Name: an in vivo murine sciatic nerve model of perineural invasion
Uploaded: 2018-04-23T13:00:00.000+00:00
Duration: 9 min 55 s
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저자는 분자 세포학 시설 및 기념 슬로 안 Kettering 암 센터의 동물 시설에서 제공 하는 기술 서비스를 인정 합니다. 이 작품 (R.J. 웡)에 NIH 교부 금 CA157686 및 P30 CA008748에 의해 지원 되었다 (기념 슬로 안 Kettering 암 센터 지원 그랜트).

동물 주제와 절차의 모든 기관 동물 관리 및 사용 위원회 기념 슬로 안 Kettering 암 센터에 의해 승인 되었다.
1입니다. 암 세포의 준비
<ol><li>37 ° c.에 5 분 동안 0.25 %trypsin 수확 하위 confluent Panc02 h 7 셀 15 mL 원심 분리기 튜브에 세포를 수집 합니다. 참고: 셀에서에서 재배 되 고 T-225 플라스 크, 포함 약 12 x 10 80 %confluency 및 4 mL trypsin에 플라스 크 당6 셀/플라스 크를 사용 합니다.</li>
	<li>5 분 세척 resuspending 셀에 의해 셀 펠 렛의 1 mL의 PBS에 pipetting 아래로 두 번), (여 고 전송 현 탁 액 1.5 mL microcentrifuge 튜브 얼음에 4 ° C에서 900 g x에서 셀 원심</li>
	<li>5 분 동안 4 ° C에 900 g x에서 다시 셀 원심 고는 펠 렛을 방해 하지 않고는 상쾌한 삭제. 사출까지 얼음에 수송과 셀을 계속.</li>
</ol>2입니다. 마우스 및 수술 준비
참고: 8 주 오래 된, 남성 및 여성 C57BL/6J 쥐가이 연구에 사용 됩니다. 수술 조건 우리의 기관의 IACUC 규칙을 따릅니다. 악기 소독, 수술 작업 표면 소독 동물 소독 하 고 외과 의사 멸 균 장갑 착용.
<ol><li>수술 전날에 2 %isoflurane 사용 하 여 마우스를 anesthetize 하 고 얇은 면도칼 또는 화학 머리 제거 에이전트 등 쪽 측에 대 퇴 골의 길이 따라 모피를 제거 합니다.</li>
	<li>수술 당일, 유도 실에서 2 %isofluorane 사용 하 여 마우스를 anesthetize. 발가락 꼬집어 자극과 응답의 부족에 의해 anesthetization를 확인 합니다.</li>
	<li>수 의사 연 고 마 취 건조를 방지 하기 위해 눈에 적용 됩니다.</li>
	<li>그것의 복 부 측에 마 취 마우스를 놓고 부드럽게 주입을 다리에 가벼운 긴장을 만들 저자 극성 테이프와 각 다리를 확보 합니다. 마 취 isoflurane 정밀 기화와 원뿔 통해 전달 사용 하 여 유지 됩니다.</li>
	<li>70% 알코올로 Betadine, 사출 사이트를 다시 청소 하십시오. 이 프로세스를 두 번 더 반복 합니다. 느슨한 머리카락 수술 필드에 남아 있는지 확인 합니다.</li>
	<li>작은 위 아래 및 대 퇴 골에 병렬 약 2 m m 1 cm 절 개를 확인 합니다. 피부 아래 근육을 노출 하는 옆 집게와 철회.</li>
	<li>좌 골 신경은 대 둔 근과 팔 뚝 femoris 근육에 깊은 실행 됩니다. 작은 위 fascial 비행기에 따라이 두 근육을 분리 하 고 노출 아래 좌 골 신경. 무뚝뚝한 절 개를 사용 하 여 주변 근육에서 신경 무료.</li>
	<li>10 μ 주사기로 펠 릿에서 암 세포 (약 5만 셀)의 3 μ를 그립니다. 참고: 컨트롤 또는 PBS의 3 μ를 그립니다.</li>
	<li>지원에 대 한 주입 시점에서 신경 아래 작은 금속 주걱을 놓습니다. 해 현미경으로 시각화, 아래 바늘 삽입 시 가능한 신경에 평행으로 유지 하는 금속 베이스에 대 한 신경에 바늘을 삽입 합니다. 신경의 뒷면을 통해 펑크를 주의 해야 합니다. 이 과정을 통해 가능한 한 많은 신경의 처리를 최소화 합니다.</li>
