이 연구는 한국의 보건 복지부, 공화국 (: H14C04660000 허가 번호)에 의해 투자 한국 보건 산업 진흥원을 통해 한국 의료 기술 R &amp; D 프로젝트의 기금에 의해 지원되었다.

모든 동물 실험 (1978 개정, NIH 간행물 번호 8023) 실험 동물의 관리 및 사용을위한 건강 가이드의 국립 연구소에 따라 수행과의 기관 동물 관리 및 사용위원회의 동물 관리 및 사용위원회와 함께했다 KIST (서울, 한국). 1. 동물 준비 <ol><li> 7 주령의 수컷 ICR 마우스 (또는 C57BL / 6) 군을 준비한다. </li><li> 쥐가 항상성을 복원 전송 ~ 7 일 동안 적응 과정을 통해 가자. 일반적으로, 각 장에 4-5 마우스 그룹을 올려 놓고 12/12 시간의 명 / 암주기, 22 ~ 23 ° C에서 40 % 습도에서 그들을 유지한다. 물과 음식 광고 무제한을 제공합니다. 순응 과정이 새로운 주택, 음식, 물 운송 및 적응의 스트레스에서 회복을 허용하는 것이 중요합니다, 새로운 케이지 빛 사이클뿐만 아니라 냄새 :합니다. 이 실험에서, 마우스는 SPE에있는 개별 환기 케이지 (IVCs)에 수납 된cific 병원체 무료 (SPF) -grade 시설 </li><li> 각 마우스의 무게를 측정하고, 그 중량 평균에서 ± 10 %를 벗어나는 주제를 제외 할 수 있습니다. </li><li> 두 그룹으로 주제를 나누어 : 차량 주입 그룹 (Aβ를 (-))와 Aβ 주입 그룹 (Aβ (+)). 실험은 특정 약물 후보의 효능을 테스트하는 경우, 네 개의 그룹으로 마우스를 분할 (1) Aβ (-) / 약물 (-), (2) Aβ (-) / 약물 (+), (3) Aβ (+) / 약물 (-), (4) Aβ (+) / 약물 (+). </li></ol> 2. Aβ 펩타이드의 제조 <ol><li> 미리 냉각 된 1,1,1,3,3,3- 헥사 플루오로 -2- 프로판올 (HFIP) 상관 응집체를 용해 6 균질 한 펩티드를 확인하여, 화학적 합성을 통해 5 또는 상업적 출처로부터 유도되는 Aβ 펩티드 치료 . <ol><li> (RT시) 5 분간 부드럽게 선회하는 물 - 욕조 초음파 처리기에서 Aβ / HFIP 용액을 초음파 처리하고 RT에서 30 분 동안 용액을 배양한다. 완전히 질소와 증발을 통해 HFIP를 제거그리고 사용할 때까지 -80 ° C에서 균일 한 Aβ를 저장합니다. </li></ol></li><li> Aβ 단량체를 준비 (. 100 μM Aβ, 10 % DMSO, 90 % PBS) 1 mM의 Aβ의 디메틸 설폭 사이드 (DMSO) 주식을하고 희석 10 배 인산염 완충 식염수 (PBS)를의 </li><li> Aβ 올리고머를 준비합니다. <ol><li> 각각 3 ~ 7 일 동안 37 ° C에서 (단계 2.2). (Aβ (1-42) 또는 Aβ (1-40)를 포함)가 Aβ의 모노머 용액을 인큐베이션. </li><li> 인큐베이션 기간 동안 수분 증발을 방지하기 위해 습한 환경을 제공하기 위해 젖은 종이 타월을 함유하는 지퍼백에 밀봉 된 튜브에서 Aβ 용액을 놓는다. </li></ol></li><li> 변성 단백질 (6)의 광 - 유도 된 가교 나트륨 도데 실 설페이트 - 폴리 아크릴 아미드 겔 전기 영동 (SDS-PAGE)에 의해 제조 Aβ 올리고머를 확인한다. </li><li> 차량 ICV 주사 10 % DMSO를 함유하는 제어 PBS 용액을 준비한다. </li></ol> 3. 주사기 준비 </p&gt; <ol><li> ICV 주입을위한 26 G 스테인레스 스틸 바늘와 마이크로 실린를 준비합니다. </li><li> 수술에 사용되는 다른 모든 장치와 오토 클레이브 멸균 주사기. 오토 클레이브 후, 20 분 동안 자외선 아래에 장치를 배치합니다. </li><li> 뇌 (그림 1A)에 주입의 깊이에서 최대 정확도를 사용하려면 3.8 mm로 길이를 조정하는 파라 필름과 마이크로 실린의 바늘을 감싸. (B6 마우스의 경우, 3.6 mm에 주사기 바늘을 조정). 참고 : 파라 필름의 압축 3.6 mm의 복부를 초과 주입의 깊이로 이어질 것입니다. 바늘 삽입시 압축되는 것을 파라 필름을 방지하기 위해, 밀도가 바늘을 여러 번 포장. </li><li> 회, 70 % 에탄올로 주사기의 내부 공간을 세척한다. </li><li> RT에서 30 분 동안 물 욕조 초음파 처리기에서 주사기와 바늘을 초음파 처리. </li><li> 회, 70 % 에탄올로 주사기의 내부 공간을 세척한다. </li><li> 주사기를 씻어증류수와 이상 30 분 흄 후드에서 완전히 건조와. Aβ 주입을 시작하기 전에 20 분 동안 자외선 아래에서 깨끗한 주사기를 남겨주세요. </li></ol> 4. Aβ 주입 마우스 모델 준비 참고 : 무균 상태를 유지하고 70 % 에탄올 및 자외선 노출을 사용하여 ICV 분사에 대한 모든 수술기구를 소독하는 소독제로 운영 필드를 청소합니다. <ol><li> 자일 라진 (20 ㎎ / ㎏) 및 tiletamine의 혼합물을 복강 내 주사하여 마우스를 마취 · 염산 / zolazepam · ICV 주사 전에 염산 하였다 (80 mg / kg). 마취하면서 체온을 유지하고 발 핀치 반응을 평가하여 적절한 마취를 확인하기 위해 따뜻한 매트에 마우스를 놓습니다. </li><li> 적용 멸균 PBS는 절차 (그림 1B) 동안 각막 건조를 방지하기 위해 두 눈에 떨어진다. </li><li> difficu의 경우에는 그 표면에 여러 개의 직선 수직선을 그려 두 개의 거울을 준비합니다lty 수직 주사기 주입. </li><li> 바로 옆에 마우스의 몸과 다른 (M2)에 머리의 앞에 하나의 거울 (M1)를 놓습니다. 마우스의 두 눈 사이의 가상의 중심선에 평행 한 M1로 유지하고 두 개의면이 90 ° (도 1C)을 형성하도록, M1 M2에 수직 정렬. 연구자가 오른 손잡이 인 경우 마우스의 왼쪽에 M1을 놓습니다. 연구자가 왼손잡이 경우 마우스의 오른쪽에 M1을 놓습니다. </li><li> 마우스의 이마의 중앙에 70 % 에탄올 스프레이 건조 면봉으로 문질러. 때문에 알코올 증발 체온 저하 피하기 위해 이마의 영역이 너무 큰 적시 지 않는다. </li><li> 깨끗한 면봉을 사용하여 2 % 클로르헥시딘 용액으로 이마에 같은 부위를 닦아주십시오. 3 회의 총 알코올, 클로로 헥와 반복 scrubbings. 필요한 경우, possi을 최소화하기 위해 마우스의 이마에 모발을 면도 참고오염의 부 합성 </li><li> 브레 그마를 찾습니다. <ol><li> 엄지와 검지를 사용하여 긴밀 이마의 피부에 직접 누르고 두 눈이 돌출 정도에 위의 두 눈. 팽팽 이마를 만들어 피부 아래 두개골의 움직임을 최소화하기 위해 다시 피부를 드래그합니다. </li><li> 3 개의 꼭지점 할당하여 눈에 보이지 않는 삼각형을 형성 : 마우스의 두 눈과 포인트를 어디에 엄지와 검지 손가락 대회, 브레 그마. (도 1B, 빨간색 화살표 : 브레 그마) </li></ol></li><li> 브레 그마에 -1.0 ± 0.06 mm 후방, 깊이 시상 봉합에 측면 ± 0.1 mm 1.8, 2.4 mm (그림 1D, 푸른 별 : 주입 지점 각 반구에서) 측정 테이프로 주입 지점을 찾습니다. (B6 마우스의 경우 : -0.9 mm 후방, 깊이 1.7 mm 측면, 2.2 mm) </li><li> 우발적 인 공기 주입을 방지하기 위해 과량의 용액을 10 μL Aβ 용액 또는 비히클로 주사기를 채우기. </li><li> 일에 주사기를 놓습니다전자 주입 지점 (프로토콜 47에 기재되어 있음). 주입 지점의 평면에 수직 주사기를 만든다. 정렬은 고정 된 관점 (그림 1C)에서 미러에 그려진 선을 모두 거울에 주사기의 이미지를 반영합니다. </li><li> 파라 필름 포장이 피부에 도달 할 때까지 바늘을 삽입하기 시작한다. </li><li> 안정 손을 잡고 주사기를 유지하고 일시 정지하지 않고 천천히 5 초 동안, Aβ 용액 또는 차량의 5 μl를 주입하는 다른 손을 사용합니다. 