이 작품에 대 한 과학적 연구 (B) (20291958) N.U.;에 보조금에 의해 지원 되었다 젊은 과학자를 위한 연구비 뉴질랜드를 (A) (25713024)

동물 보호 및 실험 동물 관리에 대 한 지침을 따라야 하 마마 츠 대학 학교의 의학 동물 관리 위원회의 센터에서 수행 했다.
 1. 모델을 만들기 위한 수술 참고: 10 구슬 소독 기에 수술 도구를 배치 s preoperatively. 멸 균 글러브를 사용 하 여 intraoperatively.
<ol><li>사용 남성 쥐 300-400 g.를 무게 쥐 음식에 대 한 액세스를 허용 하 고 광고 libitum 물.</li>
	<li>는 Isoflurane 흡입 (2.0-3.0 mL/L)와 쥐 anesthetize. 발가락 핀치에 의해 적절 한 anesthetization를 확인 하십시오.</li>
	<li>전기 면도기, 복 부에 머리를 면도 하 고 알코올과 povidone-요오드 솔루션으로 복 부를 문질러.</li>
	<li>작업 테이블에서 부정사 위치에 쥐를 놓습니다. 수 의사 연 고를 사용 하 여 쥐에 &#39; 마 취에서 건조를 방지 하기 위해 s 눈.</li>
	<li>는 개복 술 복 부 정중 선 복 부 절 개를가 위를 사용 하 여 수행 합니다. 분명 수술 필드 확보, 팩 복 부 내용 복 부 구멍 안에 상처 견인을 사용 하 여 멸 균 거 즈와.</li>
	<li>대동맥 혈관 주위 조직에서 분리 하려면 부드럽게를 선택 하 고는 retroperitoneum 대동맥 벽을 노출 하 고 벗 겨 지 다 infrarenal 대동맥에서 분기 왼쪽된 신장 정 맥의 수준에서 후 공간에 핀셋으로 눈물은 혈관 주위 조직 ( 그림 1A).</li>
	<li>블록 혈액을 5-0 실크 문자열 복 부 대동맥에서 분기 혈관 대동맥 루멘 좁은 하지 않는 대동맥에서 지점에서 공급 하는 Ligate.</li>
	<li>대동맥 혈액 흐름을 차단 하는 혈관 클립 바로 아래 신장 동맥 및 대동맥의 분기 바로 위에 배치. 
	참고: 클립의 크기는 혈액의 흐름을 완전히 차단 하 대동맥 직경 보다 큰 이어야 합니다. 임시 5-0 실크 문자열 합자 만으로는 또한 클립 대신 혈액 흐름을 차단.</li>
	<li>폴리우레탄 카 테 터를 삽입 하려면 대동맥 클립, 신장 동맥 분 지에 인접 한에서 distally 마이크로 시저 5mm를 사용 하 여 앞쪽 대동맥 벽을 잘라 대동맥 벽의 표면에 점 출혈을 만드는 비슷합니다.</li>
	<li>폴리우레탄 카 테 터 삽입 (0.55 m m, 내경 외경 0.37 m m)를 물으로 대동맥에서 혈액을 씻어 절 개를 통해 얕게 바늘 내재 24 게이지를 사용 하 여. 폴리우레탄 테에 물으로 채워진 1 mL 주사기를 관리 하 고 물으로 대동맥에 나머지 혈액을 멀리 세척. 관개, 후 대동맥에서 카 테 터 제거.</li>
	<li>폴리우레탄 카 테 터를 삽입 하기 전에 (1.20 m m, 내경 외경 0.94 m m) 18-게이지 내재 바늘을 사용 하 여 잘라 폴리우레탄 테 길이가 10 mm ( 그림 1B).
	1.9 단계에서 만든 절 개에서 대동맥 루멘으로 폴리우레탄 카 테 터의 <ol><li>삽입 잘라 조각. 완전히 10 m m 카 테 터 대동맥 루멘으로 놓고 절 개 위치에 맞게 카 테 터의 중간점 위치 (즉, 카 테 터와 절 개를 커버).</li>
	</ol></li> <li>8-0 monofilament 문자열 ( 그림 1C)을 사용 하 여 중단 봉합 절 개를 복구.</li>
	<li>선 5-0 실크 문자열 및 폴리우레탄 테 ( 그림 1D)의 조합을 사용 하 여 복 부 대동맥. 
	참고: 대동맥 루멘 내재 카 테 터에 의해 유지 수 있습니다. 카 테 터 위치 이후 방지 하기 위해 단단히 대동맥 선 외과 의사 &#39; s 매듭은 것이 좋습니다 때 묶는 매듭, 두 배 overhand 매듭 형성의 첫 번째 던지기는 여분의 트위스트를 추가 하 고 추가 차례 더 많은 마찰을 제공 하 고 완화 하는 것을 줄일 수 있습니다.</li>
	<li>결 찰, 후 대동맥 분기점에서 혈관 클립을 제거 한 다음, 제거를 antegrade 혈액 흐름을 복원 하는 신장 동맥 아래 혈관 클립. 심한 대동맥 맥 동 확인.</li>
	<li>두 레이어, 복 막 및 다른 레이어, 4-0 폴 리 프로필 렌 봉합에 복 부 절 개를 닫습니다. 단단히 protruded 오르간을 방지 하기 위해 절 개를 봉합.</li>
	<li>복 부 절 개에 국 소 lidocaine을 적용합니다. 식을 반환 될 때까지 난방 패드에 쥐를 놓습니다. 두지 마십시오 쥐 무인 sternal recumbency를 유지 하기 위해 충분 한 의식 회복 될 때까지. 그것은 완전히 복구 될 때까지 작업을 다른 쥐의 회사를 겪고 있다 쥐를 반환 하지 않습니다.</li>
	<li>작업 후 쥐 밀접 하 게 모니터링합니다. 쥐 조 난 또는 몸 체중 감소의 흔적을 보여줍니다 하는 경우 멸 균 식 염 수 (1.0-2.0 mL) bolus를 피하 주사.</li>
	<li>Postoperatively, 초음파 echogram에 확대 대동맥의 시간-과정 개발을 관찰합니다. 설명 5 복 부 대동맥의 외부 가장자리에 가장자리 안쪽에서 최대 직경 측정.</li>
</ol> 2. 수확, 고정, 및 Elastica 반 Gieson (EVG) 얼룩 <ol><li>28 일 postoperatively, sodium pentobarbital 관리 &#8805; 100 mg/kg는 쥐를 안락사를 intraperitoneally.</li>
	<li>자르면 쥐 &#39; s 복 부 구멍 ventrally. 메스를 사용 하 여 초기 절 개를 확인 합니다. 가 위를 사용 하 여 동맥 류를 수확 하 고 수확된 aortas 24-48 헤에 대 한 중립으로 버퍼링 하는 10% 포 르 말린에 장소 
	참고: 외과 의사는 동맥을 노출 하는 경우 대동맥과 다른 장기에 부상을 방지 하기 위해 주의 해야 합니다. 높은 복 부 기관, AAA 형성을 나타내는 관찰 한다. 그림 2는 vivo에서 이미지와 비보 전 이미지; AAAs의 견본이 파열 되지.</li>
	<li>EVG 얼룩 9 <ol><li>솔루션 준비 <ol><li>준비 Verhoeff &#39; 주어진된 순서에 따라 다음을 혼합 하 여 s hematoxylin: 알콜 되며 20 mL, 10% 제 2 철 염화 8.0 mL, 그리고 Lugol &#39; s 요오드 8 mL. 각 추가 사이 솔루션을 믹스. 이 솔루션을 필요에 따라 신선한 준비 될 수 있다.</li>
			<li>준비 반 Gieson &#39; s 솔루션 1% 산 fuchsin 혼합 하 여 1 mL 및 포화 picric 산 45 mL. 고 서 서 하룻밤 잘 수 있습니다. 이 솔루션은 2 주 동안 안정.</li>
			<li>준비 차별화 솔루션 (2% 제 2 철 염화 물) 10% FeCl 3 10 mL 40 ml에서를 혼합 하 여 증류수. 이 솔루션을 필요에 따라 신선한 준비 있습니다.</li>
			<li>5.0 g 나트륨 thiosulfate 증류수 100 mL 물에 용 해 하 여 준비 5% 포. 이 솔루션은 1 년 동안 안정.</li>
		</ol></li> <li>얼룩 절차 참고: 자세한 내용은 참조 하십시오 참조 9.
		<ol><li>Verhoeff에는 aortas를 배치 하는 10 분을 위해 간단히, 증류수에 수확된 aortas의 고정된 파라핀 섹션 화 &#39; s 되며 물과 차별화 솔루션 (2% FeCl 3)에서 10-30 배 수영 25 분 세척에 대 한. 린스 물에. 1 분 씻어 물에 대 한 5% 포에 놓습니다. 반 Gieson에서 &#39; 5 분에 대 한 s 솔루션</li>
			<li>Dehydrate 다음에서 알코올에 순서: 75%, 90%, 95%, 100%, 그리고 100% 알코올 30 s 각. 그런 다음, 선택을 취소 5 분, 크 실 렌에 두 번 합니다. 수 지 장착 매체 coverslip에. 
			참고: 탄성 섬유 표시 검정; 블루 블랙 핵: 즐 블루ck; 콜라겐: 빨강; 그리고 다른 조직 요소: 노란색.</li>
		</ol>
		</li>
	</ol>
	</li>
</ol>