	<li>이상 5 신경으로를 천천히 주입 s. 주입 영역에서 전구 형성 좋은 주사를 나타냅니다. 다음 3 자리에 바늘을 두고 바늘을 부드럽게 제거 하기 전에 s. 3 장소에 바늘을 유지에서 신경 세포의 역류를 최소화 하는 s. 참고: 주입은 말 초 신경이 나 척수 쪽으로 수행할 수 있습니다. 그것은 실험의 집합 내에서 일관성을 유지 해야 합니다. 세포 밖으로 유출, 동물 실험의 분석에 포함 되지 해야 합니다. 경험, 이러한 이벤트는 매우 드문.</li>
	<li>신경을 원래 위치로 돌아갑니다. 커버 overlying 근육 신경. 적절 한 진통으로 쥐를 처리 한 다음 5-0 나일론 봉합 피부를 닫습니다.</li>
	<li>그것은 완전히 마 취에서 깨어난다 때까지 마우스를 복구 하는 동안 관찰에 대 한 깨끗 한 장에 혼자 놓습니다. 참고: 그것은 완전 한 의식 회복을 동물에 대 한 5-15 분 걸립니다. 동물 sternal recumbency를 유지 하기 위해 충분 한 의식 회복 때까지 무인 왼쪽입니다. 동물 다른 동물을 완벽 하 게 복구 될 때까지 회사에 반환 되지 않습니다. 그 후, 복구 적어도 한 번 모든 24 h 72 h에 대 한 평가.</li>
</ol>3. 좌 골 신경 추출
<ol><li>Postop 날 #7, CO2마우스를 안락사. 그것의 복 부 측에 마우스를 놓고 핀을 사용 하 여 원심 사지를 안정화 합니다.</li>
	<li>주입 된 사지 및 몸통의 등 쪽 측에 피부를 제거 합니다.</li>
	<li>무뚝뚝한 절 개를 사용 하 여, 좌 골 신경은 근육에 깊은 노출.</li>
	<li>장 골과 천 골 사이 신경 과정. 척수 영역에서 신경에 액세스 하려면, 두 개의 뼈를 구분 합니다. 좌 골 신경은 좁은 지역에 폐쇄가 위를 먼저 삽입 한 다음 마우스를 잡고가 위를 엽니다. 섬세 한 수 고 해 부 동안 좌 골 신경의 무결성을 유지 합니다.</li>
	<li>조심 스럽게 좌 골 신경 distally, 대 퇴 골의 끝을 proximally 척수 해 부.</li>
	<li>참고: 침공된 신경은 매우 연 약하고 긴장 아래 속보 또는 강력한 처리 하는 경향이 있다.</li>
	<li>신경의 선단부를 절단 하 여 수확. 인접 한 조직에서 그것을 해방 하는 동안 신경을 조심 스럽게 들어올립니다. 척추에서 그것의 출구에 최대한 가깝게 인접 끝에 신경을 잘라.</li>
	<li>기록 후 버 니 어 캘리퍼스를 사용 하 여 침략의 총 길이. 이 거시적인 추정만 나타내는 것입니다.</li>
</ol>4. 신경 처리 및 정량화
<ol><li>10 월 복합에 해 부 신경을 포함 합니다. 경도 신경을 확실 하 고 가능한 몰드의 바닥에 평평.</li>
	<li>편지 P 및 d.를 표시 하 여 신경의 근 위 및 원심 측 카세트에 표시</li>
	<li>그들은 하지 즉시 sectioned 하는 경우 드라이 아이스, 위에 포함 된 신경을 배치 합니다. 샘플 몇 주 동안-80 ° C에서 보존 될 수 있습니다.</li>
	<li>섹션 샘플 Cryostat 톰을 사용 하 여 유리 슬라이드에 5 μ m 두께 장소 섹션에서. 만약에 가능 하다 면, 슬라이드 당 2 신경 섹션 적합. 신경의 근 위 쪽을 나타냅니다.</li>
	<li>H & E12얼룩을 사용 하 여 슬라이드를 얼룩.</li>
	<li>디지털 고해상도 디지털 데이터를 제공 하는 슬라이드 스캐너로 얼룩진된 신경 섹션을 검색 합니다.</li>
	<li>측정 거리 버튼을 클릭 하 여 침략의 길이 계량 이미징 소프트웨어를 사용 하 여, 침입, 또는 다른 영역 매개 변수를 원하는. 침략의 길이의 좋은 의견에 대 한 동일한 신경의 여러 부분 (2 ~ 4)를 사용 합니다.</li>
</ol>

