중부 표준시는 스위스 국립 과학 재단 (점수 부여 3232230-126233)에 의해 지원되었다. 연구는 Artères 재단 Astellas 재단 유럽과 Boninchi 재단에 의해 지원되었다.

1. 기증자 운영 <ol><li> 200 무게 수컷 쥐 ± 원추 마스크에서 isoflurane과 20g 마취 (유도 3 %, 수술 중 2 %, 1 L / 분, 공기 흐름, FiO2 70 %). </li><li> 대형 중앙 분리대와 가로 개복술을 수행하고 양쪽 상복부의 혈관을 부식. </li><li> 낫 모양의의 인대를 절단하고, suprehepatic 대정 맥에서 왼쪽 횡격막 정맥을 분리. 마지막으로, 두 7-0 실크 ligatures 사이의 횡격막 정맥을 나눕니다. </li><li> 왼쪽 삼각형과 gastro - 간장 인대를 절단. </li><li> 7-0 ligatures (응고가 올바른 대안이다) 사이 hepato - 식도 인대와 동맥을 나누십시오. </li><li> 왼쪽 신장 정맥으로 다운 infrahepatic 대정 맥을 분리. 주변 조직에서 오른쪽 신장 정맥을 분리하고 각각의 근위 및 말초 끝을에서 10-0와 7-0 묶인 사이 나눕니다. </li><li> 7-0 ligatur 간의 권리 suprarenal 정맥을 나누기부드러운 견인하에 절단하여 후부 인대에서 ES와 무료 간. </li><li> gastrosplenic 정맥 격리하고 각각의 근위 및 말초 끝에, 10-0와 7-0 묶인 사이에 그것을 나눕니다. </li><li> 7-0 관계 사이의 적당한 간장 동맥을 나누십시오. </li><li> duodeno - 췌장 정맥 격리하고 10-0과 근위 및 말초 끝에 7-0 봉합사, 각각 사이 나뉩니다. </li><li> 간장 hilum에서 1cm 거리에 작은 절개를 연습하여 일반적인 담즙 덕트에 22G, 3.5 밀리미터 스텐 트를 삽입합니다. 7-0 끈있는 위치에 스텐 트를 고정합니다. </li><li> 음경의 등 부분의 정맥을 통해 정상적인 염분의 1 ML로 희석 헤파린의 10 UI를, 주사. </li><li> 21G 바늘로 베나 포르을 (까지 가능한 hilum에서) Cannulate 부드럽게 감기 닮은 락트 산 (또는 다른 보존 솔루션) 20 ML로 간을 플러시. 동시에, 적절한 outfl 수 있도록 신장 정맥 아래 대정 맥을 절단오우. 간 감기 관류는 하나 이분 사이에 지속한다. </li><li> duodeno - 췌장 정맥 아래 베나 포르 잘라. </li><li> 스텐 트 주위의 묶인에 distally 덕트 일반적인 담즙을 잘라요. </li><li> infrahepatic 대정 맥의 절개를 완료합니다. </li><li> 피임기구에 suprahepatic 대정 맥 탈지 잘라 간장을 제거하십시오. </li><li> 감기 닮은 락트 산으로 가득차과 얼음 패드에 분지 누워 분지로 간을를 놓습니다. </li></ol> 2. 그라 프트 준비 <ol><li> 그 커프스에 베나 포르를 넣고 intima을 폭로 가장자리 주위 혈관을 뒤집다. 7-0 봉합사로 즉석에서 everted 세그먼트를 고정합니다. </li><li> infrahepatic 대정 맥에서 동일한 작업을 반복합니다. </li><li> infrahepatic 대정 맥의 근위 부분에서 마이크로 클램프 (4-6 밀리미터 길이)를 놓습니다. 이 작업은 포털 reperfusion 후 혈액 손실을 방지합니다. </li><li> 간장을 뒤집 두 prolene 8-0 봉합을 삽입외부에서 내부로 suprahepatic 대정 맥의 반대 측면 가장자리에서. </li><li> 0-4에 냉장고에 이식편을 (닮은 락트 산 용액으로 포장되어) 저장 ° C. </li></ol> 3. 받는 동작 <ol><li> 200 무게 수컷 쥐 ± 원추 마스크에서 isoflurane과 20g 마취 (유도 3 %, 수술 중 2 %, 1 L / 분, 공기 흐름, FiO2 70 %)과 따뜻한 패드 계속. 참고,받는 사람 및 기​​증자 가중치는 (± 40g)와 일치해야합니다. </li><li> subcutaneously 정상적인 생리의 10 ML과 개복술 전 piperacillin / tazobactam 근육내의 0.03 g을 주입. </li><li> 중간선 검의 뜻 음모 개복술을 수행합니다. </li><li> 더 나은 간장을 폭로하기 위해 자동 고정 집게로 칼 모양의 과정을 뒤집을. </li><li> 앞부분은 인대를 잘라 두 개의 7-0 관계 사이의 왼쪽 횡격막 정맥을 나눕니다. </li><li> 7-0 ligatures (coagulatio 사이 hepato - 식도 인대와 동맥을 나누기N)은 유효한 대안입니다. 동영상 (기증자 작업과 동일)에 표시되지 않습니다. </li><li> 오른쪽 콩팥 정맥으로 infrahepatic 대정 맥을 아래로 분리. </li><li> 7-0 ligatures 부드러운 견인하에 절단하여 후부 인대에서 무료 간장 ((기증자 작업과 동일) 동영상에 표시되지 않음) 간의 권리 suprarenal 정맥 나누십시오. </li><li> 단지 자사의 사업부 아래 일반적인 담즙 덕트 주변 7-0 봉합사를 놓습니다. 아래 mm 다른 끈 하나를 넣고 사이에 했네요. </li><li> hilum에 간장 동맥을 격리하며 7-0 ligatures 사이 나눕니다. </li><li> 부드럽게 왼쪽 및 오른쪽 포털 가지를 구분합니다. 