<ol>
	<li>Wolinsky, H., Glagov, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comparison+of+abdominal+and+thoracic+aortic+medial+structure+in+mammals.+Deviation+of+man+from+the+usual+pattern.">Comparison of abdominal and thoracic aortic medial structure in mammals. Deviation of man from the usual pattern.</a> Circ Res. 25 (6), 677-686 (1969).</li><li>Sano, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lymphangiogenesis+and+angiogenesis+in+abdominal+aortic+aneurysm.">Lymphangiogenesis and angiogenesis in abdominal aortic aneurysm.</a> PLoS One. 9 (3), e89830 (2014).</li><li>Vorp, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Association+of+intraluminal+thrombus+in+abdominal+aortic+aneurysm+with+local+hypoxia+and+wall+weakening.">Association of intraluminal thrombus in abdominal aortic aneurysm with local hypoxia and wall weakening.</a> J Vasc Surg. 34 (2), 291-299 (2001).</li><li>Tanaka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adventitial+vasa+vasorum+arteriosclerosis+in+abdominal+aortic+aneurysm.">Adventitial vasa vasorum arteriosclerosis in abdominal aortic aneurysm.</a> PLoS One. 8 (2), e57398 (2013).</li><li>Tanaka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Hypoperfusion+of+the+Adventitial+Vasa+Vasorum+Develops+an+Abdominal+Aortic+Aneurysm.">Hypoperfusion of the Adventitial Vasa Vasorum Develops an Abdominal Aortic Aneurysm.</a> PLoS One. 10 (8), e0134386 (2015).</li><li>Tanaka, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Imaging+Mass+Spectrometry+Reveals+a+Unique+Distribution+of+Triglycerides+in+the+Abdominal+Aortic+Aneurysmal+Wall.">Imaging Mass Spectrometry Reveals a Unique Distribution of Triglycerides in the Abdominal Aortic Aneurysmal Wall.</a> J Vasc Res. 52 (2), 127-135 (2015).</li><li>Kugo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+preventive+effect+of+fish+oil+on+abdominal+aortic+aneurysm+development.">The preventive effect of fish oil on abdominal aortic aneurysm development.</a> Biosci Biotechnol Biochem. 80 (6), 1186-1191 (2016).</li><li>Kugo, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adipocyte+in+vascular+wall+can+induce+the+rupture+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Adipocyte in vascular wall can induce the rupture of abdominal aortic aneurysm.</a> Sci Rep. 6, 31268 (2016).</li><li>Lichtenberg, A., Cebotari, S., Tudorache, I., Hilfiker, A., Haverich, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biological+scaffolds+for+heart+valve+tissue+engineering.">Biological scaffolds for heart valve tissue engineering.</a> Methods Mol Med. 140, 309-317 (2007).</li><li>Heistad, D. D., Marcus, M. L., Larsen, G. E., Armstrong, M. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Role+of+vasa+vasorum+in+nourishment+of+the+aortic+wall.">Role of vasa vasorum in nourishment of the aortic wall.</a> Am J Physiol. 240 (5), H781-H787 (1981).</li><li>Yoshimura, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Regression+of+abdominal+aortic+aneurysm+by+inhibition+of+c-Jun+N-terminal+kinase.">Regression of abdominal aortic aneurysm by inhibition of c-Jun N-terminal kinase.</a> Nat Med. 11 (12), 1330-1338 (2005).</li><li>Azuma, J., Asagami, T., Dalman, R., Tsao, P. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Creation+of+murine+experimental+abdominal+aortic+aneurysms+with+elastase.">Creation of murine experimental abdominal aortic aneurysms with elastase.</a> J Vis Exp. (29), (2009).</li><li>Lu, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Subcutaneous+Angiotensin+II+Infusion+using+Osmotic+Pumps+Induces+Aortic+Aneurysms+in+Mice.">Subcutaneous Angiotensin II Infusion using Osmotic Pumps Induces Aortic Aneurysms in Mice.</a> J Vis Exp. (103), (2015).</li><li>United Kingdom, E. T. I., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Endovascular+versus+open+repair+of+abdominal+aortic+aneurysm.">Endovascular versus open repair of abdominal aortic aneurysm.</a> N Engl J Med. 362 (20), 1863-1871 (2010).</li></ol>