주사기가 전반에 걸쳐 수직으로 유지해야합니다. 주입을 완료 한 후, 확산을 위해 주사기를 제거하기 전에 3 초 5를 기다립니다. </li><li> 원래 삼각형의 위치를​​ 가정하면, 불필요한 움직임에서 두개골을 보호하기 위해 적당한 압력을 발휘. 경사하지 않고 주사기를 제거합니다. </li><li> 복구를 위해 따뜻한 패드의 Aβ 주입 마우스를 놓고 그 흉골 드러 누움을 유지한다. 이 의식을 회복 할 때까지 무인 마우스를 두지 마십시오과 m을 반환하지 않습니다완전히 회복 될 때까지 비수술 마우스를 포함하는 케이지 여러개. </li><li> 단계 3.3-3.6에 따라 주사기를 씻으십시오. </li><li> 수술 후 마우스의 이동을 모니터링 5-7 일 동안 생쥐에 감염 또는 질병의 징후를 확인합니다. </li></ol><img alt="그림 1" src="/files/ftp_upload/53308/53308fig1.jpg" /> ICV 영역으로도 1 Aβ 주입 (A)를 변성 주사기 바늘에 비해 파라 필름 래핑 주사기 바늘.; (B) PBS 건조를 방지하기 위해 눈에 상품; 엄지, 검지 손가락으로 마우스의 이마에 형성된 삼각형, 마우스의 두 눈뿐만 아니라 각각의 눈에서 등거리 가상 중간 선; (C) 바늘 주사기의 주입으로 수직 도와 표면에 그려진 복수 수직선 두 거울 (M1 및 M2); (D) 분사 점 삼각형, 인도어ated으로 푸른 별 (브레 그마에서 -1.0 ± 0.06 mm와 sagittally 1.8 ± 0.1 mm) 마우스의 각 반구에; 녹색 화살표 : 파라 필름, 빨간색 화살표 : 브레 그마 <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/53308/53308fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭하십시오.</a> Y-미로와 뇌 분석하여 Aβ 주입 5. 확인 <ol><li> Y-미로 테스트 -3,7,8-을하여 Aβ 주입 마우스의 작업 메모리 평가 <ol><li> 메모리 적자의 발병에 대한 주입 후 3 일 기다립니다. </li><li> 3 개의 동일한 무기 흑색 플라스틱 미로를 사용하여 Y 미로 테스트를 수행하는 라벨 A, B, 및 C 각각의 미로의 중앙에서 120 °의 각도로되는 분기 OUT (너비 X 길이 x 높이의 10cm × 40 cm × 12 cm). </li><li> 시작 암 (암 A)에 마우스를 놓고 피사체가 자유롭게 8 분의 미로를 탐험 할 수 있습니다. </li><li> 각 아암에 엔트리 수를 측정하고 계산 altern각 과목 3,9의 ATION 속도. </li></ol></li><li> 직접 분사가 적절하게 ICV 영역을 대상 여부를 확인하기 위해 사후 뇌를 검사합니다. <ol><li> 4.1 절에 설명 된 것과 동일한 절차에 의해 마우스를 마취. 그리고 자궁 경부 전위로 마우스를 희생. </li><li> 마우스를 목을 벨 및 수술 가위를 사용하여 두개골을 노출 피부를 제거합니다. 두개골에서 조직과 근육을 제거합니다. </li><li> 뇌에 손상을주지 않고 (정수리와 interparietal 뼈 사이)에 lambdoid 봉합에 상처를 확인합니다. 후두 및 interparietal 뼈, 후 두정엽과 전두엽 뼈를 제거합니다. 집게를 사용하여 두개골 뼈를 제거하고 수막을 올려 두개골에서 뇌를 분리. </li><li> 냉장 멸균 식염수의 뇌를 세척하고 수술 칼 (그림 2)와 관상 방향으로 뇌의 ICV 영역을 잘라. </li><li> 온 니들 삽입의 추적에 기초하여 분사 영역을 확인뇌 조직 (그림 2). 니들 추적 심실 중 하나에 도달하면 확인합니다. 니들 트레이스가 충족 또는 심실을 통과하지 않는 경우의 실험 결과의 분석으로부터 그 대상의 데이터를 제외. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Kam, T. I., Gwon, Y., Jung, Y. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid+beta+receptors+responsible+for+neurotoxicity+and+cellular+defects+in+Alzheimer's+disease.">Amyloid beta receptors responsible for neurotoxicity and cellular defects in Alzheimer's disease.</a> Cell Mol Life Sci. 71, 4803-4813 (2014).</li><li>Elder, G. A., Gama Sosa, M. A., De Gasperi, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transgenic+mouse+models+of+Alzheimer's+disease.">Transgenic mouse models of Alzheimer's disease.</a> Mt Sinai J Med. 77, 69-81 (2010).</li><li>Bryan, K. J., Lee, H., Perry, G., Smith, M. A., Casadesus, G., Buccafusco, J. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Methods of Behavior Analysis in Neuroscience Frontiers in Neuroscience. , (2009).</li><li>Van Dam, D., De Deyn, P. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+in+the+drug+discovery+pipeline+for+Alzheimer's+disease.">Animal models in the drug discovery pipeline for Alzheimer's disease.</a> Br J Pharmacol. 164, 1285-1300 (2011).</li><li>Choi, J. W., Kim, H. Y., Jeon, M., Kim, D. J., Kim, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Efficient+access+to+highly+pure+beta-amyloid+peptide+by+optimized+solid-phase+synthesis.">Efficient access to highly pure beta-amyloid peptide by optimized solid-phase synthesis.</a> Amyloid. 19, 133-137 (2012).</li><li>Rahimi, F., Maiti, P., Bitan, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Photo-induced+cross-linking+of+unmodified+proteins+(PICUP)+applied+to+amyloidogenic+peptides.">Photo-induced cross-linking of unmodified proteins (PICUP) applied to amyloidogenic peptides.</a> J Vis Exp. , (2009).</li><li>Kim, H. V., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amelioration+of+Alzheimer's+disease+by+neuroprotective+effect+of+sulforaphane+in+animal+model.">Amelioration of Alzheimer's disease by neuroprotective effect of sulforaphane in animal model.