일반 간장 동맥이나 gastro-지라 정맥을 손상하지 않도록주의하십시오. </li><li> cranially 오른쪽 신장 정맥으로 대정 맥 주위 caval 반지를 놓습니다. 그렇다면 네 추기경 9-0 봉합을 배치하여 고리에 선박 벽을 확보. </li><li> 베나 포르에서 포털 반지와 동일한 작업을 반복합니다. </li&gt; <li> 음경의 등 부분의 정맥을 통해 정상적인 염분의 1 ML로 희석 헤파린의 10 UI를, 주사. </li><li> 0.25 %의 마취 및 100 %의 FiO2를 설정합니다. </li><li> 단지 오른쪽 신장 정맥 위에 infrahepatic 대정 맥을 고정 후 바로 gastro-지라 정맥 위에 베나 포르 클램프. 마지막으로 대정 맥이 다이어프램 최소한 2mm를 반드시 기재해야되는 suprahepatic 클램프. </li><li> 실질 조직에 suprahepatic 대정 맥에 가까이 잘라. </li><li> 왼쪽과 오른쪽 포털 가지를 잘라 사이에 심장을 나눕니다. </li><li> 이전 위치 봉합 중 하나를 절개하지 않도록주의를 기울이고, 실질 조직에 infrahepatic 대정 맥에 가까이 잘라. 간을 제거하고 복강에 이식을 배치. </li><li> 이식편의 suprahepatic 베나의 정맥과받는 사람 사이의 엔드 - 투 - 엔드 교합 (anastomosis)을 수행합니다. 왼쪽에서 오른쪽으로 후부 벽 실행 봉합사로 시작한 다음 오른쪽에서 르의 앞부분은 벽에 진행피트는 끝을 단단히 전에 내부 루멘의 관대한 내리는 것을 허용하기 위해 마지막까지 앞부분은 봉합사에 힘 빼고. </li><li> 포털 링 핸들에 approximator의 꼬리 지점을 삽입, 다음 슬롯에 위치를 찾는 포털 끝단으로 approximator의 두개골 지점의 슬릿으로 그라 프트의 베나 포르를 삽입합니다. </li><li> 정상 식염수에받는 사람의 베나 포르를 플러시하는 동안 approximator을 닫고 끝단이 혈관에 삽입할 수 있습니다. 7-0 원주 타이와의 즉석 주변받는 사람의 베나 포르를 고정합니다. </li><li> approximator를 제거합니다. 순서 suprahepatic 대정 맥과 베나 포르에 클램프를 엽니다 포털 흐름은 지금 내로 데려오됩니다. </li><li> 추가 - 미세 가위로 9-0 ligatures 절삭하여 포털 고리를 제거합니다. </li><li> caval 링 핸들에 approximator의 꼬리 지점을 삽입, 다음 두개의 슬릿에 그라 프트의 infrahepatic 대정 맥을 삽입<html> 슬롯에 위치를 찾는 caval 끝단과 approximator의 지점. </li><li> 정상 식염수에받는 사람의 infrahepatic 대정 맥을 플러시하는 동안 approximator을 닫고 끝단이 혈관에 삽입할 수 있습니다. 7-0 원주 타이와의 즉석 주변받는 사람의 대정 맥을 고정합니다. </li><li> approximator를 제거합니다. 순서대로 이식과받는 사람의 infrahepatic 대정 맥에 microclamps를 엽니다 정맥의 흐름은 지금 내로 데려오됩니다. </li><li> 받는 사람의 일반적인 담즙 덕트의 부분 절개를 수행, 머리를 향해 부드러운 견인을 적용하고, 이전에 그라 프트의 담즙 덕트에 삽입 스텐 트의 자유로운 면을 넣습니다. 원주 7-0 동점으로 스텐 트를 고정합니다. </li><li> 5-0 봉합과 레이어에 의해 동물을 닫습니다. 잠에서 깸에서 무료로 물과 음식을 허용합니다. </li><li> 지역 기관 프로토콜에 따라 효과적인 진통제를 관리할 수 있습니다. 24 H의 최소 기간을 권장합니다. </li></ol>참고 _content &quot;&gt; : 실험 설계 (동맥이 쥐의 간 이식 후 장기 생존을 위해 필요하지 않습니다)에 의해 필요할 때 엔드 - 투 - 엔드 간장 동맥 교합 (anastomosis)이, 수행할 수 있습니다. 4. 대표 결과 설명한 기법이 성공적으로 약 10 훈련 수술 후 저희 팀에 의해 장악 수 있습니다. 그것은 짧은 연수 기간 후 36 연속 루이스 - 투 - 루이스와 다크 Agouti - 투 - 루이스의 transplantations의 100 %, 장기 (&gt; 21일) 생존 (syngeneic 간 이식받는 사람의 수가 12 이상 생명을 유지했습니다 허용 지금 개월). 그리고 중간 알라닌의 transaminase (ALT) - 84 U / L (92.7 51.7) : 172.5 U / L (127.5-240.2) 포스트 syngeneic 이식 1 일 간기능 검사 중간 aspartate의 transaminase (대서양 표준시)를 보여주었다. 평균 anhepatic 단계는 (베나 포르에서 재 관류 그라 프트로 클램핑) 14 살 ± suprahepatic 대정 맥 문합되는 가장 긴 단계에서 2 분, (들 실행uture) 시간 9 ± 2 분. 급속 링커 시스템은 베나 포르에서 1.55 mm - 보어 수갑과 대정 맥에 2.40 mm - 보어 수갑 (200 ± 20g의 무게 수신자)의 위치를​​ 허용했다. 반대로 우리가 Kamada의 기법을 사용하여 이식하려 할 때, 그들은 각각 1.40 mm와 2.16의 밀리 (변형 및 무게에 대해 일치하는 쥐)를 초과할 수 없습니다. 