저자는 공개 없다.

생리 적인 조건 하에서 대동맥 벽의 내부 레이어는 외부와 중간 레이어는 영양 VV, adventitia에서 중간 VV1에 침투 하는 반면 luminal 혈액 흐름에서 확산에 의해 영양는 있습니다. VV 혈 복 부 대동맥 벽에는 다음 세 가지 방향/영역에서 발생 한 수 있습니다: (1) 대동맥 벽, 대동맥 벽, 및 (3) 혈관 주위 조직10(2) 원심 방향 통해 인접 방향. 이전에, 인간의 조직의 조직학 분석 중요 한 협 착 또는 폐색 복 부 대동맥 벽에 VV 혈액 흐름 감소4수 제안 AAA 벽에 VV의 식별. 그것은 infrarenal AAA 폴리우레탄 카 테 터 삽입 및 infrarenal 복 부 대동맥의 봉합 결 찰의 조합에 기인 했다이 프로토콜에서 매우 중요 한 포인트. 신중 하 게 조직 계층을 벗 겨 지 다, 외과 원활 하 게 대동맥에 폴리우레탄 카 테 터를 삽입 하 고 단단히 hypoperfusion adventitial VV 및 동맥 류 형성으로 인해 만성 저 산소 증을 대동맥 선 해야 합니다. 이러한 기술을 사용 하 여, 대동맥 벽에 혈액의 흐름을 따라서 감소 하 고, 그리고 로컬 hypoxic 환경 유발 됩니다. 혈액 흐름 감소와 hypoxia 유발 동맥 형성 나타냅니다 VV 혈 복 부 대동맥 벽으로 AAA 형성의 병 인에는 역할을 한다.
특히, 대동맥 동맥 모델 다음 조건을 충족 해야 합니다: 기준선, tunica 매체의 퇴보와 대동맥 벽의 염증에 비해 혈관 직경에 1.5-fold 증가. 가장 인기 있는 동물 모델 유도 하는 염증 성 반응을 CaCl211, elastase12, angiotensin II13등 물질을 사용 하 여 건설 되었습니다. 이 모델 수 높은 재현성을가지고 하 고 분명히 병 적인 변화를 일으킬 그들은 일반적으로 연구에서 사용 된. 우리의 모델에서 우리는 사용 하 여 초음파에서 7 일 마다 절차 (그림 3) 후 날 28까지 절차를 수행 하기 전에 대동맥 직경 평가. 결과 대동맥 직경 적당히 증가 28 일 동안, 직경에 있는이 변화는 이전 설치류 모델에서 유사한 나타내는 보여주었다. 혈관 형태의 총 관찰 표시 부드러운 방 추상 모양 (그림 2). 28 일에 우리는 쥐를 희생 하 고 복구 된 대동맥 조직의 histopathological 분석을 수행. 찢 어과 tunica 매체와 adventitia의 탄성과 콜라겐 섬유의 실종 (그림 4) 관찰 되었다. 또한, 염증 세포, 대 식 세포, 등 tunica 매체 tunica adventitia에서 참석 했다.
현재, AAAs 사용할 수 있는 치료 옵션에 외과 혈관 내 수술 텐트 접목, AAA 파열14환자의 30-50%의 사망률으로 제한 됩니다. 그러나, 약 AAAs 치료 임상 사용을 위해 승인 되었습니다. 병 적인 결과 인간과 AAA 연구에 사용 되는 설립된 동물 모델 사이에서 불일치는 논쟁이 있다. 인간의 AAA 및 AAA 모델 동물 간의 병 인 유사성 약리 치료의 발전을 위해 필수적입니다. 설치류 모델의 효과 관한 우리의 쥐 모델은 형태학 상으로 인간 intraluminal 혈전5 와 지질8점에서 비슷합니다. 또한,이 연구에서 쥐의 약 20%가 AAA 파열 졌고 절차 후 28 일 이내에 사망 했다. 대동맥 동맥 류 파열은이 질병에 대 한 가장 중요 한 이벤트, 파열 설립 실험 AAA 모델, 공통 이며 메커니즘은 아직 해명 하지 했습니다. 따라서,이 모델은 대동맥 직경의 팽창과는 동맥의 파열의 메커니즘을 이해 하는 데 유용 합니다.
이 모델의 창조는 어떤 수술 절차에 대 한 필요 합니다. 따라서, 연구자는이 모델의 한계는이 모델을 만드는 연습 해야 합니다. 미래에, 우리는 우리가 줄일 수 있습니다 혈액 흐름 점차 VV 벽을 두껍게 하 여 자발적인 대동맥 동맥에서 발생 한 설치류 모델을 만드는 고 싶습니다.