<ol>
	<li>Liebig, C., Ayala, G., Wilks, J. A., Berger, D. H., Albo, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perineural+invasion+in+cancer.">Perineural invasion in cancer.</a> Cancer. 115 (15), 3379-3391 (2009).</li><li>Bapat, A. A., Hostetter, G., Von Hoff, D. D., Han, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Perineural+invasion+and+associated+pain+in+pancreatic+cancer.">Perineural invasion and associated pain in pancreatic cancer.</a> Nat Rev Cancer. 11 (10), 695-707 (2011).</li><li>Deborde, S., Wong, R. 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저자는 공개 없다.

이 프로토콜에서 우리는 vivo에서 murine 모델 췌장암 세포에 의해 좌 골 신경의 정량화에 대 한 있도록 perineural 내 습의 기술. 이 모델에는 신경의 분자 메커니즘의 연구 수 있습니다. 이 기술을 사용 하 여 성공적인 실험 과정에서 3 개의 중요 한 단계에 대 한 신중 접근 필요: 1)의 주입 암 세포 (2.7, 2.8), 단계 2) 침공된 신경 (3.4 단계)의 추출 및 수확된 신경 (4.1 단계)의 3) 처리.
<p class="jove_con...

신경 자극 암 성장 및 마이그레이션1,2,3특정 종양 microenvironment를 형성 한다. Perineural 내 습 (PNI)는 암 통해 세포 및 신경 주위에 침략 하는 과정입니다. 그것은 신경 따라 원본 사이트에서 확장 암 침공 이후 전이의 유일한 노선으로 고려할 수 있습니다. PNI는 발생률이 22%에서 1001,2에 이르기까지 췌 장, 전립선, 머리 및 목, 침, 자 궁, 대 장 암 등 여러 암 종류에서 발견 된다. PNI 통증 연관 이며 더 생존 요금1,2, 빈약한 예 지와 연관 시킵니다.
Perineural 내 습의 모델 개발이 과정의 세포 및 분자 메커니즘을 명료 하 고 후보 치료제 PNI를 감소 테스트에 필수적 이다. 암과 신경 사이 상호 작용을 공부 방법은 시험관에 암 세포 신경 explants4, 느 루트 절5,6,7, 또는 특정 셀의 공동 문화를 포함 신경에서 microenvironment 같은 Schwann 세포7. 그러나 Vivo에서 접근,, 더 순수 관련, 암 마우스 모델에서 암 유발 되거나 이식의 사용을 포함 되며 전체 신경 microenvironment에 대 한 회계의 이점이 있다. Orthotopic에서 췌 장 또는 전립선 암, PNI 모델 보고8,,910 고 PNI의 발생률, 기록 될 수 있습니다 되었지만 그 기관에서 신경의 작은 크기 때문에 그것은 어려운 볼 수 전체 신경 따라서 PNI의 정도 계량 하기. 우리는 여기에 설명 하는 모델 PNI는 암 세포는11간단한 수술 통해 쥐의 좌 골 신경에 주입의 비보에 모델이입니다. Heterotopic 이식으로 척수 신경 내의 침공. 척수 주사의 사이트에서 신경 침공의 길이 신경 내 암의 볼륨 뿐만 아니라, 측정 될 수 있습니다. 중요 한 것은, 침략된 신경 분석 현미경, 분자 분석을 포함 한 다양 한도 수집할 수 있습니다. 암 세포의 다양 한 시험 될 수 있다, 그리고 호스트 쥐 유전자 수정 되거나 특정 화합물으로 치료도 사용 될 수 있습니다. 이 강력한 분석 결과 암 세포 및 호스트 microenvironment PNI의 메커니즘에 조사에 대 한 수정할 수 있습니다.