</a> Amyloid. 20, 7-12 (2013).</li><li>Jackson, L. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VTE+on+an+elevated+T-maze.">VTE on an elevated T-maze.</a> J Comp Psychol. 36, 9 (1943).</li><li>Kim, H. Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Taurine+in+drinking+water+recovers+learning+and+memory+in+the+adult+APP/PS1+mouse+model+of+Alzheimer's+disease.">Taurine in drinking water recovers learning and memory in the adult APP/PS1 mouse model of Alzheimer's disease.</a> Sci Rep. 4, 7467 (2014).</li><li>Paxinos, G., Franklin, B. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The Mouse Brain in Stereotaxic Coordinates. 2nd edn. , (2001).</li><li>Ledo, J. H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Amyloid-beta+oligomers+link+depressive-like+behavior+and+cognitive+deficits+in+mice.">Amyloid-beta oligomers link depressive-like behavior and cognitive deficits in mice.</a> Mol Psychiatry. 18, 1053-1054 (2013).</li><li>Laursen, S. E., Belknap, J. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Intracerebroventricular+injections+in+mice.+Some+methodological+refinements.">Intracerebroventricular injections in mice. Some methodological refinements.</a> J Pharmacol Methods. 16, 355-357 (1986).</li><li>Bromley-Brits, K., Deng, Y., Song, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morris+water+maze+test+for+learning+and+memory+deficits+in+Alzheimer's+disease+model+mice.">Morris water maze test for learning and memory deficits in Alzheimer's disease model mice.</a> J Vis Exp. , (2011).</li><li>Figueiredo, C. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Memantine+rescues+transient+cognitive+impairment+caused+by+high-molecular-weight+abeta+oligomers+but+not+the+persistent+impairment+induced+by+low-molecular-weight+oligomers.">Memantine rescues transient cognitive impairment caused by high-molecular-weight abeta oligomers but not the persistent impairment induced by low-molecular-weight oligomers.</a> J Neurosci. 33, 9626-9634 (2013).</li><li>Haley, T. J., McCormick, W. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Pharmacological+effects+produced+by+intracerebral+injection+of+drugs+in+the+conscious+mouse.">Pharmacological effects produced by intracerebral injection of drugs in the conscious mouse.</a> Br J Pharmacol Chemother. 12, 12-15 (1957).</li><li>Harkany, T., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neuroprotective+approaches+in+experimental+models+of+beta-amyloid+neurotoxicity:+relevance+to+Alzheimer's+disease.">Neuroprotective approaches in experimental models of beta-amyloid neurotoxicity: relevance to Alzheimer's disease.</a> Prog Neuropsychopharmacol Biol Psychiatry. 23, 963-1008 (1999).</li><li>Wang, D., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+allosteric+potentiation+of+nicotinic+acetylcholine+receptors+by+galantamine+ameliorates+the+cognitive+dysfunction+in+beta+amyloid25-35+i.c.v.-injected+mice:+involvement+of+dopaminergic+systems.">The allosteric potentiation of nicotinic acetylcholine receptors by galantamine ameliorates the cognitive dysfunction in beta amyloid25-35 i.c.v.-injected mice: involvement of dopaminergic systems.</a> Neuropsychopharmacology. 32, 1261-1271 (2007).</li><li>Yamada, K., Nabeshima, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+Alzheimer's+disease+and+evaluation+of+anti-dementia+drugs.">Animal models of Alzheimer's disease and evaluation of anti-dementia drugs.</a> Pharmacol Ther. 88, 93-113 (2000).</li><li>Cho, S. M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Correlations+of+amyloid-beta+concentrations+between+CSF+and+plasma+in+acute+Alzheimer+mouse+model.">Correlations of amyloid-beta concentrations between CSF and plasma in acute Alzheimer mouse model.</a> Sci Rep. 4, 6777 (2014).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

