The authors are solely responsible for the design and conduct of the presented study. Dr. Marbacher was supported by a grant from the Swiss National Science Foundation (PBSKP3-123454). The authors declare no conflict of interests. 
Author contributions to the study and manuscript preparation include the following. Conception and design: SM, JM, JF. Acquisition of data: SM, EA, JF. Analysis and interpretation of data: SM, JF, JM. Drafting the article: SM, JF, JM. Critically revising the article: JH, MN. Statistical analysis: SM, JF. Study supervision: JF, JH, MN.

참고 : 남성의 Wistar 쥐 (평균 체중 : 356 ± 44g, 10~14주 이전) 22 ~ 24 ° C와 12 시간 조명 / 펠렛 다이어트에 무료로 액세스, 일반 수돗물 어두운 사이클 동물 실에 보관 하였다 또한 제도적 지침을 준수 인간적인 치료를 받았다. 실험은 검토하고 핀란드 헬싱키 대학의 동물 복지위원회에 의해 승인되었다. 참고 : medetomidine 하이드로 클로라이드 (0.5 ㎎ / ㎏)와 케타민 염산염의 복강 내 주사 (50 ㎎ / ㎏)의 체중 적응 피하 주사로 쥐를 마취 다음 데모에서는 우리의 수술 방법은 다음과 같습니다. 발가락 - 핀치 반사의 부족에 대한 테스트는 쥐가 완전히 마취되어 있는지 확인합니다. 예를 클로르헥시딘에 대한, 중 알코올이나 물, 눈 연고를 적용 수술 부위를 클립하고, 적절한 소독제로 피부를 청소하십시오. 보호 복, 헤드 커버 및 얼굴에 넣어 손을 씻으십시오마스크 및 무균 수술 장갑. 무균 수술 환경을 유지하는 수술 보조 지원을하고 (표 1에 표시) 수술의 특성을 문서화 할 수 있습니다. 유해 자극 (발가락 핀치 테스트)에 호흡, 심장 박동, 반응에 따라 수술 중 마취 15 분마다의 깊이를 모니터링합니다. 부 프레 노르 핀 (0.03 ㎎ / ㎏)의 피하 주사는 수술 후 진통을위한 것으로 매 12 시간 필요한 경우 반복 하였다. 1 하드웨어, 소모품, 및 위치 <ol><li> 조용하고 작은 동물 수술 방을 유지 무균, 23 + 3 ° C의 실내 온도를 유지한다. 다음과 같은 최소한의 장비가 필요한 실험 동맥류 수술을 수행하려면 : <ol><li> 이상적으로 보조 범위와 디지털 현미경 카메라가 장착 된 테이블 위에 수술 현미경을 사용합니다. 실험실 벤치를 보호하기 위해 비 다공성 재사용 운영 표면과 청소 가능 악기 표면을 사용합니다. </li><li&gt; 같은 피부 소독제, 생리 식염수, 크고 작은 거즈 면봉과 9-0 마이크로 봉합, 5-0 비 흡수성, 3-0 흡수성 봉합사를 포함하여 봉합사와 같은 소모품을 준비합니다. </li><li> 외과 용 가위, 조직 겸자, 연부 조직 확장기 또는 자체 유지 견인기, 두 개의 모기 외과 클램프 : 다음과 같은 표준 수술 도구를 사용합니다. </li><li> 곡선 미세 바늘 홀더, 곡선 하나와 두 개의 직선 microforceps하고, 직선 또는 곡선 microscissor ​​: 포함 기본 미세 악기 세트를 사용합니다. </li><li> 수술 중 끈적하고 깨끗한 장비를 유지하기 위해 멸균 식염수로 가득 신장 접시에 미세 악기를 보관하십시오. 신장 요리는 고무 매트 또는 마이크로 악기의 선단의 손상을 방지하기 위해 수술 장갑으로 패딩된다. 모든 공급 멸균 및 절차는 실험 동물에서 생존 수술에 대한 현재의 권장 사항에 따라 무균 기술로 수행되었는지 확인 <sup&gt; 8-10. </li><li> 또한, 혈관 클립 어플리케이터 세 외상 임시 혈관 클램프를 사용한다. 그것은 사용 클램프 래트 대동맥 매우 얇은 벽으로 부상을 방지 낮은 닫는 힘이 중요하다. 