<table><tbody><tr><td>Mouse</td><td></td><td></td><td>Number and age variable depending on experimental needs</td></tr><tr><td>Cell culture media (PBS, Trypsin, and DMEM+10% FBS)</td><td>Any</td><td></td><td>Steps 1.1, 1.2, 1.3.</td></tr><tr><td>Conical centrifuge tube, 50 mL</td><td>Falcon</td><td>352098</td><td>Step 1.1</td></tr><tr><td>Microcentrifuge tube 1.5 mL</td><td>Axygen</td><td>MCT-150-C-S</td><td>Step 1.2</td></tr><tr><td>Electric razor</td><td>WAHL</td><td>9962</td><td>Step 2.1. Can be substituted with commercial hair removal agent</td></tr><tr><td>Isoflurane, 250 mL</td><td>Baxter</td><td>1001936060</td><td>Step 2.2</td></tr><tr><td>Hypoallergenic surgical tape</td><td>3M Blenderm</td><td>70200419342</td><td>Step 2.3</td></tr><tr><td>Betadine Swapsticks</td><td>PDI</td><td>SKU 41350</td><td>Step 2.4</td></tr><tr><td>Webcol Alcohol Preps</td><td>Covidien</td><td>5110</td><td>Step 2.4</td></tr><tr><td>Sterile surgical tools (scissors and forceps)</td><td></td><td></td><td>Steps 2.4, 2.5, 3.3, 3.4, 3.5</td></tr><tr><td>10 &amp;mu;L Hamilton syringe</td><td>Hamilton</td><td>80308</td><td>Steps 2.7, 2.8</td></tr><tr><td>Steel Micro spatula</td><td>Fisher Scientific</td><td>S50823</td><td>Step 2.7</td></tr><tr><td>Dissecting microscope</td><td></td><td></td><td>Step 2.7</td></tr><tr><td>Bupivacine, 1 g</td><td>Enzo Life Sciences</td><td>BML-NA139-0001</td><td>Step 2.9. Reconstitute to 0.5%</td></tr><tr><td>5-0 Nylon suture</td><td>Ethicon</td><td>698H</td><td>Step 2.9</td></tr><tr><td>Tissue-Tek O.C.T. Compound</td><td>VWR</td><td>25608-930</td><td>Step 4.1</td></tr><tr><td>Tissue-Tek Cryomold Molds</td><td>VWR</td><td>25608-916</td><td>Step 4.1</td></tr></tbody></table>

an in vivo murine sciatic nerve model of perineural invasion

암 세포 나 perineural 내 습 (PNI)는 암에서 세포 증식 및 신경 microenvironment에서 마이그레이션 프로세스를 통해 신경 침공. 이 침공의 다양 한 암 종류에 의해 전시 유형과 매우 자주 췌장암에서 발견 된다. 마우스 췌 장 내 신경 섬유의 미세한 크기 orthotopic murine 모델에 어려운 PNI의 연구를 렌더링합니다. 여기, 우리가 PNI, 어디 우리가 주입 syngeneic 췌장암 세포 라인 Panc02 H7 murine 좌 골 신경의 모델 heterotopic vivo에서 설명 합니다. 이 모델에서 좌 골 신경 마 취 쥐의 노출 하 고 암 세포를 주입. 암 세포 주입의 지점에서 척수를 향해 proximally 신경에 침입 한다. 침공된 좌 골 신경 다음 추출 하 고 10 월 냉동 단면에 대 한 처리. H & E와이 섹션의 면역 형광 염색 단백질 표정에 침입과 변경의 두 학위의 정량화를 허용 합니다. PNI 주어진 그 다양성에 대 한 연구의 다양 한에이 모델을 적용할 수 있습니다. 다른 유전 수정 또는 다른 종류의 암 세포를 마우스를 사용 하 여 다른 암 종류 및 PNI의 세포 및 분자 메커니즘의 조사에 대 한 수 있습니다. 또한, 신경 침공에 대 한 치료제의 효과이 쥐를 치료를 적용 하 여 공부 될 수 있다.

이 방법은 같지는 신경의 비보에 모델을 만드는 murine 좌 골 신경으로 췌장암 세포의 외과 이식을 설명 합니다. 그림 1 좌 골 신경의 해 부 위치 및 주사의 사이트를 보여 줍니다. 그림 2 는 누드 마우스의 두 좌 골 신경. 주입 하는 PBS 신경 (왼쪽) MiaPaCa-2 암 세포 (오른쪽)와 함께 주입 하는 신경에 비교 될 수 있습니다. 암 ?...

