Pinus tabuliformis and Sabina chinensis) as the research objects, leaf samples were collected 4 days (short PM retention period) and 14 days (long PM retention period) after the latest rainfall. PM retained on the leaf surfaces was collected by means of WC, BC, and UC in sequence. Then, retention efficiencies of leaves (AEleaf) to three types of the various sized PM, including easily removable PM (ERP), difficult-to-remove PM (DRP), and totally removable PM (TRP), were calculated. Only around 23%-45% of the total PM retained on leaves could be cleaned off and collected by WC. When the leaves were cleaned through WC+BC, the underestimation of the PM retention capacity of different tree species was in the range of 29%-46% for various sized PM. Almost all PM retained on leaves could be removed if UC was supplemented to WC+BC. 
In conclusion, if the UC was complemented after the conventional cleaning methods, more PM on leaf surfaces could be eluted and collected. The procedure developed in this study can be used for assessing the PM removal abilities of different tree species.

The ultrasonic cleaning method was applied to elute the particulate matter (PM) retained on leaf surfaces after PM was eluted by the conventional cleaning methods (water cleaning only or water cleaning plus brush cleaning). The methodology can help to improve the estimation accuracy for PM retention capacity of leaves.

단풍 나무의 미 립 자 물질 제거 능력 평가

Based on the conventional cleaning methods (water cleaning (WC) + brush cleaning (BC)), this study evaluated the influence of ultrasonic cleaning (UC) on ...