복 부 대동맥은 다음 세 계층으로 구성: 내부 혈관 벽 (intima), 중간 레이어 (미디어), 그리고 혈관 외벽 (adventitia), 이들의 adventitia 독특한 혈액 공급 시스템 바사 vasorum (VV)로 알려져 있다. 대동맥 조직 adventitial VV 관류 하 고 대동맥 혈액 흐름1에서 간단한 산소 보급을 통해 산소와 함께 공급 된다. 그러나, 지리적으로, 복 부 대동맥 대동맥의 다른 부분에서에 비해 VVs의 최소 배포가 하고있다. 2
이전 연구 보고 인간의 복 부 대동맥 동맥 류에서 조직 hypoxia에 두꺼운 intraluminal 혈전 (ILT)3(AAA) 벽. 또한, 관련 된 조직 hypoxia AAA 벽4에서 상당히 높은 비율로 arteriosclerotic 변경 aneurysmal 벽에 adventitial VV 가려진은 표시 되었습니다. 이러한 결과에 따라, AAA의 소설 설치류 모델 adventitial VV hypoperfusion5를 유도 하 여 만들었습니다. 이 모델에서 VV hypoperfusion 발생 조직 hypoxia 및 infrarenal AAA, 형태학 및 병 적인 특성 인간 AAA6의 그들과 유사 했다의 개발. 주요 사례 ILTs의 존재와 형성 adipocytes6, 그리고 파열7,8를 일으킬 가능성이의 축적 했다. 이 발견 이전 설치류 모델에서 드물게 관찰 되었습니다. 따라서이 모델 메커니즘 AAA 개발 및 파열에 대 한 책임의 깊은 이해에 크게 기여할 수 있습니다. 소개 하 고 adventitial VV hypoperfusion 통해 AAAs를 유도 하는 데 사용 하는 표준 프로토콜을 설명 하 고 수술 기법을 사용 하 여 대동맥 벽에 저 산소 증을 유발 하는 방법을 설명.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="826">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:292px;">rat</td>
			<td style="width:115px;">Japan SLC.Inc</td>
			<td style="width:185px;">Slc:SD rat</td>
			<td style="width:235px;">Sprague&#8211;Dawley ratTM</td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:292px;">povidone-iodine solution</td>
			<td style="width:115px;">Libatape Pharmaceutical Co., Ltd.</td>
			<td style="width:185px;">4987335 111457</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="63">
			<td height="63" style="height:63px;width:292px;">5-0 silk string</td>
			<td style="width:115px;">Akiyama Medical MFG. CO.,LTD</td>
			<td style="width:185px;">JIS No.1</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;">vascular clips</td>
			<td>Natsume Seisakusho Co., Ltd.</td>
			<td>C-42-S-2</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:292px;">polyurethane catheter (24-gauge indwelling needle)</td>
			<td style="width:115px;">MEDIKIT</td>
			<td style="width:185px;">24G</td>
			<td>Supercath Z4VTM, 24-gauge indwelling needle</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:292px;">polyurethane catheter (18-gauge indwelling needle)</td>
			<td style="width:115px;">MEDIKIT</td>
			<td style="width:185px;">18G</td>
			<td>Supercath Z3VTM, 18-gauge indwelling needle</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:292px;">8-0 monofilament string</td>
			<td style="width:115px;">Ethicon Suture</td>
			<td style="width:185px;">c-42-S-2</td>
			<td>PROLENE Polypropylene Suture, Repair the incision with the suture</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

creation of a rodent model of abdominal aortic aneurysm by blocking adventitial vasa vasorum perfusion