또한 반 밀리미터 스케일 바, 작은 색깔의 고무 패드, 짧은 무딘 바늘 통치자를 준비합니다. </li><li> , 앙와위에서 쥐를 배치로 전면을 고정화하고 피부에 스트레칭이나 압축을 적용하지 않고 수술 테이프로 발을 뒷다​​리, 그리고 뒷면의 목재 영역 아래에 배치하여 두꺼운 마커 또는 소작 펜으로 자신의 등을 구부리십시오. 그것은 미세 문합을 용이 infrarenal 대동맥 복막 노광 및 접근성을 향상시키기 위해 가능한 한 많은 요추 전만을 얻는 것이 중요하다. 이 위치는 복부 대동맥 동맥류 작성을 권장하지만, 흉부 이식 수확에 필요한되지 않습니다. </li></ol></li></ol> 2 이식 수확 <ol><li> U파인더 전신 마취, 흉강을 열고 (이식 허혈 시작 시간). 쥐가 다음 단계를 진행하기 전에 응답하지 않는 것을 확인하기 위해 유해 발가락 핀치를 적용합니다. midventral 복벽을 통해 자르고, 단지 간 위에 진동판을 식별하고, 흉곽에 대한 액세스를 허용하도록 진동판의 하부에서 결합 조직을 잘라. 리브의 실수로 큰 위, 아래로 무딘면, 그냥 일cm 왼쪽과 흉곽의 정중선의 오른쪽 흉강을 엽니 다. 폐는 심장의 오른쪽에 동원된다. 케타민 hydrochloride.Pulmonary 트렁크 왼쪽 쇄골 하 정맥의 심장 내 주입, 왼쪽 뇌 대정맥과 했나봐하여 쥐를 희생하고 azygous 정맥 근위 흉부 대동맥의 수확을 방해. </li><li> 꼬리는 눈에 띄는 혈관에 마이크로 가위 microforceps를 사용하여 하행 흉부 대동맥 박리를 시작하는 좋은 엔트리 포인트가있다. </li><li> 흉부 대동맥 B를 추적위쪽으로 모기 외과 클램프와 부드러운 무딘 후퇴와 절개에 의한 대동맥 궁에 가슴의 등쪽 벽에서 ACK. </li><li> 클램프 한 다음 가위로 정맥을 잘라. 혈관에 클램프를 유지하고 기본 대동맥 궁을 노출 트랙터로 사용합니다. </li><li> 단지 대동맥을 떠나 첫 번째 늑간 동맥 위에 비 흡수성 6-0 실크 봉합사를 놓습니다. </li><li> 단지 왼쪽 쇄골 하 동맥 아래에 다음 합자 아래 하행 대동맥을 잘라. 트리밍은 수직 표준화 동맥류 형상을 얻기 위해 수행 될 수 있고, 또는 필요한 경우, 대동맥 동맥류와의 축 사이의 소정 각도를 얻기 위해. 폭과 길이 이식을 측정합니다. NOTE : 수확 역시 즉시 이식받는 쥐에 이식하거나, 상기 그래프트 벽의 탈세 포화를 달성하기 위하여 처리 될 수있다. Decellularized 이식은 나중에 다시 주입 (그림 1)까지 -4 섭씨 온도에서 저장 될 수있다. 목동맥류 벽의 전자 탈세 포화는 11를 확대 동맥류 걸리기 쉬운 것으로 나타났다. </li></ol> 3 이식 탈세 포화 <ol style="margin-left: 40px;"><li> 정지 기증자 이식 인산염에 C ° -4 완충 식염수. </li><li> 다음 날, 이식을 녹여 상온에서 정제 및 탈 이온수로 세척하고, 0.1 % 황산 도데 실 나트륨에 37 ° C에서 10 시간 동안 배양한다. </li><li> 마지막으로, 교반과 함께 황산 도데 실 나트륨 처리 이식을 세 번 씻어 인산염 완충 생리 식염수에 다시 냉동 및하시오 -4 ° C 사용할 때까지. </li></ol> 4 동맥류 만들기 <ol style="margin-left: 40px;"><li> 복부 대동맥의 해부 <ol><li> 동물을 마취 한 후 수술 부위에서 털을 잘라 내고 적합한 살균제로 피부를 깨끗하게. 종래의 피부 절개에 토인 핀치 응답의 부족에 대한 시험. 성기에 절개 1cm 근위 시작 전N midventral 위치 (단계 : 시작 시간). 조심스럽게 기본 근육으로부터 피부를 구분합니다. 흉골 아래 1~2cm 최종 해부. </li><li> 조심스럽게 단단히 기본 장기에 손상을 방지하기 위해 기본이되는 복부 근육을 잡아 당깁니다. 칼 모양의 프로세스에 위쪽으로 원격 교육의 알바을 따라 종 방향 절단을 확장 및 방광의 수준에서 꼬리 방향으로 끝난다. </li><li> 부드럽게 복막 공간에 대한 액세스를 용이하게하기 위해 그것을 비우기 방광에 압력을 적용한다. </li><li> 소장하고 오른쪽 또는 왼쪽으로 눈에 띄는 맹장 이동합니다. 복강의 왼쪽 하단에있는 대장에게 즉 하행 결장을 확인합니다. </li><li> 등쪽 체벽의 넓은 노출을 허용하는 소장 및 두개골 방향으로 하강 콜론 사이의 인대를 잘라. 떨어져 창자를 보유하는 자체 유지 견인기를 놓습니다. </li><li> 엔드 - 투 - 사이드 동맥류 문합 난의 이상적인 위치신장과 iliolumbar 맥 사이의 레벨에있는 s의. 