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An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion

Vivo에서 Murine 좌 골 신경의 모델 Perineural 내 습

좌 골 신경으로 syngeneic 췌장암 세포를 주입 하 여는 vivo에서 murine 모델 perineural 내 습의 설명 합니다. 모델 신경 내 습의 넓이의 부 량과 perineural 내 습의 세포 및 분자 메커니즘의 조사를 지원 합니다.

Cancer cells invade nerves through a process termed perineural invasion (PNI), in which cancer cells proliferate and migrate in the nerve ...

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Research

JoVE Journal

Cancer Research

An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion

11.9K 조회수.  Memorial Sloan Kettering Cancer Center. 좌 골 신경으로 syngeneic 췌장암 세포를 주입 하 여는 vivo에서 murine 모델 perineural 내 습의 설명 합니다. 모델 신경 내 습의 넓이의 부 량과 perineural 내 습의 세포 및 분자 메커니즘의 조사를 지원 합니다.

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Coculture Assays to Study Macrophage and Microglia Stimulation of Glioblastoma Invasion

Glioblastoma multiforme (grade IV glioma) is a very aggressive human cancer with a median survival of 1 year post diagnosis. Despite the increased understanding of the molecular events that give rise to glioblastomas, this cancer still remains highly refractory to conventional treatment. Surgical resection of high grade brain tumors is rarely complete due to the highly infiltrative nature of glioblastoma cells. Therapeutic approaches which attenuate glioblastoma cell invasion therefore is an attractive option. Our laboratory and others have shown that tumor associated macrophages and microglia (resident brain macrophages) strongly stimulate glioblastoma invasion. The protocol described in this paper is used to model glioblastoma-macrophage/microglia interaction using in vitro culture assays. This approach can greatly facilitate the development and/or discovery of drugs that disrupt the communication with the macrophages that enables this malignant behavior. We have established two robust coculture invasion assays where microglia/macrophages stimulate glioma cell invasion by 5 - 10 fold. Glioblastoma cells labelled with a fluorescent marker or constitutively expressing a fluorescent protein are plated without and with macrophages/microglia on matrix-coated polycarbonate chamber inserts or embedded in a three dimensional matrix. Cell invasion is assessed by using fluorescent microscopy to image and count only invasive cells on the underside of the filter. Using these assays, several pharmacological inhibitors (JNJ-28312141, PLX3397, Gefitinib, and Semapimod), have been identified which block macrophage/microglia stimulated glioblastoma invasion.

Understanding the malignant behavior of cancer requires creating accurate models of how tumor cells interact with components of the tumor microenvironment, such as macrophages. Here we describe two methods to study glioblastoma cell interaction with tumor associated macrophages and microglia where the effect on glioblastoma invasion is assessed.

공동 배양 시험 법은 아교 모세포종 침략의 대 식세포와 미세 아교 세포 자극을 공부하기

Glioblastoma multiforme (grade IV glioma) is a very aggressive human cancer with a median survival of 1 year post diagnosis. Despite the increased ...

연구

암 연구학

A Model for Perineural Invasion in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma

Perineural invasion (PNI) is found in approximately 40% of head and neck squamous cell carcinomas (HNSCC). Despite multimodal treatment with surgery, radiation, and chemotherapy, locoregional recurrences and distant metastases occur at higher rates, and overall survival is decreased by 40% compared to HNSCC without PNI. In vitro studies of the pathways involved in HNSCC PNI have historically been challenging given the lack of a consistent, reproducible assay. Described here is the adaptation of the dorsal root ganglion (DRG) assay for the examination of PNI in HNSCC. In this model, DRG are harvested from the spinal column of a sacrificed nude mouse and placed within a semisolid matrix. Over the subsequent days, neurites are generated and grow in a radial pattern from the cell bodies of the DRG. HNSCC cell lines are then placed peripherally around the matrix and invade preferentially along the neurites toward the DRG. This method allows for rapid evaluation of multiple treatment conditions, with very high assay success rates and reproducibility.

Perineural invasion (PNI) is a common feature of head and neck squamous cell carcinoma (HNSCC), conferring lower survival rates. Its mechanisms are poorly understood. Utilizing neurites generated from murine dorsal root ganglia confined to a semisolid matrix, the pathways involved in the PNI of HNSCC cell lines can be investigated.

머리와 목 편평 ​​세포 암에서 신경초 침략을위한 모델

Perineural invasion (PNI) is found in approximately 40% of head and neck squamous cell carcinomas (HNSCC). Despite multimodal treatment with surgery, ...