Adventitial 바사 vasorum (VV) 산소와 대동맥 벽에 영양을 제공합니다. 대동맥 벽에서 hypoxia 확대 복 부 대동맥 동맥 류 (AAAs) 발생할 수 있습니다. 이 문서는 소개 하 고 대동맥 루멘 및 infrarenal 복 부 대동맥의 봉합 결 찰에 폴리우레탄 카 테 터 삽입의 조합으로 만든 adventitial VV hypoperfusion 통해 AAAs를 유도 하는 데 사용 하는 표준 프로토콜에 설명 합니다.
프로토콜 남성 쥐 음식과 물 광고 libitum제공 되는 300-400 g 무게의 사용을 포함. 복 부 중간 복 부 절 개를 가진 개복 술 후 대동맥의 각 질 제거는 혈관 주위 조직에서 혈액 흐름을 차단 수행 됩니다. 신장 동맥 분 지에 인접 한 작은 절 개를 포함 하는 Aortotomy를 수행 하 고 폴리우레탄 테 18 게이지 내재 바늘을 사용 하 여 삽입 됩니다. 절 개, 수리 후 카 테 터를 통해 대동맥의 단단한 결 찰 대동맥 혈액의 흐름을 방해 하지 않고 대동맥 벽을 통해 인접 방향에서 VV 혈액 흐름을 차단 합니다. 이 기술은 진보 대동맥 팽창으로 AAA를 유도할 수 있다.
이 모델의 가장 큰 장점은 VV hypoperfusion 조직 hypoxia과 인간의 AAA의 그들과 유사한 형태학 및 병 적인 특성을가지고 있는 infrarenal AAA, 개발 원인입니다.

기술된 요원 기술 쥐에 폴리우레탄 카 테 터 삽입 및 infrarenal 복 부 대동맥의 봉합 결 찰의 조합을 사용 하 여 만성 대동맥 hypoxia 유발 동맥의 새로운 동물 모델을 만듭니다. 쥐 프로토콜 섹션에 설명 된 절차 후 안락사 28 일 있었다. aortas 수확 되었고 동맥 류 형성을 시각화 하기 위해 몇 군데. 그림 2 는 방 추상 AAA의 개발. Ex vivo에서 대동맥의 위쪽과 아래쪽 끝 팽창 없이 정상적인 직경이 있다. 대동맥 직경 transabdominal 초음파 (그림 3)를 사용 하 여 측정 되었다. 지름은 일반적으로 프로시저; 후에 대략 14 일에 최대 크기에 도달 그 후, 그것은 그대로 또는 약간 증가. 그림 4 는 EVG 얼룩 후 최대 직경에는 동맥의 histopathological 이미지를 보여준다. (동맥)의 28 일에 조직 이미지 날 0에 비해 탄성 섬유의 저명한 저하를 보였다.
<img alt="Figure 1" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig1.jpg"> 
복 부 대동맥 동맥 류 (AAA)를 유도 하기 위해 그림 1: 수술 절차. (A) infrarenal 대동맥 주변 조직에서 피부 박피입니다. (10 m m 긴 컷 B)는 폴리우레탄 카 테 터 대동맥에 작은 절 개를 통해 삽입 됩니다. (C) 절 개는 8-0 monofilament 봉합으로 복구 되 고 혈액의 흐름이 복원 됩니다. (D)는 대동맥은 삽입 된 카 테 터에 5-0 비단 봉합으로 출혈. 눈금 막대 = 5 m m. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55763/55763fig1large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 2" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig2.jpg"> 
그림 2: 수술 후 대표 결과입니다. 방 추상 복 부 대동맥 동맥 류 수술 후 하루 28 보여주는 개발에 거시적인 전망. retroperitoneum의 높은 마진 (깨진된 선; 왼쪽) 동맥의 외부 가장자리에 해당합니다. Ex vivo에서 대동맥의 위쪽과 아래쪽 끝 (오른쪽) 정상입니다. 눈금 막대 = 3 m m. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55763/55763fig2large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 3" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig3.jpg"> 
그림 3: 최대 대동맥 직경 transabdominal 초음파를 사용 하 여 측정 대동맥 직경은이 쥐 모델에서 꾸준히 증가 했다. 대동맥 직경은 평균 ± 표준 편차로 표시 됩니다 (n = 12). <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55763/55763fig3large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>
<img alt="Figure 4" class="xfigimg" src="/files/ftp_upload/55763/55763fig4.jpg"> 
그림 4: 얼룩 Elastica 밴 Gieson와 aneurysmal 조직의 대표 이미지. EVG 퇴행 성 탄력 있는 lamina에서 보여주는 미디어와 intraluminal 혈전의 형성 절차 후 28 일 (오른쪽) 얼룩과 조직학 평가. 대동맥 미디어에 탄성 섬유 조각화 및 대동맥 adventitia에 스파스 콜라겐 섬유는 28 일에 관찰 된다. 0 (왼쪽) 프로시저가 전에 이다. 눈금 막대 = 500 µ m. <a href="//ecsource.jove.com/files/ftp_upload/55763/55763fig4large.jpg" target="_blank">이 그림의 더 큰 버전을 보려면 여기를 클릭 하십시오.</a>

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Creation of a Rodent Model of Abdominal Aortic Aneurysm by Blocking Adventitial Vasa Vasorum Perfusion

루멘 대동맥 및 대동맥의 봉합 결 찰에 폴리우레탄 카 테 터 삽입 adventitial 바사 vasorum hypoperfusion 인해 만성 저 산소 증 유발. 이 문서에서는 AAA의 인 간에 있는 유사한 특성을 가진 복 부 대동맥 동맥 류 (AAA)의 소설 동물 모델을 설명합니다.