복부 대동맥은 지방 조직에 포함 된 복막을있다. 해부하는 동안 쌍 거의 투명 요관 및 고환의 혈관에 특히주의를 기울이십시오. </li><li> 내장의 추가 후퇴가 필요한 경우, 큰 스왑 거즈를 사용한다. 쥐의 허리 아래 소작 펜 또는 유사 물체를 배치하여 위치하는 동안 유도 요추 전만은 크게 장 후퇴의 필요성을 감소시킨다. </li><li> 등쪽 체벽의 복부 표면은 얇은 정수리 복막으로 덮여있다. 이가 개방되면, 바로 아래 대동맥을 시각화. 인접한 큰 혈관에서 복부 대동맥 조심 날카로운 무딘 절개 중에 혈관 벽의 손상을 방지하기 만 외막을 파악. </li><li> 가끔, 작은 척추 동맥은 복부 대동맥의 등면에서 분절 선박으로 일어나 준비를 방해합니다. 혈관의 결찰 및 절단은 옛 성은입니다동맥류 봉합 동안 역행 흘러 나오지 않도록 DED. 곡선 형 마이크​​로 핀셋을 사용하면 깊이 합자 배치를 용이하게 할 수있다. </li></ol></li><li> 엔드 - 투 - 측면 문합 <ol><li> 복부 대동맥 아래 색깔의 고무 패드를 넣고 작은 거즈 면봉을 대다. 계획된 문 합부의 수준에서 느슨한 결합 조직 및 외막을 제거합니다. </li><li> 첫째, 다음 근위부 문합에 복부 대동맥의 원위부 클램프 (대동맥 차단 시간을 시작). 이것은 용기의 충전을 보장 회사 및 후속 arteriotomy을 용이하게한다. </li><li> 직선 또는 곡선 마이크로 가위를 사용하여 arteriotomy를 수행합니다. 마이크로 집게 타원형를 잘라하기 위해 혈관 벽의 아주 작은 조각을 보유하고있다. </li><li> 끝이 무딘 바늘을 사용하여 두 방향으로 식염수로 완전히 동맥을 세척합니다. </li><li> (arteriotomy의 근위 및 원위 단부에서이 엔드 - 투 - 측면 문합이 봉합 제를 배치 문합 시작 시간). 가능하면 마이크로 포셉으로 혈관 벽의 잡지 마십시오. 각 봉합은 혈관벽의 모든 층을 통해 배치되어 있는지 확인합니다. </li><li> 중 연속 또는 중단 봉합사로 봉합을 수행합니다. 중단 봉합을 선택하면 먼저 뒷면 구 시방 봉합을 배치합니다. 후속 봉합사는 봉합사 최초 인접 시작 이격 될 수있다. 조심스럽게 외막을 잡고. 내막의 압착 / 파지을 피하십시오. </li><li> 다시 벽이 완료되면 잘못된 봉합의 문합의 endoluminal 부분을 확인합니다. 전방 측에 동일한 순서로 동일한 절차를 수행한다. 봉합 당 세 노트의 총의 첫번째가 너무 꽉 회사가 아닌 지 확인합니다. </li></ol></li><li> 지혈 및 폐쇄 <ol><li> 측면 문합에 단부 (끝 문합 시간)을 완료 한 후, 생리 식염수와 사이트 린스 및 (역류를 허용하는 제 1 단부 대동맥 시간과 종료 그래프트 허혈 TI 클램핑을 원위 클램프를 제거나). </li><li> 명백한 출혈 여분 스티치가 필요할 수있다 역류로부터 발생하는 경우 (지혈 개시 시간). 마이너 스며 경우, 거즈 면봉의 작은 조각을 이용하여 출혈 사이트 위에 부드러운 압력으로 지혈을 달성한다. </li><li> , 근위 혈관 클램프를 제거 한 번 더 문 합부를 씻어하고, 동맥류 돔에서 합자의 나머지 끝을 잘라. </li><li> 피크 동맥 맥파 중 동맥류의 볼륨 증가의 관찰에 의해 동맥류의 개통을 확인합니다. 직접 &quot;착유 테스트&quot;를 통해 말초 복부 동맥의 개통을 평가합니다. </li><li> 플라스틱 시트와 아래에있는 작은 거즈 면봉을 제거합니다. 생성 된 동맥류 내에서 맥동 혈액 소용돌이는 명확하게 볼 수 있습니다. </li><li> 작은 돌아 다니며 여전히 존재하는 경우 (지혈의 종료 시간) 추가 지혈을위한 지방 조직 또는 Spongostan의 작은 조각으로 문합 주위 봉합 라인을 커버. </li><li> 연부 조직 확장기와 거즈 면봉을 제거합니다.다시 올바른 위치에 소장, 맹장, 그리고 지방 질량을 놓습니다. </li><li> 5-0, 4-0, 또는 3-0 3-0 흡수성 polyfilament 봉합 (끝 동작 시간)으로 연속 봉합 기술을 사용하여 피부에 상처 폐쇄 다음 흡수성 또는 비 흡수성 봉합사를 사용하여 중간 선 복부 근육을 닫습니다. 참고 : 우리의 경험 쥐 비 흡수성 모노 필라멘트 봉합사보다 흡수성 피부 봉합을 허용합니다. </li></ol></li></ol>