이 프로토콜에서 가장 중요한 단계는 Aβ의 ICV 주입입니다. 이 프로토콜은 정위기구 (11, 12)없이 마우스의 ICV 영역으로 Aβ를 주입하도록 설계되었습니다. 실험을 시작하기 전에, 대신 Aβ의 파란색 염료와 연습 주사의 예비 기간은 충분한 손재주를 달성하기 위해 장소를해야한다. 즉시 주사 한 결과, 안료 분사가 적절하게 수행되었는지 여부를 확인할 필요가있다. 조심스럽게 뇌를 꺼내 해?...

알츠하이머 병 (AD)의 병리학 적 특징은 그 아밀로이드 β (Aβ)을 감안할 때, AD의 동물 모델의 개발은 Aβ의 신경 과발현에 초점을 맞추고있다. 아밀로이드 전구체 단백질 (APP) 또는 프레 (PS)의 돌연변이는 Aβ 평형 외란 궁극적 가족 성 AD (1)의 발병을 유도하기 때문에, APP 또는 PS 유전자 돌연변이를 포함하는 마우스 모델이 일반적으로 허용되고있다. 형질 전환 마우스의 넓은 범위 중, 원형 마우스 모델은 다음과 같습니다 : TG2576, PDAPP, APP / PS1과 APP23합니다. 뇌에서,이 마우스는 일반적으로 Aβ 응집 결국 노인반을 나타내고; 플라크 형성은 그들이 학습과 기억의 행동 테스트에서 성능 저하를 표시하도록 유의 한인지 ​​장애옵니다. 천연 인간 AD 병리를 모방하는 트랜스 제닉 마우스를 사용하여 생성을 따라서 다이의 진행을 모니터하기 위해 우리시킴으로써 AD 연구 사회에 기여한sea​​se. 이 Aβ 플라크를 개발하기 위해 마우스 개월 취하고 더 긴 Aβ 유도 시냅스 또는 2,3- 행동 이상을 표시하기 때문에, 트랜스 제닉 마우스를 사용하는 것은 비 경제적으로 시간 소모적이다. 원래 형질 전환 마우스 모델의 단점을 극복하기위한 대안으로 개발 된, 비 - 형질 전환 모델은 또한 일반적으로 그들의 독특한 이점 때문에 사용된다. AD와 같은인지 결핍은 다른 물리 화학적으로 유발 될 수있는 반면 병원체 - 유도 AD의 모델 수단 - 예컨대 스코 폴라 민 등의 신경 독성 화합물의 주입, 병변의 유도로, 뇌에 Aβ의 직접 주사에 의해 제조 할 수있다 이러한 해마와 같은 또는 대뇌 피질의 손상 사에 의해 인식 관련 분야이다. 그러나,인지 장애의 비 병원성 유도 정확하게 AD의 기본 병태 생리를 반영하지 않는다; 대신, 그것은 단지 그 결과 증상을 모방. 대조적으로, AD 병원체 - 유도 모델은 A(46), 주사 하였을 마우스 모델은 AD-같은 행동 이상을 표시 할 수 있습니다뿐만 아니라, Aβ 병리, 가족 및 산발적 AD가 공유하는 공통의 기능을 나타낼 수있다. 뇌 조직에서 Aβ 플라크를 시각화하기 어려움에도 불구하고, AD의 조사가 매력적인 만드는 Aβ 주입 모델의 가장 큰 장점은 제어합니다. 연구자들은 마약 관련 연구에서 잘못된 데이터로 이어질 수 마우스 모델의 개별 차이를 걸러 수 있습니다. 적시 약물 치료는 후보 약물의 기전에 따라 활성화되고; 정교한, Aβ 응집 억제제는 Aβ의 주입 전에 적용 할 수있다. 또한, 연구자들은 다른 요소가 긴밀하게 개인차를 포함하여 제어되기 때문에 Aβ 주입 후 발생하는 병원성 변화가 Aβ 노출에서 파생되어 있다고 가정 할 수 있습니다. 시간이 프로토콜에서 생생한 설명흐름은 제시 정위기구없이 Aβ​​의 뇌실 (ICV) 주사를 통해 정상 마우스의 AD-같은 표현형을 유도합니다. 뇌 조직에 주입 - 유발 손상을 최소화하는 구조적 손상 및 병변을 유발 염증 가능성을 방지하기 위해 필수적이다. 마우스 취급 능력의 부족은 뜻밖의 연결 부상으로 이끈다. 또한, 주입하는 동안 달성 될 수있는 적절한 각도 및 깊이를 활성화 기술은 잦은 오류를 회피하는 것이 특히 중요하다. ICV 주사 상세한 선명한 설명에 더하여, 이하의 프로토콜에 의해 생성 된 모델의 신뢰성은 또한 다음 섹션에서 설명된다. 다음 프로토콜함으로써 궁극적으로 AD 사회에 대한 의미있는 발견으로 이어질 수있는 발판을 제공, AD 연구에 기여하는 안정적이고 쉽게 이해 도구​​가 될 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>ICR mouse</td><td>Orientbio</td><td></td><td>male, 6-8 weeks, 27-29 g of body weight</td></tr><tr><td>C57BL/6 mouse</td><td>Orientbio</td><td></td><td>male, 6-8 weeks, 21-23 g of body weight</td></tr><tr><td>Amyloid-beta1-42</td><td>in house synthesis</td><td></td><td>stock concentration: 1 mM/DMSO, injected concentration: 100 &amp;mu;M/10% DMSO and 90% PBS</td></tr><tr><td>ICV injection syringe (26s gauge)</td><td>Hamilton</td><td>80308</td><td></td></tr><tr><td>Evans blue dye (EBD)</td><td>abcamBIochemicals</td><td>ab120869</td><td>1% EBD in PBS</td></tr><tr><td>DMSO</td><td>Sigma</td><td>D2650</td><td></td></tr><tr><td>PBS</td><td>gibco</td><td>10010-023</td><td></td></tr><tr><td>Gradi-GelTM II Gradient PAGE Analysis Kit</td><td>ELPiS Biotech</td><td>EBS-1056</td><td>15% Gel</td></tr><tr><td>Precision Plus ProteinTM Dual Xtra Standards</td><td>Bio-Rad</td><td>161-0377</td><td></td></tr><tr><td>Silver-Staining Kit</td><td>GE-Healthcare</td><td>17-1150-01</td><td></td></tr><tr><td>LabDiet</td><td>Orientbio</td><td>5053</td><td></td></tr></tbody></table>

intracerebroventricular injection of amyloid-&#946; peptides in normal mice to acutely induce alzheimer-like cognitive deficits