Adventitial 바사 Vasorum 관류를 차단 하 여 복 부 대동맥 동맥 류의 설치류 모델의 생성

The adventitial vasa vasorum (VV) provides oxygen and nourishment to the aortic wall. Hypoxia in the aortic wall can cause enlarged abdominal aortic ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

9.0K 조회수.  Hamamatsu University School of Medicine. 루멘 대동맥 및 대동맥의 봉합 결 찰에 폴리우레탄 카 테 터 삽입 adventitial 바사 vasorum hypoperfusion 인해 만성 저 산소 증 유발. 이 문서에서는 AAA의 인 간에 있는 유사한 특성을 가진 복 부 대동맥 동맥 류 (AAA)의 소설 동물 모델을 설명합니다.

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Creation of Reversible Cholestatic Rat Model

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Cholestasis can cause various physiological changes and affect the nutritional status and surgical outcomes. Study of the pathophysiological changes occurring in the liver and other organs is of importance. Various studies have been done in cholestatic rat models.
We used a reversible cholestatic rat model in our recent study looking at the role of methylprednisolone in the ischemia reperfusion injury. Various techniques for creation of a reversible cholestatic model have been described. Creation of a reversible cholestatic rat model can be challenging in view of the smaller size and unique hepatopancreatobiliary anatomy in rats. This video article demonstrates the creation of a reversible cholestatic model.
This model can be used in various studies, such as looking at the changes in nutritional, physiological, pathological, histological and immunological changes in the gastrointestinal tract. This model can also be used to see the effects of cholestasis and various therapeutic interventions on major hepatic surgeries.

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Creation of a reversible cholestatic rat model can be challenging in view of the smaller size and unique hepatopancreatobiliary anatomy in rats. This video article demonstrates the creation of a reversible cholestatic model.

가역 Cholestatic 쥐 모델의 생성

Cholestasis is a clinical condition commonly encountered by both surgeons and gastroenterologists. Cholestasis can cause various physiological changes and ...

연구

의학

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of Abdominal aortic aneurysm (AAA) pathophysiology. There is no abdominal aortic aneurysm endograft exclusion model cheap and reproducible, which would allow deep investigations of AAA before and after treatment. We hereby describe how to induce, and then to exclude with a covered coronary stentgraft an abdominal aortic aneurysm in a rat. The well known elastase induced AAA model was first reported in 19901 in a rat, then described in mice2. Elastin degradation leads to dilation of the aorta with inflammatory infiltration of the abdominal wall and intra luminal thrombus, matching with human AAA. Endovascular exclusion with small covered stentgraft is then performed, excluding any interactions between circulating blood and the aneurysm thrombus. Appropriate exclusion and stentgraft patency is confirmed before euthanasia by an angiography thought the left carotid artery. Partial control of elastase diffusion makes aneurysm shape different for each animal. It is difficult to create an aneurysm, which will allow an appropriate length of aorta below the aneurysm for an easy stentgraft introduction, and with adequate proximal and distal neck to prevent endoleaks. Lots of failure can result to stentgraft introduction which sometimes lead to aorta tear with pain and troubles to stitch it, and endothelial damage with post op aorta thrombosis. Giving aspirin to rats before stentgraft implantation decreases failure rate without major hemorrhage. Clamping time activates neutrophils, endothelium and platelets, and may interfere with biological analysis.

Histological and biochemical modifications after aneurysm endograft exclusion are still unclear. We describe a new model of endograft implantation on a murine aneurysm. Through thrombus analysis with and without persistant circulating blood stream interface, and new endovascular biomaterials evaluation, this model will help to better understand endovascular aneurysm exclusion pathobiology.

혈관 동맥류 수리의 새로운 쥐과 모델

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

Reproducable Paraplegia by Thoracic Aortic Occlusion in a Murine Model of Spinal Cord Ischemia-reperfusion

Background 
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered advancements to decrease the occurrence this injury.&#160;The current model demonstrates reproducible lower&#160;extremity paralysis following thoracic aortic occlusion.
Methods 
Adult male C57BL6 mice were anesthetized with isoflurane. Through a cervicosternal incision the aorta was exposed. The descending thoracic aorta and left subclavian arteries were identified without entrance into pleural space. Skeletonization of these arteries was followed by immediate closure (Sham) or occlusion for 4 min (moderate ischemia) or 8 min (prolonged ischemia). The sternotomy and skin were closed and the mouse was transferred to warming bed for recovery.&#160; Following recovery, functional analysis was obtained at 12 hr intervals until 48 hr.
Results 
Mice that underwent sham surgery showed no observable hind&#160;limb deficit. Mice subjected to moderate ischemia for 4 min had minimal functional deficit at 12 hr followed by progression to complete paralysis at 48 hr. Mice subjected to prolonged ischemia had an immediate paralysis with no observable hind-limb movement at any point in the postoperative period. There was no observed intraoperative or post&#160;operative mortality.
Conclusion 
Reproducible lower extremity paralysis whether immediate or delayed can be achieved in a murine model. Additionally, by using a median sternotomy and careful dissection, high survival rates, and reproducibility can be achieved.

The lack of mechanistic understanding of spinal cord ischemia-reperfusion injury has hindered further adjuncts to prevent paraplegia following high risk aortic operations. Thus, the development of animal models is imperative. This manuscript demonstrates reproducible lower extremity paralysis following thoracic aortic occlusion in a murine model.

척수 허혈 - 재관류의 생쥐 모델에서 흉부 대동맥 폐색에 의해 재생산 할 하반신 마비

Background
Lower extremity paralysis continues to complicate aortic interventions. The lack of understanding of the underlying pathology has hindered ...