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저자는 사용 된 약물 물질 또는 장치 중 임의 재정적 또는 상업적 관심이 없다.

주머니 모양 뇌동맥 동맥류의 복잡한 생물학에 대한 우리의 이해의 발전은 동물 모델 3,12,13 환자의 샘플 및 실험 연구에 실험 연구에 의해 보완 역학 및 임상 데이터의 분석에 따라 달라집니다. 예를 들면 쥐와 같은 작은 동물은 본질적으로 실험 주택의 낮은 비용과 관련, 전문 장비의 필요성을 줄일 수 있습니다. 쥐의 측벽 동맥류의 미세 창조를위한 60 분 미만의 평?...

주머니 모양 뇌동맥 동맥류의 파열은 뇌졸중, 영구적 인 신경 손상 또는 사망에 이르는 생명을 위협하는 출혈이 발생합니다. 파열이 중 미세 클리핑이나 혈관 동맥류 폐색을 방지 할 수있다. 동맥류 성장 및 파열을 방지하기 위해 의료 치료를 아직 확립되어 있지 않다. 주머니 모양 동맥류에 대한 실험 모델은 동맥 동맥류 및 새로운 치료 장치 및 전략의 테스트를위한 생물학을 연구하기 위해 필요하다. 이러한 목적을 위해, 다른 종에서 여러 가지 모델이 개발 한 간행되었다. 돼지, 개, 토끼의 큰 동맥류 모델은 바람직 복잡한 동맥류 아키텍처 1,2에서 혈관 혁신을 테스트하는 데 사용됩니다. 동맥류 뮤린 모델은, 반면에, 유전자 변형 종 3,4 연구 질문 테스트 허용 세포 및 분자 생물학에서 동맥류의 설명을 용이하게큰 종 1보다 훨씬 더 나은 수준. 혈관 트랜스 경동맥 및 트랜스 - 장골 장치 배포가 큰 쥐 제한 (&gt; 400~500g) 및보다 작은 2.0 mm 직경 5,6에서 1.5 mm를 스텐트 있지만, 스텐트는 복부 대동맥에 직접 삽입을 통해 배치 할 수 있습니다 실험 동맥류를 숨겨 세그먼트. 쥐 미세 복부 대 동맥류 측벽 모델을 사용하여 이전 작업은 테스트 소설 전성 장치에있는 그것의 타당성 및 동맥류 생물학 3,7의 분자 기초를 공부에서의 사용을 보여 주었다. 현재 게시 된 실험 동맥류 모델의 대부분은 고가의 장비, 특수 환경 (투시 기능을 예를 들면 멸균 조작 실), 중재 적 방사선 능력, 비싼 종의 사용을 필요로한다. 이러한 요구 사항은 이러한 모델의 광범위한 사용을 제한하고, M 개의 상이한 실험실에서 다른 모델의 사용으로 이어질akes 데이터 비교 및​​ 메타 분석 불가능하지는 않지만 어렵다. A, 간단한 강력하고 저렴한 실험 모델은 상이한 기관에서 유사한 결과를 얻기 위하여 여러 실험실에서 표준화 된 방식으로 사용할 수있는 표준화 된 도구로서 필요하다. 이러한 목적을 위해, 우리는 래트 대동맥 측벽 주머니 모양 동맥 동맥류 모델을 만들었다. 이 보고서의 목적은 필요한 장비에 대한 단계별 절차 지침, 정보를 제공하고, 쥐의 복부 대동맥 측벽 동맥류의 성공적인 미세 창조를위한 중요한 해부학 및 수술 특성을 설명하는 것입니다.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="752">
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:236px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Medetomidine</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Any genericon</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Ketamin</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Any genericon</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Buprenorphine</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>Any genericon</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Phosphate buffered saline</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Sodium dodecyl sulfate (0.1%)</td>
			<td style="width:236px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">3-0 resorbable suture</td>
			<td style="width:236px;">Ethicon Inc., USA</td>
			<td><a name="RANGE!C7">VCP824G</a></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">5-0 non absorbable suture</td>
			<td style="width:236px;">Ethicon Inc., USA</td>
			<td>8618G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">6-0 non absorbable silk suture</td>
			<td style="width:236px;">B. Braun, Germany</td>
			<td style="width:119px;">C0761060</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">9-0 nylon micro suture</td>
			<td style="width:236px;">B. Braun, Germany</td>
			<td style="width:119px;">G1118471</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Spongostan</td>
			<td style="width:236px;">Ethicon Inc., USA</td>
			<td style="width:119px;">MS0002</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Operation microscope</td>
			<td style="width:236px;">Leica , Germany</td>
			<td style="width:119px;">M651</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Digital microscope camera</td>
			<td style="width:236px;">Sony, Japan</td>
			<td style="width:119px;">SSC-DC58AP</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Standard surgical instruments</td>
			<td style="width:236px;">B. Braun, Germany</td>
			<td style="width:119px;">Multiple</td>
			<td>See protocol 1.4</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Microsurgical instruments</td>
			<td style="width:236px;">B. Braun, Germany</td>
			<td style="width:119px;">Multiple</td>
			<td>See protocol 1.5</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Vascular clip applicator</td>
			<td style="width:236px;">B. Braun, Germany</td>
			<td style="width:119px;">FT495T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:231px;">Temporary vascular clamps</td>
			<td style="width:236px;">B. Braun, Germany</td>
			<td style="width:119px;">FT250T</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;">Graph Pad Prism statistical software&#160;</td>
			<td style="width:236px;">GraphPad Software, San Diego, California, USA</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td>V 6.02 for Windows</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