A Mouse Model of Fatigue Induced by Peripheral Irradiation

Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. Here we describe a method using targeted peripheral irradiation to induce fatigue-like behavior in mice. With appropriate shielding, the irradiation targets the lower abdominal/pelvic region of the mouse, sparing the brain, in an effort to model radiation treatment received by individuals with pelvic cancers. We deliver an irradiation dose that is sufficient to induce fatigue-like behavior in mice, measured by voluntary wheel-running activity (VWRA), without causing obvious morbidity. Since wheel running is a normal, voluntary behavior in mice, its use should have little confounding effect on other behavioral tests or biological measures. Hence, wheel running can be used as a feasible outcome measure in understanding the behavioral and biological correlates of fatigue. CRF is a complex condition with frequent comorbidities, and likely has causes related both to cancer and its various treatments. The methods described in this paper are useful for investigating radiation-induced changes that contribute to the development of CRF and, more generally, to explore the biological networks that can explain the development and persistence of a peripherally-triggered but centrally-driven behavior like fatigue.

We describe a method using targeted peripheral irradiation to induce fatigue-like behavior in mice. The selected non-lethal irradiation dose leads to a week-long reduction in voluntary wheel-running activity.

주변 방사선 조사에 의해 유도 된 피로의 마우스 모델

Cancer-related fatigue (CRF) is a distressing and costly condition that often affects patients receiving cancer treatments, including radiation therapy. ...

In Vitro Modeling of Cancerous Neural Invasion: The Dorsal Root Ganglion Model

One way that solid tumors disseminate is through neural invasion. This route is well-known in cancers of the head and neck, prostate, and pancreas. These neurotropic cancer cells have a unique ability to migrate unidirectionally along nerves towards the central nervous system (CNS). The dorsal root ganglia (DRG)/cancer cell model is a three dimensional (3D) in vitro model frequently used for studying the interaction between neural stroma and cancer cells. In this model, mouse or human cancer cell lines are grown in ECM adjacent to preparations of freshly dissociated cultured DRG. In this article, the DRG isolation protocol from mice, and implantation in petri dishes for co-culturing with pancreatic cancer cells are demonstrated. Five days after implantation, the cancer cells made contact with the DRG neurites. Later, these cells formed bridgeheads to facilitate more extensive polarized, neurotropic migration of cancer cells.

In Vitro Modeling of Cancerous Neural Invasion: The Dorsal Root Ganglion Model

This video article shows the use of the dorsal root ganglia (DRG)/cancer cell model in pancreatic ductal adenocarcinoma.

등쪽 뿌리 신경절 모델 : 암성 신경 침략의 생체 외 모델링에서

One way that solid tumors disseminate is through neural invasion. This route is well-known in cancers of the head and neck, prostate, and pancreas. These ...

신경과학

The Chick Chorioallantoic Membrane In Vivo Model to Assess Perineural Invasion in Head and Neck Cancer

Perineural invasion is a phenotype in which cancer surrounds or invades the nerves. It is associated with poor clinical outcome for head and neck squamous cell carcinoma and other cancers. Mechanistic studies have shown that the molecular crosstalk between nerves and tumor cells occurs prior to physical interaction. There are only a few in vivo models to study perineural invasion, especially to investigate early progression, before physical nerve-tumor interactions occur. The chick chorioallantoic membrane model has been used to study cancer invasion, because the basement membrane of the chorionic epithelium mimics that of human epithelial tissue. Here we repurposed the chick chorioallantoic membrane model to investigate perineural invasion, grafting rat dorsal root ganglia and human head and neck squamous cell carcinoma cells onto the chorionic epithelium. We have demonstrated how this model can be useful to evaluate the ability of cancer cells to invade neural tissue in vivo.&#160;

The Chick Chorioallantoic Membrane In Vivo Model to Assess Perineural Invasion in Head and Neck Cancer

Perineural invasion is an aggressive phenotype for head and neck squamous cell carcinomas and other tumors. The chick chorioallantoic membrane model has been used for studying angiogenesis, cancer invasion, and metastasis. Here we demonstrate how this model can be utilized to assess perineural invasion in vivo.

두경부암의 신경성 침윤을 평가하는 생체내 병아리 융모난토암 막

Perineural invasion is a phenotype in which cancer surrounds or invades the nerves. It is associated with poor clinical outcome for head and neck squamous ...