Amyloid-&#946; (A&#946;) is a major pathological mediator of both familial and sporadic Alzheimer's disease (AD). In the brains of AD patients, progressive accumulation of A&#946; oligomers and plaques is observed. Such A&#946; abnormalities are believed to block long-term potentiation, impair synaptic function, and induce cognitive deficits. Clinical and experimental evidences have revealed that the acute increase of A&#946; levels in the brain allows development of Alzheimer-like phenotypes. Hence, a detailed protocol describing how to acutely generate an AD mouse model via the intracerebroventricular (ICV) injection of A&#946; is necessary in many cases. In this protocol, the steps of the experiment with an A&#946;-injected mouse are included, from the preparation of peptides to the testing of behavioral abnormalities. The process of preparing the tools and animal subjects before the injection, of injecting the A&#946; into the mouse brain via ICV injection, and of assessing the degree of cognitive impairment are easily explained throughout the protocol, with an emphasis on tips for effective ICV injection of A&#946;. By mimicking certain aspects of AD with a designated injection of A&#946;, researchers can bypass the aging process and focus on the downstream pathology of A&#946; abnormalities.

이 섹션에서는 Aβ 집계 및 메모리 적자의 Y-미로 평가의 확인에 의해 얻을 수있는 결과의 예를 보여줍니다. 전장 Aβ를 사용하여 42 개의 아미노산 Aβ 모노머, 올리고머의 혼합물, 및 피 브릴 (도 3)의 (1-42) 펩티드를 제조 하였다. HFIP 유도 monomerization 공정을 통해, 상대적으로 균일 한 단량체 (레인 B)를 얻었다. 7 일간 배양 한 후, Aβ 집계 (레인 C)의 다양한 크기를 ...

Watch this Scientific Journal Video about Intracerebroventricular Injection of Amyloid-Î² Peptides in Normal Mice to Acutely Induce Alzheimer-like Cognitive Deficits at JoVE.com

Intracerebroventricular Injection of Amyloid-&#946; Peptides in Normal Mice to Acutely Induce Alzheimer-like Cognitive Deficits

아밀로이드-β (Aβ)의 동물 모델에 정의 된 수량 및 Aβ 단편 종의 관리를 가능하게하고 각 연구 그룹 내의 개별 차이를 줄여 주사 하였을. 이 프로토콜은 정상 마우스에서 알츠하이머와 같은 행동 이상의 생산을 가능하게 정위기구없이 Aβ​​의 뇌실 (ICV) 주입을 설​​명합니다.

일반 마우스의 아밀로이드-β의 펩티드의 뇌 실내 주사는 급성 치매와 같은인지 적자를 유도합니다

Amyloid-&#946; (A&#946;) is a major pathological mediator of both familial and sporadic Alzheimer's disease (AD). In the brains of AD patients, ...

intracerebroventricular-injection-amyloid-peptides-normal-mice-to

Research

JoVE Journal

Neuroscience

41.8K 조회수.  Korea Institute of Science and Technology.  아밀로이드-β (Aβ)의 동물 모델에 정의 된 수량 및 Aβ 단편 종의 관리를 가능하게하고 각 연구 그룹 내의 개별 차이를 줄여 주사 하였을. 이 프로토콜은 정상 마우스에서 알츠하이머와 같은 행동 이상의 생산을 가능하게 정위기구없이 Aβ​​의 뇌실 (ICV) 주입을 설​​명합니다. 

비디오: Intracerebroventricular Injection of Amyloid-β Peptides in Normal Mice to Acutely Induce Alzheimer-like Cognitive Deficits

Preparation of Oligomeric &beta;-amyloid1-42 and Induction of Synaptic Plasticity Impairment on Hippocampal Slices

Impairment of synaptic connections is likely to underlie the subtle amnesic changes occurring at the early stages of Alzheimer s Disease (AD). &beta;-amyloid (A&beta;), a peptide produced in high amounts in AD, is known to reduce Long-Term Potentiation (LTP), a cellular correlate of learning and memory. Indeed, LTP impairment caused by A&beta; is a useful experimental paradigm for studying synaptic dysfunctions in AD models and for screening drugs capable of mitigating or reverting such synaptic impairments. Studies have shown that A&beta; produces the LTP disruption preferentially via its oligomeric form. Here we provide a detailed protocol for impairing LTP by perfusion of oligomerized synthetic A&beta;1-42 peptide onto acute hippocampal slices. In this video, we outline a step-by-step procedure for the preparation of oligomeric A&beta;1-42. Then, we follow an individual experiment in which LTP is reduced in hippocampal slices exposed to oligomerized A&beta;1-42 compared to slices in a control experiment where no A&beta;1-42 exposure had occurred.

Preparation of Oligomeric &#946;-amyloid1-42 and Induction of Synaptic Plasticity Impairment on Hippocampal Slices

One feature of Alzheimer's Disease is the elevation of A&beta;1-42 peptide. Here we provide a protocol for preparing synthetic A&beta;1-42 oligomers, which impairs hippocampal Long-Term Potentiation, a cellular correlate of memory. This procedure is useful for investigating mechanisms of A&beta;-induced pathology and drug screening.

β - 아밀로이드 Oligomeric의 준비 1-42</subHippocampal 조각에 시냅틱 소성 장애의>와 유도

Impairment of synaptic connections is likely to underlie the subtle amnesic changes occurring at the early stages of Alzheimer s Disease (AD). ...

연구

신경과학

Establishment of a Valuable Mimic of Alzheimer's Disease in Rat Animal Model by Intracerebroventricular Injection of Composited Amyloid Beta Protein

Alzheimer&#39;s disease (AD) is an irreversible, progressive brain disease that slowly destroys memory and is accompanied by neuron loss and structure change. With the increase of AD patients worldwide, the pathology and treatment of the disease has become a focus in the International Pharmaceutical Industry. Thus, the establishment of the animal model to mimic AD in the laboratory is of great importance.
Here, we describe a detailed protocol for establishing a mimic of AD in a rat animal model though intracerebroventricular injection of amyloid beta protein 25-35 (A&#946;25-35) combined with aluminum trichloride (AlCl3) and anterodorsal thalamic nucleus injection of recombinant human transforming growth factor-&#946;1 (RHTGF-&#946;1) to rats. The related markers of AD were measured, including: spatial memory, neuronal structure and substructure, neuronal A&#946;, and neurofibrillary tangles (NFT) production. This rat model demonstrates spatial memory impairment, neuronal structure and substructure pathological changes, neuron intracellular A&#946; burden, and NFT aggregation, and provides a close mimic of the neuronal structure and function disorder to that of clinical AD patients. Thus, the presented AD rat modelprovides a valuable in vivo tool for exploring neuronal function, neuronal pathology, and drug screening of AD.

This is a protocol to mimic Alzheimer&#39;s Disease in rats by evaluation of spatial memory impairment, neuronal pathological changes, neuronal amyloid beta protein (A&#946;) burden, and neurofibrillary tangles aggregation, induced by the injection of A&#946;25-35 combined with aluminum trichloride and recombinant human transforming growth factor-&#946;1.

합성 아 밀 로이드 베타 단백질의 Intracerebroventricular 주입에 의해 쥐 동물 모델에서 Alzheimer의 질병의 귀중 한 모방의 설립

Alzheimer&#39;s disease (AD) is an irreversible, progressive brain disease that slowly destroys memory and is accompanied by neuron loss and structure ...

행동분석학

A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse 

Alzheimer's disease (AD) is a progressive neurodegenerative disease that is pathologically characterized by extracellular deposition of &#946;-amyloid peptide (A&#946;) and intraneuronal accumulation of hyperphosphorylated tau protein. Because cerebrospinal fluid (CSF) is in direct contact with the extracellular space of the brain, it provides a reflection of the biochemical changes in the brain in response to pathological processes. CSF from AD patients shows a decrease in the 42 amino-acid form of A&#946; (A&#946;42), and increases in total tau and hyperphosphorylated tau, though the mechanisms responsible for these changes are still not fully understood. Transgenic (Tg) mouse models of AD provide an excellent opportunity to investigate how and why A&#946; or tau levels in CSF change as the disease progresses. Here, we demonstrate a refined cisterna magna puncture technique for CSF sampling from the mouse. This extremely gentle sampling technique allows serial CSF samples to be obtained from the same mouse at 2-3 month intervals which greatly minimizes the confounding effect of between-mouse variability in A&#946; or tau levels, making it possible to detect subtle alterations over time. In combination with A&#946; and tau ELISA, this technique will be useful for studies designed to investigate the relationship between the levels of CSF A&#946;42 and tau, and their metabolism in the brain in AD mouse models. Studies in Tg mice could provide important validation as to the potential of CSF A&#946; or tau levels to be used as biological markers for monitoring disease progression, and to monitor the effect of therapeutic interventions. As the mice can be sacrificed and the brains can be examined for biochemical or histological changes, the mechanisms underlying the CSF changes can be better assessed. These data are likely to be informative for interpretation of human AD CSF changes.

A Technique for Serial Collection of Cerebrospinal Fluid from the Cisterna Magna in Mouse

Transgenic (Tg) mouse models of AD provide an excellent opportunity to investigate how and why A&#946; or tau levels in CSF change as the disease progresses in human patients. Here, we demonstrate a refined cisterna magna puncture technique for serial CSF sampling from the mouse.

Cisterna 마그나 마우스에서 뇌척수의 직렬 그룹에 대한 기술

Alzheimer's disease (AD) is a progressive neurodegenerative disease that is pathologically characterized by extracellular deposition of &#946;-amyloid ...

생물학

Stereotaxic Infusion of Oligomeric Amyloid-beta into the Mouse Hippocampus

Alzheimer&#8217;s disease is a neurodegenerative disease affecting the aging population. A key neuropathological feature of the disease is the over-production of amyloid-beta and the deposition of amyloid-beta plaques in brain regions of the afflicted individuals. Throughout the years scientists have generated numerous Alzheimer&#8217;s disease mouse models that attempt to replicate the amyloid-beta pathology. Unfortunately, the mouse models only selectively mimic the disease features. Neuronal death, a prominent effect in the brains of Alzheimer&#8217;s disease patients, is noticeably lacking in these mice. Hence, we and others have employed a method of directly infusing soluble oligomeric species of amyloid-beta - forms of amyloid-beta that have been proven to be most toxic to neurons - stereotaxically into the brain. In this report we utilize male C57BL/6J mice to document this surgical technique of increasing amyloid-beta levels in a select brain region. The infusion target is the dentate gyrus of the hippocampus because this brain structure, along with the basal forebrain that is connected by the cholinergic circuit, represents one of the areas of degeneration in the disease. The results of elevating amyloid-beta in the dentate gyrus via stereotaxic infusion reveal increases in neuron loss in the dentate gyrus within 1 week, while there is a concomitant increase in cell death and cholinergic neuron loss in the vertical limb of the diagonal band of Broca of the basal forebrain. These effects are observed up to 2 weeks. Our data suggests that the current amyloid-beta infusion model provides an alternative mouse model to address region specific neuron death in a short-term basis. The advantage of this model is that amyloid-beta can be elevated in a spatial and temporal manner.

Here, we present a protocol for direct stereotaxic brain infusion of amyloid-beta. This methodology provides an alternative in vivo mouse model to address the short-term effects of amyloid-beta on brain neurons.

마우스 해마에 올리고머 아밀로이드 - 베타의 정위 주입

Alzheimer&#8217;s disease is a neurodegenerative disease affecting the aging population. A key neuropathological feature of the disease is the ...