the helsinki rat microsurgical sidewall aneurysm model

실험 동맥류 모델은 임상에 도입되기 전에 새로운 수술 및 혈관 내 치료 방법 및 장치를 테스트하기 위해 필요하다. 또한, 실험 모델은 주머니 모양 동맥류의 파열로 이어지는 복잡한 동맥류 생물학을 규명하기 위해 필요하다. 주머니 모양 동맥류에 대한 실험 모델의 몇 가지 다른 종류의 다른 종에 설립되었다. 그들 중 대부분은, 그러나, 그들의 광범위한 사용을 제한하는, 특별한 기술, 고가의 장비 또는 특수 환경을 필요로한다. A, 간단한 강력하고 저렴한 실험 모델은 다양한 기관에서 표준화 된 방식으로 사용할 수있는 표준화 된 도구로서 필요하다. 미세 쥐의 복부 대 동맥류 측벽 모델은 새로운 혈관 내 치료 전략 및 표준화하고 저렴한에서 동맥류 생물학의 분자 기준을 모두 공부 할 수있는 가능성을 결합방법. 모양, 크기, 형상에 의한 표준화 된 이식은 기증자 쥐의 하행 대동맥에서 수확 후 syngenic받는 사람 쥐에 이식된다. 동맥류는 지속적으로 엔드 - 투 -면을 봉합하거나 infrarenal 복부 대동맥에 9-0 나일론 봉합사를 중단한다. 우리는 필요한 장비에 대한 단계별 절차 지침, 정보를 제공하고, 쥐의 복부 대동맥 측벽 동맥류의 성공적인 미세 창조를위한 중요한 해부학 및 수술 세부 사항을 논의.

파일럿 시리즈는 14 쥐를 구성. 그 후 84 동물의 총은 2012 년 추가 29 동물 동맥 주머니 모양 이식을위한 기증자 역임 월과 9 월 사이에 몇 가지 연구 프로젝트에 대한 발표 프로토콜에 따라 운영되었다. 나머지 실험 수확과 동일한 성별, 스트레인, 체중, 연령의 래트를 사용하여 이전의 실험에서 저장된 전처리 이식편을 사용하여 수행 하였다. 체중, 전체 운전 시간, 대동맥 차단...

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The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model

Microsurgical sidewall aneurysms in rats are created by end-to-side anastomosis of an aortic graft to the abdominal aorta. We present step-by-step instructions and discuss anatomical and surgical details for successful experimental saccular aneurysm creation.

헬싱키 쥐 미세 측벽 동맥류 모델

Experimental saccular aneurysm models are necessary for testing novel surgical and endovascular treatment options and devices before they are introduced ...

the-helsinki-rat-microsurgical-sidewall-aneurysm-model

Research

JoVE Journal

Medicine

12.1K 조회수.  University of Helsinki, Helsinki, Finland. Microsurgical sidewall aneurysms in rats are created by end-to-side anastomosis of an aortic graft to the abdominal aorta. We present step-by-step instructions and discuss anatomical and surgical details for successful experimental saccular aneurysm creation.

비디오: The Helsinki Rat Microsurgical Sidewall Aneurysm Model

Microsurgical Venous Pouch Arterial-Bifurcation Aneurysms in the Rabbit Model: Technical Aspects

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials have shown disappointing long-term results with unacceptable high rates of aneurysm recanalization and delayed aneurysm rupture.2 To overcome these problems, animal experimental studies are crucial for the development of better endovascular devices.3-5
Several animal models in rats, rabbits, canines and swine are available.6-8 Comparisons of the different animal models showed the superiority of the rabbit model with regard to hemodynamics and comparability of the coagulation system and cost-effectiveness.9-11 
The venous pouch arterial bifurcation model in rabbits is formed by a venous pouch sutured into an artificially created true bifurcation of both common carotid arteries (CCA). The main advantage of this model are true bifurcational hemodynamics.12 The major drawbacks are the sofar high microsurgical technical demands and high morbidity and mortality rates of up to 50%.13 These limitations have resulted in less frequent use of this aneurysm model in the recent years. These shortcomings could be overcome with improved surgical procedures and modified peri- and postoperative analgetic management and anticoagulation.14-16 Our techniques reported in this paper demonstrate this optimized technique for microsurgical creation of arterial bifurcation aneurysms.

An optimized technique for the microsurgical creation of arterial bifurcation aneurysms mimicking bifurcation human cerebral aneurysms is described. A venous pouch is sutured into an artificially created true bifurcation of both common carotid arteries. Facilitated microsurgical techniques and aggressive postoperative anticoagulation and analgesia lead to minimized morbidity rates and high aneurysm patency rates.

토끼 모델에서 Microsurgical 정맥 주머니 아티 - 분기점의 동맥류 : 기술적인 관점

For ruptured human cerebral aneurysms endovascular embolization has become an equivalent alternative to aneurysm clipping.1 However, large clinical trials ...

연구

의학

A New Murine Model of Endovascular Aortic Aneurysm Repair

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of Abdominal aortic aneurysm (AAA) pathophysiology. There is no abdominal aortic aneurysm endograft exclusion model cheap and reproducible, which would allow deep investigations of AAA before and after treatment. We hereby describe how to induce, and then to exclude with a covered coronary stentgraft an abdominal aortic aneurysm in a rat. The well known elastase induced AAA model was first reported in 19901 in a rat, then described in mice2. Elastin degradation leads to dilation of the aorta with inflammatory infiltration of the abdominal wall and intra luminal thrombus, matching with human AAA. Endovascular exclusion with small covered stentgraft is then performed, excluding any interactions between circulating blood and the aneurysm thrombus. Appropriate exclusion and stentgraft patency is confirmed before euthanasia by an angiography thought the left carotid artery. Partial control of elastase diffusion makes aneurysm shape different for each animal. It is difficult to create an aneurysm, which will allow an appropriate length of aorta below the aneurysm for an easy stentgraft introduction, and with adequate proximal and distal neck to prevent endoleaks. Lots of failure can result to stentgraft introduction which sometimes lead to aorta tear with pain and troubles to stitch it, and endothelial damage with post op aorta thrombosis. Giving aspirin to rats before stentgraft implantation decreases failure rate without major hemorrhage. Clamping time activates neutrophils, endothelium and platelets, and may interfere with biological analysis.

Histological and biochemical modifications after aneurysm endograft exclusion are still unclear. We describe a new model of endograft implantation on a murine aneurysm. Through thrombus analysis with and without persistant circulating blood stream interface, and new endovascular biomaterials evaluation, this model will help to better understand endovascular aneurysm exclusion pathobiology.

혈관 동맥류 수리의 새로운 쥐과 모델

Endovascular aneurysm exclusion is a validated technique to prevent aneurysm rupture. Long-term results highlight technique limitations and new aspects of ...

A Novel Microsurgical Model for Heterotopic, En Bloc Chest Wall, Thymus, and Heart Transplantation in Mice

Exploration of novel strategies in organ transplantation to prolong allograft survival and minimizing the need for long-term maintenance immunosuppression must be pursued. Employing vascularized bone marrow transplantation and co-transplantation of the thymus have shown promise in this regard in various animal models.1-11 Vascularized bone marrow transplantation allows for the uninterrupted transfer of donor bone marrow cells within the preserved donor microenvironment, and the incorporation of thymus tissue with vascularized bone marrow transplantation has shown to increase T-cell chimerism ultimately playing a supportive role in the induction of immune regulation. The combination of solid organ and vascularized composite allotransplantation can uniquely combine these strategies in the form of a novel transplant model. Murine models serve as an excellent paradigm to explore the mechanisms of acute and chronic rejection, chimerism, and tolerance induction, thus providing the foundation to propagate superior allograft survival strategies for larger animal models and future clinical application. Herein, we developed a novel heterotopic en bloc chest wall, thymus, and heart transplant model in mice using a cervical non-suture cuff technique. The experience in syngeneic and allogeneic transplant settings is described for future broader immunological investigations via an instructional manuscript and video supplement.

To study combined solid organ and vascularized composite allotransplantation, we describe a novel heterotopic en bloc chest wall, thymus, and heart transplant model in mice using a cervical non-suture cuff technique.

마우스의 소설 미세 수술 이소성 모델, 욕실 공산권 가슴 벽, 흉선, 및 심장 이식

Exploration of novel strategies in organ transplantation to prolong allograft survival and minimizing the need for long-term maintenance immunosuppression ...

The Dimethylnitrosamine Induced Liver Fibrosis Model in the Rat

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg dimethylnitrosamine (DMN), given intraperitoneally for three consecutive days per week. Intraperitoneal injections were performed in the fume hood as DMN is a known hepatoxin and carcinogen. The model has several advantages. Firstly, liver changes can be studied sequentially or at particular stages of interest. Secondly, the stage of liver disease can be monitored by measurement of serum alanine aminotransferase (ALT) and aspartate aminotransferase (AST) enzymes. Thirdly, the severity of liver damage at different stages can be confirmed by sacrifice of animals at designated time points, followed by histological examination of Masson&#39;s Trichome stained liver tissues. After four weeks of DMN dosing, the typical fibrosis score is 5 to 6 on the Ishak scale. The model can be reproduced consistently and has been widely used to assess the efficacy of potential anti-fibrotic agents.

We describe a method to produce an animal model of liver fibrosis in the rat, and assess the degree of fibrosis by histological examination of the liver. The model can be used to study the development of liver disease as well as to test the efficacy of potential anti-fibrotic agents.

쥐에이 dimethylnitrosamine 유도 된 간 섬유화 모델

Four to six week old, male Wistar rats were used to produce animal models of liver fibrosis. The process requires four weeks of administration of 10 mg/kg ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Myography 와이어를 사용 하 여 마우스 Mesenteric 동맥의 isometric 수축 측정

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to injury. In fact, the most common type of eye injury found in clinic is a corneal abrasion. Here, we utilize an ocular burr to induce an abrasion resulting in removal of the corneal epithelium in vivo on anesthetized mice. This method allows for targeted and reproducible epithelial disruption, leaving other areas intact. In addition, we describe the visualization of the abraded epithelium with fluorescein staining and provide concrete advice on how to visualize the abraded cornea. Then, we follow the timeline of wound healing 0, 18, and 72 h after abrasion, until the wound is re-epithelialized. The epithelial abrasion model of corneal injury is ideal for studies on epithelial cell proliferation, migration and re-epithelialization of the corneal layers. However, this method is not optimal to study stromal activation during wound healing, because the ocular burr does not penetrate to the stromal cell layers. This method is also suitable for clinical applications, for example, pre-clinical test of drug effectiveness.

This protocol describes a method to inflict an abrasion to the ocular surface of the mouse, and to follow the wound healing process thereafter. The protocol takes advantage of an ocular burr to partially remove the surface epithelium of the eye in anaesthetized mice.

각 막에 대 한 모델로 눈 버와 각 막 상피 마모 상처 치유

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...

An Ex Vivo Tissue Culture Model for Fibrovascular Complications in Proliferative Diabetic Retinopathy

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No current animal models of diabetes and oxygen-induced retinopathy develop the full-range progressive changes manifested in human proliferative diabetic retinopathy (PDR). Therefore, understanding of the disease pathogenesis and pathophysiology has relied largely on the use of histological sections and vitreous samples in approaches that only provide steady-state information on the involved pathogenic factors. Increasing evidence indicates that dynamic cell-cell and cell-extracellular matrix (ECM) interactions in the context of three-dimensional (3D) microenvironments are essential for the mechanistic and functional studies towards the development of new treatment strategies. Therefore, we hypothesized that the pathological fibrovascular tissue surgically excised from eyes with PDR could be utilized to reliably unravel the cellular and molecular mechanisms of this devastating disease and to test the potential for novel clinical interventions. Towards this end, we developed a novel method for 3D ex vivo culture of surgically-excised patient-derived fibrovascular tissue (FT), which will serve as a relevant model of human PDR pathophysiology. The FTs are dissected into explants and embedded in fibrin matrix for ex vivo culture and 3D characterization. Whole-mount immunofluorescence of the native FTs and end-point cultures allows thorough investigation of tissue composition and multicellular processes, highlighting the importance of 3D tissue-level characterization for uncovering relevant features of PDR pathophysiology. This model will allow the simultaneous assessment of molecular mechanisms, cellular/tissue processes and treatment responses in the complex context of dynamic biochemical and physical interactions within the PDR tissue architecture and microenvironment. Since this model recapitulates PDR pathophysiology, it will also be amenable for testing or developing new treatments.

Here, we present a protocol to study the pathophysiology of proliferative diabetic retinopathy by using patient-derived, surgically-excised, fibrovascular tissues for three-dimensional native tissue characterization and ex vivo culture. This ex vivo culture model is also amenable for testing or developing new treatments.

증식 성 당뇨 망막 증에 Fibrovascular 합병증에 대 한 전 비보 조직 문화 모델

Diabetic retinopathy (DR) is the most common microvascular complication of diabetes and one of the leading causes of blindness in working-age adults. No ...

Murine Surgical Model of Topical Elastase Induced Descending Thoracic Aortic Aneurysm

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. An aneurysm forms as a result of progressive weakening and eventual dilation of the aorta, which can rupture or tear once it reaches a critical diameter. Aneurysms of the descending aorta in the chest, called descending thoracic aortic aneurysms (dTAA), make up a large proportion of aneurysm cases in the United States. Uncontained dTAA rupture is almost universally lethal, and elective repair has a high rate of morbidity and mortality. The purpose of our model is to study dTAA specifically, to elucidate the pathophysiology of dTAA and to search for molecular targets to halt the growth or reduce the size of dTAA. By having a murine model to study thoracic pathology precisely, targeted therapies can be developed to specifically test dTAA. The method is based on the placement of porcine pancreatic elastase (PPE) directly on the outer murine aortic wall after surgical exposure. This creates a destructive and inflammatory reaction, which weakens the aortic wall and allows for aneurysm formation over weeks to months. Though murine models possess limitations, our dTAA model produces robust aneurysms of predictable size. Furthermore, this model can be used to test genetic and pharmaceutical targets which may arrest dTAA growth or prevent rupture. In human patients, interventions such as these could help avoid aneurysm rupture, and difficult surgical intervention.

We describe a surgical protocol to consistently induce robust descending thoracic aortic aneurysms in mice. The procedure involves left thoracotomy, thoracic aorta exposure, and placement of a sponge soaked in porcine pancreatic elastase on the aortic wall.

국소 엘라스타아제의 뮤린 외과 모델은 내림차순 흉부 대동맥류를 유도

According to the Center for Disease Control, aortic aneurysms (AAs) were considered a leading cause of death in all races and both sexes from 1999-2016. ...

Porcine Model of Infrarenal Abdominal Aortic Aneurysm

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal abdominal aortic aneurysms (AAA) in swine. To achieve this, we use a combination of balloon angioplasty, elastase and collagenase, and a lysyl oxidase inhibitor, called &#946;-aminopropionitrile (BAPN), to create clinically significant infrarenal aortic aneurysms, analogous to human disease.
Noncastrated male swine are fed BAPN for 7 days prior to surgery to achieve a steady state in the blood. A midline laparotomy is performed and the infrarenal aorta is circumferentially dissected. An initial measurement is recorded prior to aneurysm induction with a combination of balloon angioplasty, elastase (500 units)/collagenase (8000 units) perfusion, and topical elastase application. Swine are fed BAPN daily until terminal procedure on either postoperative day 7, 14, or 28, at which time the aneurysm is measured, and tissue procured. BAPN + surgery pigs are compared to pigs that underwent surgery alone.
Swine treated with BAPN and surgery had a mean aortic dilation of 89.9% &#177; 47.4% at day 7, 105.4% &#177; 58.1% at day 14, and 113.5% &#177; 30.2% at day 28. Pigs treated with surgery alone had significantly smaller aneurysms compared to BAPN + surgery animals at day 28 (p &#60; 0.0003). The BAPN + surgery group had macroscopic and immunohistochemical evidence of end stage aneurysmal disease.
Clinically significant infrarenal AAA can be induced using balloon angioplasty, elastase/collagenase perfusion and topical application, supplemented with oral BAPN. This model creates large, clinically significant AAA with hallmarks of human disease. This has important implications for the elucidation of AAA pathogenesis and testing of novel therapies and devices for the treatment of AAA. Limitations of the model include variation in BAPN ingested by swine, quality of elastase perfusion, and cost of BAPN.&#160;

This novel model creates robust infrarenal abdominal aortic aneurysms in swine using a combination of balloon angioplasty, elastase/collagenase perfusion, topical elastase application, and oral compound &#946;-aminopropionitrile administration, which interferes with collagen cross-linking.

돼지 모델 의 관막 복 대동맥류

Large animal models to study abdominal aortic aneurysms are sparse. The purpose of this model is to create reproducible, clinically significant infrarenal ...

Vessel-Sparing Microsurgical Longitudinal Intussusception Vasoepididymostomy to Treat Epididymal Obstructive Azoospermia

The epididymis is a common site of obstruction in obstructive azoospermia (OA). Vasoepididymostomy has become an important method for the treatment of epididymal OA since 2000. There are two challenges in classic microscopic vasoepididymostomy. First, anastomosis of the vas deferens and epididymis is performed with double-needle sutures. However, there is a lack of good-quality and cost-effective double-needle sutures in China, which leads to increased difficulty and poor success rates of anastomosis. Second, the separation of the vas deferens does not retain vasculature, although the vas deferens vasculature plays an important role in the blood supply to the vas deferens, epididymis, and testis. This affects the blood supply to the anastomotic area and epididymis.
Therefore, this team has made innovative improvements to address these problems. Good-quality, cost-effective, single-needle sutures, which are easy to purchase in China and other countries, were used in microsurgical longitudinal intussusception vasoepididymostomy. This can optimize the operation procedure and shorten the operation time while ensuring the success rate of the anastomosis. The surgical method of preserving the vas deferens vessels was innovatively proposed because the etiology of epididymal OA is mostly inflammatory in China. The protection of the blood supply to the vas deferens and epididymis is maximized using microsurgical forceps to separate and protect the vasculature. Patency reached 81.7% in the postoperative follow-up, indicating a better surgical treatment effect.

The present protocol describes a vessel-sparing, longitudinal intussusception vasoepididymostomy using readily available single-needle sutures in China, a safe and effective procedure, which may improve patients' patency and natural pregnancy rates.

혈관 절약 미세 외과 종방향 Intussusception 부고환 폐쇄성 Azoospermia 치료를위한 혈관 부고환 절제술

The epididymis is a common site of obstruction in obstructive azoospermia (OA). Vasoepididymostomy has become an important method for the treatment of ...

Methods Article

헬싱키 쥐 미세 측벽 동맥류 모델