Ascending Aortic Constriction in Rats for Creation of Pressure Overload Cardiac Hypertrophy Model

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart failure. Here, we describe a detailed surgical procedure for creating pressure overload and cardiac hypertrophy in rats by constriction of the ascending aorta using a small metallic clip. After anesthesia, the trachea is intubated by inserting a cannula through a half way incision made between two cartilage rings of trachea. Then a skin incision is made at the level of the second intercostal space on the left chest wall and muscle layers are cleared to locate the ascending portion of aorta. The ascending aorta is constricted to 50&#8211;60% of its original diameter by application of a small sized titanium clip. Following aortic constriction, the second and third ribs are approximated with prolene sutures. The tracheal cannula is removed once spontaneous breathing was re-established. The animal is allowed to recover on the heating pad by gradually lowering anesthesia. The intensity of pressure overload created by constriction of the ascending aorta is determined by recording the pressure gradient using trans-thoracic two dimensional Doppler-echocardiography. Overall this protocol is useful to study the remodeling events and contractile properties of the heart during the gradual onset and progression from compensated cardiac hypertrophy to heart failure stage.

We describe a stepwise procedure for creating pressure overload and left ventricular hypertrophy in Wistar rats by constriction of the ascending aorta using a small metallic clip. This model is extensively used for studying remodeling changes during cardiac hypertrophy and for identifying and evaluating strategies for regression of such changes.

압력 과부하 심장 비대 모델의 창조를위한 쥐의 대동맥 수축 오름차순

Ascending aortic constriction is the most common and successful surgical model for creating pressure overload induced cardiac hypertrophy and heart ...

Creation of Abdominal Adhesions in Mice

Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or intraabdominal infection. The precise mechanisms underlying adhesion formation are poorly understood. Many compounds and physical barriers have been tested for their ability to prevent adhesions after surgery with varying levels of success. The mouse and rat are important models for the study of abdominal adhesions. Several different techniques for the creation of adhesions in the mouse and rat exist in the literature. Here we describe a protocol utilizing abrasion of the cecum with sandpaper and sutures placed in the right abdominal sidewall. The mouse is anesthetized and the abdomen is prepped. A midline laparotomy is created and the cecum is identified. Sandpaper is used to gently abrade the surface of the cecum. Next, several figure-of-eight sutures are placed into the peritoneum of the right abdominal sidewall. The abdominal cavity is irrigated, a small amount of starch is applied, and the incision is closed. We have found that this technique produces the most consistent adhesions with the lowest mortality rate.

Abdominal adhesions that form after surgery are a major cause of pain, infertility, and hospitalization and reoperation for small bowel obstruction. Our surgical procedure for creating abdominal adhesions in mice is a reliable tool to study the mechanisms underlying the formation of adhesions.

마우스의 복부 유착의 창조

Abdominal adhesions consist of fibrotic tissue that forms in the peritoneal space in response to an inflammatory insult, typically surgery or ...

Reproducible Arterial Denudation Injury by Infrarenal Abdominal Aortic Clamping in a Murine Model

Percutaneous vascular interventions uniformly result in arterial denudation injuries that subsequently lead to thrombosis and restenosis. These complications can be attributed to impairments in re-endothelialization within the wound margins. Yet, the cellular and molecular mechanisms of re-endothelialization remain to be defined. While several animal models to study re-endothelialization after arterial denudation are available, few are performed in the mouse because of surgical limitations. This undermines the opportunity to exploit transgenic mouse lines and investigate the contribution of specific genes to the process of re-endothelialization. Here, we present a step-by-step protocol for creating a highly reproducible murine model of arterial denudation injury in the infrarenal abdominal aorta using external vascular clamping. Immunocytochemical staining of injured aortas for fibrinogen and &#946;-catenin demonstrate the exposure of a pro-thrombotic surface and the border of intact endothelium, respectively. The method presented here has the advantages of speed, excellent overall survival rate, and relative technical ease, creating a uniquely practical tool for imposing arterial denudation injury in transgenic mouse models. Using this method, investigators may elucidate the mechanisms of re-endothelialization under normal or pathological conditions.

Understanding the cellular and molecular mechanisms of re-endothelialization following arterial denudation injury is of paramount importance in preventing thrombosis and restenosis of arteries. Here we describe a protocol for reproducible arterial denudation injury of the infrarenal abdominal aorta. The procedure was developed to investigate the underlying mechanisms that regulate endothelial regeneration using mouse models.

쥐 모델에서 Infrarenal 복부 대동맥 클램핑에 의해 재현 동맥 발가 벗김 부상

Percutaneous vascular interventions uniformly result in arterial denudation injuries that subsequently lead to thrombosis and restenosis. These ...

Quantitative Micro-CT Analysis of Aortopathy in a Mouse Model of &#946;-aminopropionitrile-induced Aortic Aneurysm and Dissection

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of aortic disease exist, in vivo imaging of the vasculature has been limited. In recent years, micro-computerized tomography (micro-CT) has emerged as a preferred modality for imaging both large and small vessels both in vivo and ex vivo. In conjunction with a method of vascular casting, we have successfully used micro-CT to characterize the frequency and distribution of aortic pathology in &#946;-aminopropionitrile-treated C57/Bl6 mice. Technical limitations of this method include variations in the quality of the perfusion introduced by poor animal preparation, the application of proper methodologies for vessel size quantification, and the non-survivability of this procedure. This article details a methodology for the intravascular perfusion of a lead-based radiopaque silicone rubber for the quantitative characterization of aortopathy in a mouse model of aneurysm and dissection. In addition to visualizing aortic pathology, this method may be used for examining other vascular beds in vivo or vascular beds removed post-mortem.

