Name: a rat model of orthotopic liver transplantation using a novel magnetic anastomosis technique for suprahepatic vena cava reconstruction
Uploaded: 2018-03-19T12:30:00.000+00:00
Duration: 14 min 33 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction at JoVE.com

이 작품은 교육부의 교육 혁신 팀 개발 프로그램의 중국 (번호에서에서 교부 금에 의해 지원 되었다 IRT16R57), 중국 (No. 81470896), 그리고 연구의 국립 자연 과학 재단 기금에 대 한 젊은 인재 모집 계획의 서 안 교통 대학 (RW).

프로토콜 관리 및 실험 동물의 사용에 대 한 지침에 따라 실시 하 고 윤리의 동물 실험의 서 안 교통 대학, 서 안, 산시 성, 중국에 위원회에 의해 승인 되었다.
참고:이 프로토콜의 절차의 수술 현미경 아래에서 수행 되었다.
1. 수술 전 준비
<ol><li>디자인과 모양 자석 링 (그림 1)의<ol>
<li>네오디뮴-철-붕 소 자석 링의 쌍을 일치 하 여 자기 문 합 장치를 조립.</li>
		<li>주요 축 직경와 부 축 직경, 두께 8 m m, 5.5 m m, 1 mm, 0.5 g의 무게 쥐 SHVC의 매개 변수에 따라 반지를 각각 디자인 합니다.</li>
		<li>와이어 전극 가공 기술에 의해 원하는 모양에 고리를 곡선 다음 티타늄 산화물 에어브러쉬와 얻은 반지 코트 하 고 6 h 55-60 ° C에서 500 mg/L 에틸렌 산화물과 소독.</li>
	</ol>
</li>
	<li>(그림 2) 수 갑<ol>
<li>팔목을 폴 리 에틸렌 튜브를 절단 하 여 IHVC와 PV의 문 합에 대비 합니다. 팔목 바디 5 m m 인지 확인 2 mm 갑 확장명이 오래. 참고: 태양광 팔목의 내부 및 외부 직경은 1.8 및 2.1 m m, 그 동안 IHVC 팔목의 2.6 및 2.8 m m, 각각.</li>
	</ol>
</li>
	<li>텐트 (그림 2)<ol>
<li>양쪽 끝에 경사를 생산 하는 BD의 문 합 5 mm의 길이 절단 24 G 정 맥 정 맥에 의해는 텐트 준비.</li>
	</ol>
</li>
	<li>실험 동물<ol>
<li>기증자로 250과 280 g와 수신자 사이 무게 남성 Sprague Dawley 쥐를 사용 합니다. 기증자 보다 받는 사람이 동일한 무게 또는 약간 무거운 (< 10 g) 인지를 확인 합니다.</li>
		<li>음식과 수술 전에 물에 기후 제어 객실에서 쥐를 유지.</li>
	</ol>
</li>
</ol>2. 기증자 작업
<ol><li>주입 buprenorphine (0.05 mg/kg) 피하는 진통제로 작업 하기 전에 1 시간 있습니다.</li>
	<li>Isoflurane 흡입에 의해 기증자 쥐를 anesthetize. 마 취 및 유량 0.6-0.8에서 2 vol %isoflurane 유도 유리 상자에 1.5 L/분의 유량에 사용 5 vol % isoflurane L/원뿔에 분 마 취의 유지 관리를 위해 마스크. 발가락 핀치와 피부 핀치를 수행 하 여 마 취의 깊이 확인 합니다.</li>
	<li>청소기 노출에 대 한 허용 하는 전기 면도기를 사용 하 여 쥐의 전체 복 부 피부를 면도. Povidone-요오드 솔루션 해당 피부 소독.</li>
	<li>따라 xiphisternum 위에 1 ㎝를 확장 하는 성 기의 뿌리에서 수술가 위를 사용 하 여 십자형 절 개를 통해 복 부 구멍을 열고 교육 알바, midaxillary 라인 세로 절 개의 중간점에서 연장. Exteriorize 왼쪽에 위장 하 고 젖은 거 즈로 그것을 커버.</li>
	<li>클램프 및 xiphisternum hemostatic 집게를 사용 하 여 머리 쪽으로 당겨. Falciform 인 대와 간 주위 결합 조직 해 부. 분리 하 고 6-0 비단 봉합으로 왼쪽된 열 등 한 인할지 정 맥 선.</li>
	<li>담 관에는 스 텐트를 삽입 합니다.<ol>
<li>Gastroduodenal 정 맥은 문맥을 조인 지점 바로 위에 BD 클램프 하 고는 microforceps를 사용 하 여 약간 긴장을 유지 하기 위해 그것을 당겨. 다음 마이크로 위 여 약 5mm 담 즙 합류에 인접 앞쪽 벽에 길이 1 m m의 절 개를 "V"를 수행 합니다.</li>
		<li>곡선된 microforceps를 사용 하 여 담 즙 덕트의 루멘으로는 스 텐트를 삽입 합니다. 담 즙 덕트 외부 텐트 거짓말의 반 이상 있는지 확인 합니다.</li>
		<li>6-0 비단 봉합으로 텐트를 보호 합니다. 봉합의 한쪽 끝을 잘라. 나중에 문 합 중 다른 하나를 유지. 텐트 아래 담 즙 덕트 transect 고 담 즙은 텐트에서 올 수 있는지 확인 하십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>왼쪽된 신장 정 맥 수준 IHVC를 격리 합니다. IHVC skeletonized 때까지 면 뇌 해 부에 의해 전방 및 측면 주위 조직에서 IHVC를 무료. 바로 suprarenal 정 맥 및 6-0 비단 봉합으로 오른쪽 신장 정 맥 선 고 합니다.</li>
	<li>헤 파 린 음 경의 등 쪽 정 맥을 통해 정상적인 염 분 해결책의 2 mL에 희석의 주입 50 U 쥐를 heparinize.</li>
	<li>간 perfuse<ol>
<li>왼쪽된 신장 정 맥 아래 복 부 대동맥을 격리 합니다. 대동맥에 22-G 카 테 터를 삽입 합니다.</li>
		<li>thoracotomy 수행, 클램프는 microforceps를 사용 하 여 흉부 대동맥.</li>
		<li>3 mL/min의 속도로 주입 펌프와 헤 파 린 (4 ° C)의 U 25를 포함 하는 정상적인 염 분 솔루션의 20 mL와 대동맥에서 카 테 터를 통해 기증자 간을 perfuse. 한편, 관류 솔루션 간에서 흐름 수 있도록 오른쪽 신장 정 맥 아래 베 나 정 맥을 잘라.</li>
		<li>Transect 횡 경 막의 일부와 함께 SHVC 및 IHVC 왼쪽된 신장 정 맥의 수준에서 기증자 간 되었다 pallid.</li>
	</ol>
</li>
	<li>두 개의 마이크로 포 셉으로 PV를 둘러싼 결합 조직 해 부. 선 고는 8-0 prolene 봉합으로 pyloric 혈관을 나눕니다. 비장 정 맥의 수준에서 PV transect 기증자 간 소비 세 고 차가운 정상적인 염 분 해결책으로 그것을 씻어. 차가운 식 염 수에 4 ° c.를 목욕 하는 곳</li>
</ol>3. 이식 준비
참고: 4 ° c.에 차가운 식 염 수 목욕에서 간 이식 준비를 위한 모든 절차 수행
<ol><li>기증자의 IHVC (그림 3)에 팔목을 연결 합니다.<ol>
<li>간 쪽으로 향하고 팔목 확장명이 팔목에는 IHVC를 삽입 합니다. IHVC의 후부 벽에 팔목 확장을 배치 합니다. 팔목 확장과 IHVC 곡선된 microforceps 목욕 컨테이너 파일 클립을 사용 하 여 연결 자체를 해결할.</li>
		<li>두 개의 마이크로 집게를 사용 하 여 팔목 몸에 IHVC의 선단부를 evert.</li>
		<li>6-0 비단 봉합으로 가장자리를 보호 합니다. IHVC 과정에서 왜곡 하지는 다는 것을 확인 하십시오.</li>
	</ol>
</li>
	<li>기증자의 PV에는 팔목을 연결할 PV에 3.1 단계를 반복 합니다.</li>
	<li>마그네틱 링 기증자의 SHVC (그림 4)에 연결 합니다.<ol>
<li>4 개의 집게를 통해 횡 경 막을 당겨 하 고 트림은 SHVC.</li>
		<li>티타늄 합금 마이크로 집게를 사용 하 여 자기 반지를 통해 SHVC를 전달 합니다.</li>
		<li>반지에는 SHVC의 선단부를 evert.</li>
		<li>6-0 비단 봉합으로 반지를 보안 합니다. SHVC 과정에서 왜곡 하지는 다는 것을 확인 하십시오.</li>
		<li>간 주위 초과 다이어 프 램을 제거 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>감기 정상적인 염 분 목욕에 기증자 간 담가 그리고 4 ° c.에 저장</li>
</ol>4. 받는 사람 작업
참고: 받는 사람 쥐에 이식 이식의 스키마는 그림 5에 표시 됩니다.
<ol><li>주입 buprenorphine (0.05 mg/kg) 피하는 진통제로 작업 하기 전에 1 시간 있습니다. Isoflurane 흡입에 의해 기증자 쥐를 anesthetize. 마 취 및 유량 0.6-0.8에서 2 vol %isoflurane 유도 유리 상자에 1.5 L/분의 유량에 사용 5 vol % isoflurane L/원뿔에 분 마 취의 유지 관리를 위해 마스크.</li>
	<li>쥐의 전체 복 부 피부를 면도. Povidone-요오드 솔루션 해당 피부 소독.</li>
	<li>4 cm 중간 절 개를 통해 복 부 구멍을 엽니다. 복 부 견인 기를 놓습니다. 갈비는 중간에서 가능한 멀리 떨어져 당겨.</li>
	<li>클램프 및 xiphisternum hemostatic 집게를 사용 하 여 머리 쪽으로 당겨. 결합 조직 그리고 간 주위 인 대 해 부. 선 하 고 간을 식도 인 대를 나눕니다. 선 고는 8-0 prolene 봉합으로 간 동맥을 나눕니다.</li>
	<li>첫 번째 간 포털에서 일반적인 담 관을 격리 합니다. 그것의 부분 바로 아래 일반적인 담 관 주위 6-0 비단 봉합 사 놓고 선 일반적인 담 관.</li>
	<li>오른쪽 신장 정 맥으로 IHVC 해 부. 선 고 바로 부 신 정 맥을 나눕니다. 장소 간 SHVC에 스트랩.</li>
	<li>Microvessel 클립 오른쪽 신장 정 맥 바로 위에 IHVC 클램프. Microvessel 클립 pyloric 정 맥의 수준에서 태양광을 클램프.<ol>
<li>간에서 피를, PV 통해 정상적인 염 분의 2 개 mL를 주사 천천히. 이전 배치 끈을 잡아 당겨 간 아래로 끕니다. Satinsky 클램프와 SHVC와 횡 경 막의 일부를 클램프.</li>
		<li>실질 가까운 IHVC와 porta hepatis에 PV transect. 간 바로 위에 SHVC transecting에 의해 간 소비 세. 받는 사람 간에 신속 하 게 제거 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>마그네틱 링 받는 사람의 SHVC에 연결 합니다.<ol>
<li>자기 반지에 받는 사람의 나머지 SHVC를 삽입 합니다.</li>
		<li>자기 매력에 의해 Satinsky 클램프에 자기 반지를 수정.</li>
		<li>그릇의 가장자리를 커버까지 자석 반지에는 SHVC evert.</li>
	</ol>
</li>
	<li>기증자 간 이식 orthotopically 놓고 차가운 젖은 거 즈로 그것을 커버 합니다.</li>
	<li>정상적인 염 분 해결책에는 기증자와 받는 사람의 SHVCs의 루멘을 채우십시오. 공기 색 전 증을 방지 하기 위해 철저 하 게 공기 방울을 제거 합니다. 자기 힘을 통해 함께 기증자의와 받는 사람의 SHVC에 포함 된 자석 반지 커플링 여 SHVC 재건을 마무리.</li>
	<li>PV를 재구성 합니다.<ol>
<li>요로 PV의 긴장을 유지 하는 8-0 prolene 봉합을 당겨 받는 사람의 PV의 오른쪽과 왼쪽 지점.</li>
		<li>정 맥을 완전히 노출 하려면 pylorus 정 맥 비장 정 맥을 내려 받는 사람의 PV의 클램프를 이동 합니다.</li>
		<li>받는 사람의 앞쪽 벽 incise 정상적인 염 분 해결책으로 PV의 루멘을 채우십시오.</li>
		<li>기증자의 PV의 팔목 확장을 곡선된 집게로 잡으십시오.</li>
		<li>일반적인 염 분으로 PV 루멘 홍 조 유지 하면서 받는 사람의 PV에 기증자의 PV의 팔목 본문을 삽입 합니다.</li>
		<li>안전한 그것을 완곡으로 6-0 실크 합자. PV와 SHVC에 클램프를 발표 함으로써 이식 간 혈액 흐름을 다시 설정 합니다.</li>
	</ol>
</li>
	<li>4.11 재구성은 IHVC IHVC에 단계를 반복 합니다.</li>
	<li>텐트 기술에 의해 담 즙 덕트를 재구성 합니다.<ol>
<li>받는 사람 일반적인 담 관의 앞쪽 벽에 "V" incise</li>
		<li>받는 사람 BD의 루멘으로 기증자 텐트를 삽입 하 고 6-0 실크 원주 봉합으로 해결. 함께 두 개의 담 즙 덕트에는 봉합을 당겨 하 고 넥타이를 서로 가까이 BD 봉합.</li>
		<li>담 즙 누출을 방지 하기 위해 anastomotic 사이트 omentum 조직 포장.</li>
	</ol>
</li>
	<li>따뜻한 정상적인 염 분 해결책으로 복 강의 관개 복 부 절 개를 연속으로 2 층에서 3-0 비 흡수 되기 쉬운 외과 봉합을 닫습니다.</li>
	<li>관리 16 mg/kg 세 (항생제)와 0.05 mg/kg buprenorphine (진통제) 작업 후 피하 주입에 의해 즉시.</li>
	<li>쥐 깨끗 한 장에 음식 허용 놓고 광고 libitum물.</li>
	<li>주사 세 (16 mg/kg) 및 buprenorphine (0.05 mg/kg) 복 부 구멍으로 3 일 동안 매일 12 시간.</li>
</ol>

<ol>
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저자는 공개 없다.

많은 임상 진행 간 이식 동물 연구를 지정할 수 있습니다. 쥐 OLT 장기 보존, 이식 면역학, 생리학과 병리학의 연구에서 널리 사용 되 고 잘 허용 모델 이다. 그러나, 그것은 또한 매우 복잡 한 절차 이며 고급 microsurgical 기술. 쥐 OLT의 절차에 많은 개선에도 불구 하 고 SHVC 문 합 도전 단계에 남아 있었다. 이 문서에서 우리는 쥐 OLT에서에서 SHVC 재건을 위한 새로운 자석 문 합 기술을 설명합니다. 이 기...

Orthotopic 간 이식 (OLT)의 쥐 모델 이식 연구1,2에 대 한 필수적입니다. 첫 번째 쥐 OLT 리 외. 19733에 의해 설명 되었다. 그 모델에 모든 선박 손 봉합 기술에 의해 재건 되었다. 손 봉합 기술을는 크게 그것의 이용을 제한 하는 고급 microsurgical 기술을 필요로 한다. 그 이후, 쥐 OLT의 원래 프로토콜에 대 한 다양 한 수정 보고 되었습니다. 그것은 크게4 재건축 절차 간소화 그들 가운데, 포털 정 맥 (PV) 및 infrahepatic 베 나 정 맥 (IHVC) 지금도 외. 1979 년에 보고의 문 합에 대 한 갑 기술이이 모델에 대 한 개선 간주 됩니다. . 그러나, 받는 사람의 suprahepatic 베 나 정 맥 (SHVC)의 짧은 앞쪽 벽으로 인해 갑 기술은 매우 어렵습니다는 SHVC의 재건을 위해 사용 하. 이 분야에서 대부분 연구에서는 여전히 손 봉합 기술을 사용 하 여 병목 단계 게 쥐 OLT5,6,7에서 SHVC 재건에 대 한.
마그네틱 문 합 기술 (즉, magnamosis) 두 배 또는 2 개의 자석8,9,,1011사이 매력적인 힘을 사용 하 여 다른 관 구조를 연결 하는 방법 이다. 자기 힘은 점차적으로 압축 하 고 강한, sutureless 문 합12,13으로 개장 하는 조직. 이 압축 문 합 인간14,15에 효과가 입증 되었습니다. 우리는 한 쌍의 쥐에서 SHVC의 문 합에 맞게 자기 반지 디자인. 우리의 최근 연구 자석 문 합 기술은 이다 우수한 쥐 OLT16SHVC 재건에 대 한 손 봉합 기술을 보이고 있다. 이 문서의 목적은 소설 자석 문 합 기술을 사용 하 여 쥐에서 SHVC 재건에 대 한 상세한 단계별 프로토콜을 제공 하는 것입니다.

<table><tbody><tr><td>Anesthesia Machine</td><td>Harvard</td><td>&amp;nbsp;tabletop</td><td>Animal anaesthesia</td></tr><tr><td>PLX7000B HF Mobile Digital C-arm System</td><td>Perlong Medical</td><td>PLX7000B</td><td>It is mainly used for the angiography and photography of various operations</td></tr><tr><td>Syringe Pump</td><td>Mindray</td><td>BeneFusion SP5</td><td>intravenous infusion</td></tr><tr><td>Isoflurane</td><td>RWD life Science Co.</td><td></td><td>anesthetic:for the induction and maintenanceof anesthesia</td></tr><tr><td>iohexol</td><td>Shanghai General Pharmaceutical Co</td><td></td><td>&amp;nbsp;intravascular contrast media&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>heparin sodium injection</td><td>SPH No.1 Biochemical &amp;amp; Pharmaceutical Co., LTD&amp;nbsp;</td><td></td><td>&amp;nbsp;prevent the formation of thrombosis&amp;nbsp;</td></tr><tr><td>cefuroxime&amp;nbsp;</td><td>Glaxo Operations UK Limited&amp;nbsp;</td><td></td><td>an antibiotic</td></tr><tr><td>buprenorphine&amp;nbsp;</td><td>TIPR Pharmaceutical Responsible Co.,Ltd</td><td></td><td>an analgesic</td></tr><tr><td>curved microforceps</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>W40350</td><td>surgical tool</td></tr><tr><td>hemostatic forceps(straight)</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>J31010</td><td>surgical tool</td></tr><tr><td>hemostatic forceps(curved)</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>J31020</td><td>surgical tool</td></tr><tr><td>Satinsky clamp</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>XEC050</td><td>surgical tool</td></tr><tr><td>needle holder</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>J32010</td><td>surgical tool</td></tr><tr><td>microneedle holder</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>WBA040</td><td>surgical tool</td></tr><tr><td>notched forceps</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>J42010</td><td>surgical tool</td></tr><tr><td>tissue forceps(with hook)</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>J41010</td><td>surgical tool</td></tr><tr><td>tissue scissor</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>Y00040</td><td>surgical tool</td></tr><tr><td>surgical scissors</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>Y00030</td><td>surgical tool</td></tr><tr><td>micro scissors</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>MR-S121T</td><td>surgical tool</td></tr><tr><td>microvessel clips</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>XEC240</td><td>surgical tool</td></tr><tr><td>straight microforceps(titanium alloy)</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>WCC010</td><td>surgical tool</td></tr><tr><td>curved microforceps&amp;nbsp; (titanium alloy)</td><td>Shanghai Medical Instruments (Group) Ltd., Corp.</td><td>WCC020</td><td>surgical tool</td></tr></tbody></table>

a rat model of orthotopic liver transplantation using a novel magnetic anastomosis technique for suprahepatic vena cava reconstruction

Orthotopic 간 이식 (OLT)의 쥐 모델 이식 연구를 위해 필수적 이다. 그것은 매우 정교한 동물 모델 하 고 가파른 학습 곡선을 필요로 합니다. 문맥 (PV) 및 infrahepatic 베 나 정 맥 (IHVC)의 문 합에 대 한 갑 기술 도입 방식이 크게 쥐에 이식 절차 간소화. 그러나, 받는 사람의 suprahepatic 베 나 정 맥 (SHVC)의 짧은 앞쪽 벽으로 인해 갑 기술은 매우 어렵습니다는 SHVC의 재건을 위해 사용 하. 이 분야에서 대부분 연구에서는 여전히 손을 봉합 기술을 사용 하 여 SHVC 재건, 그것에 게 쥐 orthotopic 간 이식에서 병목 단계에 대 한. 마그네틱 문 합 기술 (즉, magnamosis) 두 배 두 자석 사이 매력적인 힘을 사용 하 여 연결 하는 방법 이다. 우리의 최근 연구 자석 문 합 기술은 이다 우수한 쥐에 SHVC 재건에 대 한 손 봉합 기술을 보이고 있다. 이 문서에서 우리는 소설 자석 문 합 기술을 사용 하 여 쥐에서 SHVC 재건에 대 한 단계별 프로토콜을 보여줍니다. 이 모델에 PV와 IHVC의 개조는 담 즙 덕트 (BD)의 재건 텐트 기술에 의해 수행 하는 동안 표준 팔목 기술에 의해 수행 되었다. 간장 재 arterialization은 수행 되지 않습니다. 마그네틱 문 합 기술 SHVC 재건 훨씬 쉽게 하 고 anphepatic 단계를 크게 단축. 합리적인 학습 곡선 후 고급 microsurgical 기술 없이 연구자는 OLT의이 쥐 모델을 사용 하 여 안정적이 고 재현 가능한 결과 생성할 수 있습니다.

약 10 번의 시도 후 SHVC 재건을 위한 마그네틱 문 합 기술은 성공적으로 이전 microsurgical 훈련 했다 연구원에 의해 마스터 했다. SHVC의 개조는 2 분 미만 했다. 받는 사람 쥐에 대 한 anhepatic 단계는 약 10 분 했다. 아니 혈전 증, 출혈 또는 angiostegnosis SHVC anastomotic 사이트에서 reperfusion 후 1, 5, 30 일에 관찰 되었다. 열 등 한 베 나 cavography는 이식 후 2 주에 수행 되었다. <strong class="x...

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A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

Suprahepatic 베 나 정 맥 (SHVC)의 재건 쥐 orthotopic 간 이식에 어려운 단계에 남아 있다. 이 문서에서 우리는 소설 자석 문 합 기술을 사용 하 여 쥐에서 SHVC 재건에 대 한 단계별 프로토콜을 보여줍니다.

Orthotopic의 쥐 모델 간 이식 Suprahepatic 베 나 정 맥 재건에 대 한 새로운 자석 문 합 기술을 사용 하 여

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

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Research

JoVE Journal

Medicine

9.8K 조회수.  First Affiliated Hospital, Xi'an Jiaotong University. Suprahepatic 베 나 정 맥 (SHVC)의 재건 쥐 orthotopic 간 이식에 어려운 단계에 남아 있다. 이 문서에서 우리는 소설 자석 문 합 기술을 사용 하 여 쥐에서 SHVC 재건에 대 한 단계별 프로토콜을 보여줍니다.

비디오: A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat liver transplantation in 1979 by Kamada et al.3, this model has remained the gold standard despite various proposed alternative techniques4. Nevertheless, its broader use is limited by its steep learning curve5.
In this video paper, we show a simple and easy-to-establish revision of Kamada's two-cuff technique. The suprahepatic vena cava anastomosis is performed manually with a running suture, and the vena porta and infrahepatic vena cava anastomoses are performed utilizing a quick-linker cuff system6. Manufacturing the quick-linker kit is shown in a separate video paper.

We present an easy-to-establish revision of the classical two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.

쥐에게 Orthotopic 간 이식

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

연구

의학

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as studies on graft preservation and ischemia-reperfusion injury 1,2, immunological responses 3,4, hemodynamics 5,6, and small-for-size syndrome 7. The rat OLT is among the most difficult animal models in experimental surgery and demands advanced microsurgical skills that take a long time to learn. Consequently, the use of this model has been limited. Since the reliability and reproducibility of results are key components of the experiments in which such complex animal models are used, it is essential for surgeons who are involved in rat OLT to be trained in well-standardized and sophisticated procedures for this model.
While various techniques and modifications of OLT in rats have been reported 8 since the first model was described by Lee et al. 9 in 1973, the elimination of the hepatic arterial reconstruction 10 and the introduction of the cuff anastomosis technique by Kamada et al. 11 were a major advancement in this model, because they simplified the reconstruction procedures to a great degree. In the model by Kamada et al., the hepatic rearterialization was also eliminated. Since rats could survive without hepatic arterial flow after liver transplantation, there was considerable controversy over the value of hepatic arterialization. However, the physiological superiority of the arterialized model has been increasingly acknowledged, especially in terms of preserving the bile duct system 8,12 and the liver integrity 8,13,14.
In this article, we present detailed surgical procedures for a rat model of OLT with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft after ex vivo liver resection. The reconstruction procedures for each vessel and the bile duct are performed by the following methods: a 7-0 polypropylene continuous suture for the supra- and infrahepatic vena cava; a cuff technique for the portal vein; and a stent technique for the hepatic artery and the bile duct.

Orthotopic liver transplantation in rats is an indispensable experimental model for biomedical research. Here we present our surgical procedures for orthotopic rat liver transplantation with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft.

간 간선 재건과 부분 Orthotopic 간 이식의 쥐 모델에 대한 외과 절차

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Heterotopic Auxiliary Rat Liver Transplantation With Flow-regulated Portal Vein Arterialization in Acute Hepatic Failure

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the failing native liver has regenerated.1-3 The APOLT-method, the orthotopic implantation of auxiliary segments- averts most of the technical problems. However this method necessitates extensive resections of both the native liver and the graft.4 In 1998, Erhard developed the heterotopic auxiliary liver transplantation (HALT) utilizing portal vein arterialization (PVA) (Figure 1). This technique showed promising initial clinical results.5-6 We developed a HALT-technique with flow-regulated PVA in the rat to examine the influence of flow-regulated PVA on graft morphology and function (Figure 2).
A liver graft reduced to 30 % of its original size, was heterotopically implanted in the right renal region of the recipient after explantation of the right kidney.&#160; The infra-hepatic caval vein of the graft was anastomosed with the infrahepatic caval vein of the recipient. The arterialization of the donor&#8217;s portal vein was carried out via the recipient&#8217;s right renal artery with the stent technique. The blood-flow regulation of the arterialized portal vein was achieved with the use of a stent with an internal diameter of 0.3 mm. The celiac trunk of the graft was end-to-side anastomosed with the recipient&#8217;s aorta and the bile duct was implanted into the duodenum. A subtotal resection of the native liver was performed to induce acute hepatic failure. 7
In this manner 112 transplantations were performed. The perioperative survival rate was 90% and the 6-week survival rate was 80%. Six weeks after operation, the native liver regenerated, showing an increase in weight from 2.3&#177;0.8 g to 9.8&#177;1 g. At this time, the graft&#8217;s weight decreased from 3.3&#177;0.8 g to 2.3&#177;0.8 g.
We were able to obtain promising long-term results in terms of graft morphology and function. HALT with flow-regulated PVA reliably bridges acute hepatic failure until the native liver regenerates.

Auxiliary liver transplantation provides a temporary support in acute hepatic failure, until regeneration of the failing liver. The heterotopic auxiliary liver transplantation (HALT) with portal vein arterialization (PVA) renders sufficient liver function. We developed an analogous technique in the rat, to examine the influence of the portal vein arterialization on the morphology and function of the graft.

이소성 보조 쥐 간 이식 급성 간 장애에 포털 정맥 Arterialization를 유량 조절

In acute hepatic failure auxiliary liver transplantation is an interesting alternative approach. The aim is to provide a temporary support until the ...

Rat Heterotopic Abdominal Heart/Single-lung Transplantation in a Volume-loaded Configuration

Herein, we describe a novel technique for heterotopic abdominal heart-lung transplantation (HAHLT) in rats. The configuration of the transplant graft involves anastomosis of donor inferior vena cava (IVC) to recipient IVC, and donor ascending aorta (Ao) to recipient abdominal Ao. The right upper and middle lung lobes are preserved and function as conduits for blood flow from right heart to left heart.
There are several advantages to using this technique, and it lends itself to a broad range of applications. Because the graft is transplanted in a configuration that allows for dyamic volume-loading, cardiac function may be directly assessed in vivo. The use of pressure-volume conductance catheters permits characterization of load-dependent and load-independent hemodynamic parameters. The graft may be converted to a loaded configuration by applying a clamp to the recipient&#8217;s infra-hepatic IVC. We describe modified surgical techniques for both donor and recipient operations, and an ideal myocardial protection strategy. Depending on the experimental aim, this model may be adapted for use in both acute and chronic studies of graft function, immunologic status, and variable ventricular loading conditions. The conducting airways to the transplanted lung are preserved, and allow for acute lung re-ventilation. This facilitates analysis of the effects of the mixed venous and arterial blood providing coronary perfusion to the graft.
A limitation of this model is its technical complexity. There is a significant learning curve for new operators, who should ideally be mentored in the technique. A surgical training background is advantageous for those wishing to apply this model. Despite its complexity, we aim to present the model in a clear and easily applicable format. Because of the physiologic similarity of this model to orthotopic transplantation, and its broad range of study applications, the effort invested in learning the technique is likely to be worthwhile.

We describe a novel technique for heterotopic abdominal heart-lung transplantation (HAHLT) in rats. The transplant configuration results in a partially loaded graft circulation, allowing direct functional assessment. This model may be employed for acute or chronic studies of function and immunologic status of the transplanted graft.

쥐 이소성 복부 심장 / 볼륨로드 구성에서 단일 폐 이식

Herein, we describe a novel technique for heterotopic abdominal heart-lung transplantation (HAHLT) in rats. The configuration of the transplant graft ...

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. To better understand the mechanism behind these surgical procedures, a rat partial liver transplantation (PLTx) model was established for relevant surgical studies. Because of the complexity of the rat PLTx model, a protocol with detailed descriptions is required. An article published previously reported a protocol in which ex vivo hepatectomy was used to achieve 50% rat PLTx. In contrast to this protocol, we introduced a re-arterialized PLTx with an in vivo 70% hepatectomy. An updated vessel-oriented hepatectomy was incorporated into the rat PLTx to refine the microsurgical procedure. The portal veins and hepatic arteries of the left lateral lobe and the median lobe were individually dissected and ligated before removal of the liver parenchyma, thereby decreasing the probability of bleeding in the remnant liver stump. Furthermore, an end-to-side vessel anastomosis between the common hepatic artery and the enlarged proper hepatic artery was introduced to re-arterialize the hepatic artery. By using this end-to-side vessel anastomosis technique, the diameter of the anastomosis was enlarged, thereby decreasing the difficulty of hand suture and maintaining a high rate of anastomotic patency. Moreover, the cuff anastomosis of the infrahepatic vena cava was slightly modified. A section of circumferential liver parenchyma around the vena cava of a recipient was preserved during cuff anastomosis to maintain the three-dimensional shape of the vascular lumen. This section of liver parenchyma was removed after completing the anastomosis. With this modification, the step involving placement of stay sutures was omitted, thereby further shortening the cuff anastomosis time. By using this protocol of rat PLTx, a low liver enzyme level, an intact liver lobular architecture and a high survival rate were achieved after microsurgery.

Re-Arterialized Rat Partial Liver Transplantation with an in vivo Vessel-Oriented 70% Hepatectomy

Here, a protocol involving re-arterialized rat partial liver transplantation is presented. Specifically, 70% liver was resected in vivo by using an updated technique of vessel-oriented hepatectomy. The hepatic artery was reconstructed in an end-to-side manner. The cuff technique was modified to shorten the anastomosis time of the infrahepatic vena cava.

다시는 vivo에서 선박 지향 70% 쥐 부분 간 이식 Arterialized Hepatectomy

Split liver transplantation and living liver donor liver transplantation were developed in the clinic to utilize liver organs in a more efficient manner. ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation of human liver transplantation due to the absence of arterial reconnection. Described here is a modified transplantation procedure that includes the incorporation of hepatic artery (HA) reconnection, leading to a marked improvement in transplant outcomes. With a mean anhepatic time of 12 min and 14 s, HA reconnection results in improved perfusion of the transplanted liver and an increase in long-term recipient survival from 37.5% to 88.2%. This protocol includes the use of 3D-printed cuffs and holders to connect the portal vein and infrahepatic inferior vena cava. It can be implemented for studying multiple aspects of liver transplantation, from immune response and infection to technical aspects of the procedure. By incorporating a simple and practical method for arterial reconnection using a microvascular technique, this modified rat OLT protocol closely mimics aspects of human liver transplantation and will serve as a valuable and clinically relevant research model.

The goal of this study is to modify the rat orthotopic liver transplant model to better represent human liver transplantation and improve recipient survival. The presented method reestablishes hepatic arterial inflow by connecting the donor liver&#39;s common hepatic artery to the recipient liver&#39;s proper hepatic artery.

직교 간 이식의 쥐 모형에 있는 동맥 재연결 후에 감소된 합병증

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...

Organ Ischemia-Reperfusion Injury by Simulating Hemodynamic Changes in Rat Liver Transplant Model

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, including ischemia-reperfusion injury (IRI) of extrahepatic organs. This model requires numerous experiments and devices. The duration of anhepatic phase is closely related to the time to develop IRI after transplantation. In this experiment, we used hemodynamic changes to induce extrahepatic organ damage in rats and determined the maximum tolerance time. The time until the most severe organ injury varied for different organs. This method can easily be replicated and can also be used to study IRI of the extrahepatic organs after liver transplantation.

This paper provides a detailed description of how to build an animal model of the anhepatic phase (liver ischemia) in rats to facilitate basic research into ischemia-reperfusion injury after liver transplantation.

쥐 간 이식 모형에 있는 혈역학적인 변경을 시뮬레이션하여 기관 허혈-재관류 상해

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats is a tried and proven animal model used for preoperative, intraoperative, and postoperative studies, ...

Porcine Liver Transplantation Without Veno-Venous Bypass As an Extended Criteria Donor Model

Liver transplantation is regarded as the gold standard for the treatment of a variety of fatal hepatic diseases. However, unsolved issues of chronic graft failure, ongoing organ donor shortages, and the increased use of marginal grafts call for the improvement of current concepts, such as the implementation of organ machine perfusion. In order to evaluate new methods of graft reconditioning and modulation, translational models are required. With respect to anatomical and physiological similarities to humans and recent progress in the field of xenotransplantation, pigs have become the main large animal species used in transplantation models. After the initial introduction of a porcine orthotopic liver transplant model by Garnier et al. in 1965, several modifications have been published over the past 60 years.
Due to specifies-specific anatomical traits, a veno-venous bypass during the anhepatic phase is regarded as a necessity to reduce intestinal congestion and ischemia resulting in hemodynamic instability and perioperative mortality. However, the implementation of a bypass increases the technical and logistical complexity of the procedure. Furthermore, associated complications such as air embolism, hemorrhage, and the need for a simultaneous splenectomy have been reported previously.
In this protocol, we describe a model of porcine orthotopic liver transplantation without the use of a veno-venous bypass. The engraftment of donor livers after static cold storage of 20 h - simulating extended criteria donor conditions - demonstrates that this simplified approach can be performed without significant hemodynamic alterations or intraoperative mortality and with regular uptake of liver function (as defined by bile production and liver-specific CYP1A2 metabolism). The success of this approach is ensured by an optimized surgical technique and a sophisticated anesthesiologic volume and vasopressor management.
This model should be of special interest for workgroups focusing on the immediate postoperative course, ischemia-reperfusion injury, associated immunological mechanisms, and the reconditioning of extended criteria donor organs.

In this protocol, a model of porcine orthotopic liver transplantation after static cold storage of donor organs for 20 h without the use of a veno-venous bypass during engraftment is described. The approach uses a simplified surgical technique with minimization of the anhepatic phase and sophisticated volume and vasopressor management.

확장 기준 기증자 모델로서의 정맥 우회술이 없는 돼지 간 이식

Liver transplantation is regarded as the gold standard for the treatment of a variety of fatal hepatic diseases. However, unsolved issues of chronic graft ...

마우스의 간 이식 및 동종이식 개통성 분석

Successful Orthotopic Liver Transplantation in Mice Utilizing Microcomputed Tomography Angiography

Microcomputed tomography (microCT) angiography is an invaluable resource to researchers. New advances in this technology have allowed for high-quality images to be obtained of micro-vasculature and are high-fidelity tools in the field of organ transplantation. In this model of orthotopic liver transplantation (OLT) in mice, microCT affords the opportunity to evaluate allograft anastomosis in real time and has the added benefit of not having to sacrifice study animals. The choice of contrast, as well as image acquisition settings, create a high-definition image, which gives researchers invaluable information. This allows for evaluation of the technical aspects of the procedure as well as potentially evaluating different therapeutics over an extended duration of time. In this protocol, we detail an OLT model in mice in a stepwise fashion and finally describe a microCT protocol that can give high-quality images, which aid researchers in in-depth analysis of solid organ transplantation. We provide a step-by-step guide for liver transplantation in a mouse, as well as briefly discuss a protocol for evaluating the patency of the graft through microCT angiography.

저자 스포트라이트: 쥐 모델에서 MicroCT 혈관 조영술을 통한 이식 연구 강화 

In this protocol, we discuss the implementation of a model of successful orthotopic liver transplantation (OLT) in mice. Additionally, adjuvants to further analyze allograft patency after successful OLT in a mouse are discussed as well, specifically utilizing microcomputed tomography (microCT) scans.

Microcomputed Tomography 혈관 조영술을 활용한 마우스의 성공적인 Orthotopic 간 이식

Microcomputed tomography (microCT) angiography is an invaluable resource to researchers. New advances in this technology have allowed for high-quality ...

Orthotopic의 쥐 모델 간 이식 Suprahepatic 베 나 정 맥 재건에 대 한 새로운 자석 문 합 기술을 사용 하 여

요약

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쥐에게 Orthotopic 간 이식

간 간선 재건과 부분 Orthotopic 간 이식의 쥐 모델에 대한 외과 절차

이소성 보조 쥐 간 이식 급성 간 장애에 포털 정맥 Arterialization를 유량 조절

쥐 이소성 복부 심장 / 볼륨로드 구성에서 단일 폐 이식

다시는 vivo에서 선박 지향 70% 쥐 부분 간 이식 Arterialized Hepatectomy

직교 간 이식의 쥐 모형에 있는 동맥 재연결 후에 감소된 합병증

쥐 간 이식 모형에 있는 혈역학적인 변경을 시뮬레이션하여 기관 허혈-재관류 상해

확장 기준 기증자 모델로서의 정맥 우회술이 없는 돼지 간 이식

Microcomputed Tomography 혈관 조영술을 활용한 마우스의 성공적인 Orthotopic 간 이식

Microcomputed Tomography 혈관 조영술을 활용한 마우스의 성공적인 Orthotopic 간 이식