Neurodegeneration in an Animal Model of Chronic Amyloid-beta Oligomer Infusion Is Counteracted by Antibody Treatment Infused with Osmotic Pumps

Decline in hippocampal-dependent explicit memory (memory for facts and events) is one of the earliest clinical symptom of Alzheimer&#39;s disease (AD). It is well established that synapse loss and ensuing neurodegeneration are the best predictors for memory impairments in AD. Latest studies have emphasized the neurotoxic role of soluble amyloid-beta oligomers (A&#946;o) that begin to accumulate in the human brain approximately 10 to 15 yr before the clinical symptoms become apparent. Many reports indicate that soluble A&#946;o correlate with memory deficits in AD models and humans. The A&#946;o-induced neurodegeneration observed in neuronal and brain slice cultures has been more challenging to reproduce in many animal models. The model of repeated A&#946;o infusions shown here overcome this issue and allow addressing two key domains for developing new disease modifying therapies: identify biological markers to diagnose early AD, and determine the molecular mechanisms underpinning A&#946;o-induced memory deficits at the onset of AD. Since soluble A&#946;o aggregate relatively fast into insoluble A&#946; fibrils that correlate poorly with the clinical state of patients, soluble A&#946;o are prepared freshly and injected once per day during six days to produce marked cell death in the hippocampus. We used cannula specially design for simultaneous infusions of A&#946;o and continuous infusion of A&#946;o antibody (6E10) in the hippocampus using osmotic pumps. This innovative in vivo method can now be used in preclinical studies to validate the efficiency of new AD therapies that might prevent the deposition and neurotoxicity of A&#946;o in pre-dementia patients.

To study the effects of A&#946;o in vivo, we developed a model based on repeated hippocampal infusions of soluble A&#946;o coupled with continuous infusion of A&#946;o antibody (6E10) in the hippocampus using osmotic pumps to counteract the neurotoxic effect of A&#946;o.

만성 아밀로이드 - 베타 올리고머 주입의 동물 모델에서 신경 퇴행은 삼투 펌프와 항체 치료 인 퓨즈에 의해 상쇄되어

Decline in hippocampal-dependent explicit memory (memory for facts and events) is one of the earliest clinical symptom of Alzheimer&#39;s disease (AD). It ...

의학

Modeling Amyloid-&#946;42 Toxicity and Neurodegeneration in Adult Zebrafish Brain

Alzheimer's disease (AD) is a debilitating neurodegenerative disease in which accumulation of toxic amyloid-&#946;42 (A&#946;42) peptides leads to synaptic degeneration, inflammation, neuronal death, and learning deficits. Humans cannot regenerate lost neurons in the case of AD in part due to impaired proliferative capacity of the neural stem/progenitor cells (NSPCs) and reduced neurogenesis. Therefore, efficient regenerative therapies should also enhance the proliferation and neurogenic capacity of NSPCs. Zebrafish (Danio rerio) is a regenerative organism, and we can learn the basic molecular programs with which we could design therapeutic approaches to tackle AD. For this reason, the generation of an AD-like model in zebrafish was necessary. Using our methodology, we can introduce synthetic derivatives of A&#946;42 peptide with tissue penetrating capability into the adult zebrafish brain, and analyze the disease pathology and the regenerative response. The advantage over the existing methods or animal models is that zebrafish can teach us how a vertebrate brain can naturally regenerate, and thus help us to treat human neurodegenerative diseases better by targeting endogenous NSPCs. Therefore, the amyloid-toxicity model established in the adult zebrafish brain may open new avenues for research in the field of neuroscience and clinical medicine. Additionally, the simple execution of this method allows for cost-effective and efficient experimental assessment. This manuscript describes the synthesis and injection of A&#946;42 peptides into zebrafish brain.

This protocol describes the synthesis, characterization, and injection of monomeric amyloid-&#946;42 peptides for generating amyloid toxicity in adult zebrafish to establish an Alzheimer&#39;s disease model, followed by histological analyses and detection of aggregations.

아 밀 로이드-β42 독성 그리고 Zebrafish 두뇌에서 Neurodegeneration 모델링

Alzheimer's disease (AD) is a debilitating neurodegenerative disease in which accumulation of toxic amyloid-&#946;42 (A&#946;42) peptides leads to ...

Detecting Amyloid-&#946; Accumulation via Immunofluorescent Staining in a Mouse Model of Alzheimer's Disease

Alzheimer's disease (AD) is a neurodegenerative disease that contributes to 60-70% dementia around the world. One of the hallmarks of AD undoubtedly lies on accumulation of amyloid-&#946; (A&#946;) in the brain. A&#946; is produced from the proteolytic cleavage of the beta-amyloid precursor protein (APP) by &#946;-secretase and &#947;-secretase. In pathological circumstances, the increased &#946;-cleavage of APP leads to overproduction of A&#946;, which aggregates into A&#946; plaques. Since A&#946; plaques are a characteristic of AD pathology, detecting the amount of A&#946; is very important in AD research. In this protocol, we introduce the immunofluorescent staining method to visualize A&#946; deposition. The mouse model used in our experiments is 5&#215;FAD, which carries five mutations found in human familial AD. The neuropathological and behavioral deficits of 5xFAD mice are well-documented, which makes it a good animal model to study A&#946; pathology. We will introduce the procedure including transcardial perfusion, cryosectioning, immunofluorescent staining and quantification to detect A&#946; accumulation in 5&#215;FAD mice. With this protocol, researchers can investigate A&#946; pathology in an AD mouse model.

In the neuropathology of Alzheimer's disease, one of the most crucial characteristics is the deposition of amyloid-&#946;. In this protocol, we describe the method of immunofluorescent staining in 5&#215;FAD transgenic mouse to detect amyloid-&#946; accumulation in plaques. The process of perfusion, cryosectioning, staining and quantification will be described in detail.

Alzheimer's disease (AD) is a neurodegenerative disease that contributes to 60-70% dementia around the world. One of the hallmarks of AD undoubtedly lies ...