This article describes a detailed methodology of using a radiopaque lead-based silicone rubber to perfuse the murine vasculature for aortic diameter quantification in a mouse model of aortic aneurysm and dissection.

Β-aminopropionitrile-유도 대동맥 동맥 및 해 부의 마우스 모델에서 Aortopathy의 양적 마이크로 CT 분석

Aortic aneurysm and dissection is associated with significant morbidity and mortality in the population and can be highly lethal. While animal models of ...

Ultrasound Imaging of the Thoracic and Abdominal Aorta in Mice to Determine Aneurysm Dimensions

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been widely used to measure aortic dimensions in mouse models of aortic aneurysms. Aortic aneurysms are defined as permanent dilations of the aorta, which occur most frequently in the ascending and abdominal regions. Sequential measurements of aortic dimensions by ultrasound are the principal approach for assessing the development and progression of aortic aneurysms in vivo. Although many reported studies used ultrasound imaging to measure aortic diameters as a primary endpoint, there are confounding factors, such as probe position and cardiac cycle, that may impact the accuracy of data acquisition, analysis, and interpretation. The purpose of this protocol is to provide a practical guide on the use of ultrasound to measure the aortic diameter in a reliable and reproducible manner. This protocol introduces the preparation of mice and instruments, the acquisition of appropriate ultrasound images, and data analysis.

Ultrasound imaging has become a common modality to determine the luminal dimensions of thoracic and abdominal aortic aneurysms in mice. This protocol describes the procedure to acquire reliable and reproducible two-dimensional ultrasound images of the ascending and abdominal aorta in mice.

흉부 및 복 부 대동맥 동맥 류 크기를 결정 하는 쥐에서의 초음파 이미징

Contemporary high-resolution ultrasound instruments have sufficient resolution to facilitate the measurement of mouse aortas. These instruments have been ...

Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. An aneurysm forms as a result of progressive weakening and eventual dilation of the aorta, which can rupture or tear once it reaches a critical diameter. Aneurysms of the descending aorta in the chest, called descending thoracic aortic aneurysms (dTAA), make up a large proportion of aneurysm cases in the United States. Uncontained dTAA rupture is almost universally lethal, and elective repair has a high rate of morbidity and mortality. The purpose of our model is to study dTAA specifically, to elucidate the pathophysiology of dTAA and to search for molecular targets to halt the growth or reduce the size of dTAA. By having a murine model to study thoracic pathology precisely, targeted therapies can be developed to specifically test dTAA. The method is based on the placement of porcine pancreatic elastase (PPE) directly on the outer murine aortic wall after surgical exposure. This creates a destructive and inflammatory reaction, which weakens the aortic wall and allows for aneurysm formation over weeks to months. Though murine models possess limitations, our dTAA model produces robust aneurysms of predictable size. Furthermore, this model can be used to test genetic and pharmaceutical targets which may arrest dTAA growth or prevent rupture. In human patients, interventions such as these could help avoid aneurysm rupture, and difficult surgical intervention.

We describe a surgical protocol to consistently induce robust descending thoracic aortic aneurysms in mice. The procedure involves left thoracotomy, thoracic aorta exposure, and placement of a sponge soaked in porcine pancreatic elastase on the aortic wall.

국소 엘라스타아제의 뮤린 외과 모델은 내림차순 흉부 대동맥류를 유도

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...

Porcine Model of Infrarenal Abdominal Aortic Aneurysm

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal abdominal aortic aneurysms (AAA) in swine. To achieve this, we use a combination of balloon angioplasty, elastase and collagenase, and a lysyl oxidase inhibitor, called &#946;-aminopropionitrile (BAPN), to create clinically significant infrarenal aortic aneurysms, analogous to human disease.
Noncastrated male swine are fed BAPN for 7 days prior to surgery to achieve a steady state in the blood. A midline laparotomy is performed and the infrarenal aorta is circumferentially dissected. An initial measurement is recorded prior to aneurysm induction with a combination of balloon angioplasty, elastase (500 units)/collagenase (8000 units) perfusion, and topical elastase application. Swine are fed BAPN daily until terminal procedure on either postoperative day 7, 14, or 28, at which time the aneurysm is measured, and tissue procured. BAPN + surgery pigs are compared to pigs that underwent surgery alone.
Swine treated with BAPN and surgery had a mean aortic dilation of 89.9% &#177; 47.4% at day 7, 105.4% &#177; 58.1% at day 14, and 113.5% &#177; 30.2% at day 28. Pigs treated with surgery alone had significantly smaller aneurysms compared to BAPN + surgery animals at day 28 (p &#60; 0.0003). The BAPN + surgery group had macroscopic and immunohistochemical evidence of end stage aneurysmal disease.
Clinically significant infrarenal AAA can be induced using balloon angioplasty, elastase/collagenase perfusion and topical application, supplemented with oral BAPN. This model creates large, clinically significant AAA with hallmarks of human disease. This has important implications for the elucidation of AAA pathogenesis and testing of novel therapies and devices for the treatment of AAA. Limitations of the model include variation in BAPN ingested by swine, quality of elastase perfusion, and cost of BAPN.&#160;

This novel model creates robust infrarenal abdominal aortic aneurysms in swine using a combination of balloon angioplasty, elastase/collagenase perfusion, topical elastase application, and oral compound &#946;-aminopropionitrile administration, which interferes with collagen cross-linking.

돼지 모델 의 관막 복 대동맥류

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal ...