쥐 치열 교정 간 이식 모델은 간 이식의 여러 측면을 연구하기위한 강력한 도구입니다. 감염에 면역 반응에서, 절차의 기술적 인 측면에. 이 기술의 주요 장점은 합병증을 줄일 수 있다는 것입니다, 더 나은 와서 간 이식을 나타내는, 받는 사람의 생존을 향상.
이 수정 된 쥐 치열 교정 간 이식 프로토콜 밀접 하 게 인간의 간 이식의 측면을 모방 하 고 변수 및 임상 관련 연구 모델로 봉사 할 것 이다. 시각적 데모를 통해 시청자는 모든 세부 사항을 배우고이 기술에 필요한 미세 수술 기술을 마스터하기위한 학습 곡선을 단축 할 수 있기를 바랍니다. 마취 된 12 - 14 주 된 쥐의 자궁 내 열등한 베나 카바에 헤파린 나트륨 300 개의 국제 단위를 주입 한 후 담관 분기 아래 5 밀리미터 절개를하고 담관 스텐트를 일반적인 담관에 삽입합니다.
7-0 실크 합자 1개, 절개 1mm, 분기 아래 1개의 합자 1개로 스텐트를 고정합니다. 두 관계 사이의 담관을 잘라 적절한 간 동맥을 노출. 위장 동맥을 7-0 실크 합자 2개로 나누고 왼쪽 위 동맥, 비장 동맥 및 체강 트렁크를 노출시합니다.
그런 다음 왼쪽 위 동맥, 비장 동맥 및 동맥 관계 사이에 체강 트렁크를 잘라냅니다. 21.5 게이지 바늘이 장착된 20 밀리리터 주사기를 사용하여 섭씨 4도의 20밀리리터를 포털 정맥에 천천히 주입하십시오. 기증자 간을 준비하기 위하여는, 체강 트렁크, 비장 동맥 및 좌위 동맥의 양면을 잘라 더 큰 동맥 소매 커프를 형성하고 커프를 통해 기증자 일반적인 간 동맥에 1.5 밀리미터 길이 24 게이지 동맥 스텐트를 삽입합니다.
그런 다음 8-0으로 스텐트를 고정합니다. 폴리 프로필렌 합자 및 링거의 젖산 용액으로 스텐트를 플러시. 12 주에서 14 주 된 쥐 수령인의 포털 정맥을 노출 한 후, 수신자 담관을 틸러 분기 아래 0.5 센티미터로 나누고 담관 스텐트를 담관 스텐트를 말단 공통 담관에 삽입합니다. 왼쪽, 중간 및 오른쪽 간 동맥을 노출하고 혈관을 간 동맥 분면에 묶습니다.
넥타이 위의 간 가까이 동맥을 잘라 슈퍼 간 열등한 베나 카바 뒤에 거즈의 긴 얇은 조각을 배치합니다. 3D 인쇄 된 정맥 카바 홀더를 간 정맥 카바 뒤에 놓고 텐노 비 흡수성 모노필라멘트 봉합사를 사용하여 3D 인쇄 된 손잡이의 끝을 함께 바느질하십시오. 느슨하게 간 정맥 과 포털 정맥 사이의 3D 인쇄 홀더 아래에 7-0 실크 합자를 묶고, 3D 인쇄 카바 홀더 아래 오른쪽 신장 정맥 바로 위에 간 정맥 카바를 고정.
포탈 정맥을 유철물 정맥 바로 위와 3D 인쇄 PV 홀더 아래에 고정하십시오. 27 게이지 바늘이 부착된 3밀리리터 주사기를 사용하여 포털 정맥의 분기를 통해 섭씨 37도 링거의 젖산 용액 2밀리리터를 플러시하고 키츠밀러 클램프로 간 위에 슈퍼 간 정맥 카바를 고정시하십시오. 그런 다음 가능한 한 간과 가까운 클램프 아래를 잘라 내고 포탈 정맥과 간 간 정맥 카바 모두에 대해 3D 인쇄 홀더 위로 잘라 받는 사람 간 을 제거합니다.
기증자 간 이식의 경우, 상류 자갈 해부학이 생성 될 수있는 방식으로 수령인의 신체 구멍 내에서 기증자 간을 주의 깊게 지향합니다. 기증자의 포탈 정맥 커프를 받는 사람 포털 정맥에 삽입하고 7-0 실크 넥타이를 조입니다. 슈퍼 간 정맥 카바에서 외상성 클램프를 제거하고 포털 정맥에 대한 미세 혈관 클립을 제거합니다.
따뜻한 혈액으로 간을 다시 perfusing 후, 기증자 간 정맥 카바 커프를 받는 사람 간 정맥 카바에 삽입하고 7-0 실크 넥타이로 혈관을 확보하십시오. 그런 다음 받는 사람 클립을 제거하기 전에 기증자 간 정맥 카바 클립을 제거합니다. 동맥 해부학을 수행하기 위해 스텐트를 넘어 확장되는 기증자로부터 체강 트렁크의 부분을 잘라 내어 받는 사람의 적절한 간 동맥을 고정시하십시오.
끝에 넥타이와 혈관을 둘러싼 여분의 조직을 잘라. 그리고 링거의 젖산 용액을 사용하여 기증자와 수령인 용기의 루멘을 플러시하십시오. 구부러진 바늘을 사용하여, 기증자 간 동맥의 왼쪽 측면을 통해 10-0 에틸론 봉합사를 놓고, 스텐트의 해실 오리피스 위에 2.5 밀리미터, 스텐트의 끝을 통해 밖으로.
용기의 왼쪽에서 동맥의 오른쪽으로 용기 아래 0.5 밀리미터 의 적절한 간 동맥을 트랜스픽스합니다. 기증자 간 동맥의 오른쪽 벽을 통해 안쪽에서 외부로, 원래 스티치와 동일한 스텐트 오리피스에서 멀리, 그리고 수신자에게 적절한 간 동맥을 미끄러 10-0 비흡수성 monofilament의 두 끝에 당겨, 및 간 동맥 스텐트로. 그런 다음 기증자 간 동맥위에 10-0 불흡수성 모노필라멘트를 묶습니다.
수령인과 기증자 담관을 모두 플러시하고 기증자 담관 스텐트를 받는 사람 담관에 삽입합니다. 그런 다음 이전에 받는 사람 담관 주위에 배치 된 넥타이를 조입니다. 본 대표적인 실험에서, 비간 동맥 해부학 쥐 직교 간 이식 모델은 각각 21일과 60일, 수술 후 50 일과 37.5%의 생존율을 입증하였다.
대조적으로, 최적화된 간 동맥 재연결 절차는 장기 생존을 현저하게 증가시켰습니다. 간 동맥 재연결 없이 이식된 동물의 대표적인 부분 집합의 조직학 분석은 6일과 13일 이식 후 중앙 lobular 괴사를 가진 저산소 간 상해의 표시를 밝혔습니다. 광범위한 간 괴사는 이러한 동물에서 알라닌 면역 전달및 아산 아미노 트랜스퍼의 엄청나게 높은 수준과 연관되었다.
대조적으로, 간 동맥 재연결을 가진 이식한 쥐는 간 상해의 아무 표시도 보여주지 않으며 조직된 acini, 소굴, 동맥 및 담관과 가진 일반적인 간 parenchyma 구조물을 밝혔습니다. 또한, 비간 동맥 재연결 모델 쥐로부터 간의 조직학적 분석은 저산소 간 손상 후 반응성 변화를 드러냈다. 시장 담관 증식을 포함 하 여, peri 포털 섬유증 및 염증, 그리고 왜곡 된 간 parenchyma.
이 프로토콜은 간 이식의 많은 면역 학적 및 외과 적 측면을 연구하도록 적응 할 수 있으며 이식과 관련된 새로운 치료 개입을 테스트하기위한 모델로 사용될 수 있습니다.