Fabrication of Amyloid-&#946;-Secreting Alginate Microbeads for Use in Modelling Alzheimer's Disease

According to the amyloid cascade hypothesis, the earliest trigger in the development of Alzheimer&#8217;s disease (AD) is the accumulation of toxic amyloid-&#946; (A&#946;) fragments, eventually leading to the classical features of the disease: amyloid plaques, neurofibrillary tangles and synaptic and neuronal loss. The lack of relevant non-transgenic preclinical models reflective of disease progression is one of the main factors hindering the discovery of effective drug treatments. To this end, we have developed a protocol for the fabrication of alginate microbeads containing amyloid-secreting cells useful for the study of the effects of chronic A&#946; production.
Chinese hamster ovary cells previously transfected with a human APP gene, secreting A&#946; (i.e., 7PA2 cells), were used in this study. A three-dimensional (3D) in vitro model for the sustained release of A&#946; was fabricated by encapsulation of 7PA2 cells in alginate. The process was optimized to target a bead diameter of 500-600 &#956;m for further in vivo studies. Optimization of 7PA2 cell encapsulation in alginate was performed altering fabrication parameters, e.g., alginate concentration, gel flow rate, electrostatic potential, head vibration frequency, gelling solution. Levels of secreted A&#946; were analyzed over time and compared between alginate beads and standard cell culture methods (up to 96 h).
A concentration of 1.5 x 106 7PA2 cells/mL and an alginate concentration of 2% (w/v) buffered with HEPES and subsequent gelation in 0.5 M calcium chloride for 5 min were found to fabricate the most stable microbeads. Fabricated microbeads were 1) of uniform size, 2) with an average diameter of 550 &#956;m, 3) containing about 100-150 cells per microbead and 4) able to secrete A&#946;.
In conclusion, our optimized method for the production of stable alginate microbeads containing amyloid-producing 7PA2 cells might enable the modeling of important aspects of AD both in vitro and in vivo.

This protocol illustrates a cell encapsulation method by rapid physical gelation of alginate to immobilize cells. Obtained microbeads allow controlled and sustained secretion of amyloid-&#946; over time and can be used to study the effects of secreted amyloid-&#946; in in vitro and in vivo models.

알츠하이머 병 모델링에 사용하기 위한 아밀로이드-β-분비 알긴산 마이크로비드 의 제조

According to the amyloid cascade hypothesis, the earliest trigger in the development of Alzheimer&#8217;s disease (AD) is the accumulation of toxic ...

Controlled Infusion of A&beta; Peptide-Specific Antibodies and A&beta; Oligomers into the Rat Hippocampus

Source: Sajadi, A., et al. <a href="https://app.jove.com/v/54215">Neurodegeneration in an Animal Model of Chronic Amyloid-beta Oligomer Infusion Is Counteracted by Antibody Treatment Infused with Osmotic Pumps.</a> J. Vis. Exp. (2016).
This video demonstrates a technique for the continuous infusion of amyloid-beta (A&#946;) peptide-specific antibodies into the hippocampus of a rat. The study employs implanting a bilateral cannula system for a controlled infusion of A&#946; peptide-specific antibodies coupled with the infusion of soluble A&#946; oligomers (A&#946;o) into the rat hippocampus to study the interactions between the oligomers and the antibodies.

Aβ 펩타이드 특이적 항체 및 Aβ 올리고머를 쥐 해마에 제어 주입

All procedures involving animal models have been reviewed by the local institutional animal care committee and the JoVE veterinary review board.
1. ...

JoVE Encyclopedia of Experiments

Immunology

Antibody-Based Technologies

Antibody-Based Imaging and Detection Methods

Establishing an Alzheimer's Disease Rat Model Through an Amyloid-Beta Peptide Injection

Source: Xiaoguang, W., et al. <a href="https://app.jove.com/v/56157">Establishment of a Valuable Mimic of Alzheimer&#39;s Disease in Rat Animal Model by Intracerebroventricular Injection of Composited Amyloid Beta Protein.</a> J. Vis. Exp. (2018).
This video demonstrates the procedure for injecting amyloid-beta peptides, aluminum chloride, and a neuroinflammatory growth factor, which collectively aids in toxic amyloid plaque formation in the hippocampus region. This causes memory impairment in the rat, characteristic of Alzheimer&#39;s disease.

일반 마우스의 아밀로이드-β의 펩티드의 뇌 실내 주사는 급성 치매와 같은인지 적자를 유도합니다

요약

더 많은 비디오 탐색

이 비디오의 챕터

β - 아밀로이드 Oligomeric의 준비_{1-42와 유도}

합성 아 밀 로이드 베타 단백질의 Intracerebroventricular 주입에 의해 쥐 동물 모델에서 Alzheimer의 질병의 귀중 한 모방의 설립

Cisterna 마그나 마우스에서 뇌척수의 직렬 그룹에 대한 기술

마우스 해마에 올리고머 아밀로이드 - 베타의 정위 주입

만성 아밀로이드 - 베타 올리고머 주입의 동물 모델에서 신경 퇴행은 삼투 펌프와 항체 치료 인 퓨즈에 의해 상쇄되어

아 밀 로이드-β42 독성 그리고 Zebrafish 두뇌에서 Neurodegeneration 모델링

Detecting Amyloid-β Accumulation via Immunofluorescent Staining in a Mouse Model of Alzheimer's Disease

알츠하이머 병 모델링에 사용하기 위한 아밀로이드-β-분비 알긴산 마이크로비드 의 제조

Aβ 펩타이드 특이적 항체 및 Aβ 올리고머를 쥐 해마에 제어 주입

아밀로이드-베타 펩타이드 주입을 통한 알츠하이머병 쥐 모델 구축

일반 마우스의 아밀로이드-β의 펩티드의 뇌 실내 주사는 급성 치매와 같은인지 적자를 유도합니다

요약

더 많은 비디오 탐색

이 비디오의 챕터

β - 아밀로이드 Oligomeric의 준비 1-42와 유도

합성 아 밀 로이드 베타 단백질의 Intracerebroventricular 주입에 의해 쥐 동물 모델에서 Alzheimer의 질병의 귀중 한 모방의 설립

Cisterna 마그나 마우스에서 뇌척수의 직렬 그룹에 대한 기술

마우스 해마에 올리고머 아밀로이드 - 베타의 정위 주입

만성 아밀로이드 - 베타 올리고머 주입의 동물 모델에서 신경 퇴행은 삼투 펌프와 항체 치료 인 퓨즈에 의해 상쇄되어

아 밀 로이드-β42 독성 그리고 Zebrafish 두뇌에서 Neurodegeneration 모델링

Detecting Amyloid-β Accumulation via Immunofluorescent Staining in a Mouse Model of Alzheimer's Disease

알츠하이머 병 모델링에 사용하기 위한 아밀로이드-β-분비 알긴산 마이크로비드 의 제조

Aβ 펩타이드 특이적 항체 및 Aβ 올리고머를 쥐 해마에 제어 주입

아밀로이드-베타 펩타이드 주입을 통한 알츠하이머병 쥐 모델 구축

β - 아밀로이드 Oligomeric의 준비_{1-42와 유도}