의학

Modified Spared Nerve Injury Surgery Model of Neuropathic Pain in Mice

Spared nerve injury (SNI) is an animal model that mimics the cardinal symptoms of peripheral nerve injury for studying the molecular and cellular mechanism of neuropathic pain in mice and rats. Currently, there are two types of SNI model, one to cut and ligate the common peroneal and the tibial nerves with intact sural nerve, which is defined as SNIs in this study, and another to cut and ligate the common peroneal and the sural nerves with intact tibial nerve, which is defined as SNIt in this study. Because the sural nerve is purely sensory whereas the tibial nerve contains both motor and sensory fibers, the SNIt model has much less motor deficit than the SNIs model. In the traditional SNIt mouse model, the common peroneal and the sural nerves are cut and ligated separately. Here a modified SNIt surgery method is described to damage both common peroneal and sural nerves with only one ligation and one cut with a shorter procedure time, which is easier to perform and reduces the potential risk of stretching the sciatic or tibial nerves, and produces similar mechanical hypersensitivity as the traditional SNIt model.

<meta charset="utf8"></head><body>마우스의 신경병증성 통증에 대한 수정된 보존 신경 손상 수술 모델

The modified surgery is a simplified method for mouse or rat spared nerve injury model that requires only one ligation and one cut to injure both common peroneal and sural nerves.

마우스의 신경병증성 통증에 대한 수정된 보존 신경 손상 수술 모델

Spared nerve injury (SNI) is an animal model that mimics the cardinal symptoms of peripheral nerve injury for studying the molecular and cellular ...

Establishing a Three-dimensional Co-culture Model of Murine Dorsal Root Ganglia and Cancer Cells: An In Vitro Model to Study Perineural Cancer Cell Invasion

Source: Huyett, P. et al. <a href="https://www.jove.com/video/55043" target="_blank">A Model for Perineural Invasion in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma.</a> J. Vis. Exp. (2017)
In this video, we demonstrate the procedure for developing an in vitro perineural cancer cell invasion model by co-culturing mouse dorsal root ganglion and neurotropic cancer cells. The model can be utilized to conduct cancer assays, producing rapid and reproducible results.

쥐 등뿌리 신경절과 암세포의 3차원 공동 배양 모델 구축: 신경주위 암세포 침입을 연구하기 위한 체외 모델

Source: Huyett, P. et al. A Model for Perineural Invasion in Head and Neck Squamous Cell Carcinoma. J. Vis. Exp. (2017)
In this video, we demonstrate the ...

JoVE Encyclopedia of Experiments

Head and Neck Cancer

Assays & techniques

Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion or PNI: Extraction and Processing of Sciatic Nerve to Understand Invasion by Cancer Cells

Source: Deborde, S. et al. <a href="https://www.jove.com/video/56857" target="_blank">An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion.</a> J. Vis. Exp. (2018)
In this video, we describe the procedure to establish a murine model of perineural invasion by injecting cancer cells into the sciatic nerve. The model can help gain an understanding of the magnitude of nerve invasion for subsequent assessment of anti-cancer drugs.

쥐 신경주위 침습 또는 PNI의 좌골 신경 모델: 암세포의 침입을 이해하기 위한 좌골 신경의 추출 및 처리

Source: Deborde, S. et al. An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion. J. Vis. Exp. (2018)
In this video, we describe the procedure to ...

Cancers of the Nervous System

Ex vivo studies

Murine Perineural Invasion Model: Generating an In Vivo Model to Simulate Perineural Invasion in Mouse Sciatic Nerve

Source: Deborde, S. et al. <a href="https://www.jove.com/video/56857" target="_blank">An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion.</a> J. Vis. Exp. (2018)
In this video, we develop an in vivo mouse model for perineural invasion by injecting pancreatic cancer cells into the sciatic nerve. This model helps quantify the extent of invasion and study the interactions between cancer cells and nerves.

쥐 신경주위 침입 모델: 마우스 좌골 신경에서 신경주위 침입을 시뮬레이션하기 위한 생체 내 모델 생성

Source: Deborde, S. et al. An In Vivo Murine Sciatic Nerve Model of Perineural Invasion. J. Vis. Exp. (2018)
In this video, we develop an in vivo mouse ...

Vivo에서 Murine 좌 골 신경의 모델 Perineural 내 습

요약

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마우스의 신경병증성 통증에 대한 수정된 보존 신경 손상 수술 모델

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