그림 7에 나타난 바와 같이, 빠른 링커 링은 가까이 - 투 - 생리학 hemodynamic 결과에 결과 최소 캘리퍼스와 길이 낭비를있게 스트레칭 최적에받는 사람의 혈관을 유지하도록 설계되었습니다. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig1.jpg" alt="그림 1" /> 그림 1. 반지 대책. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig2.jpg" alt="그림 2" /> 그림 2. Microclamps 대책. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig3.jpg" alt="그림 3" /> 그림 3. 빠른 링커 키트. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig4.jpg" alt="그림 4" /> 그림 4. 빠른 링커 무장. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig5.jpg" alt="그림 5" /> 그림 5. 빠른 링커 마감했다. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig6.jpg" alt="그림 6" /> 그림 6. SHVC 클램프. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig7.jpg" alt="그림 7" /> 그림 7. 클래식 대 빠른 링커 지원 커프스 - 망상 형성의 혈류 역학. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig8.jpg" alt="그림 8" /> 그림 8. 기증자와 수신자의 피부 준비 및 절개.

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	<li>Starzl, T. E., Marchioro, T. L., Porter, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+and+clinical+observation+after+homotransplantation+of+the+whole+liver.">Experimental and clinical observation after homotransplantation of the whole liver.</a> Revue internationale d'hepatologie. 15, 1447 (1965).</li><li>Starzl, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+liver+transplantation.">Evolution of liver transplantation.</a> Hepatology. 2, 614S-636S (1982).</li><li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage.">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47 (1979).</li><li>Kashfi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+various+techniques+of+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.">A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation proceedings. 37, 185-188 (2005).</li><li>Hori, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+and+innovative+techniques+for+liver+transplantation+in+rats:+A+surgical+guide.">Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide.</a> World Journal of Gastroenterology: WJG. 16, 3120 (2010).</li><li>Oldani, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+for+rat+liver+transplantation+using+Quick+Linker+system:+a+preliminary+result.">A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result.</a> Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).</li><li>Nosaka, T., Bowers, J. L., Cay, O., Clouse, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biliary+complications+after+orthotopic+liver+transplantation+in+rats.">Biliary complications after orthotopic liver transplantation in rats.</a> Surg. Today. 29, 963-965 (1999).</li><li>Li, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+incidence+of+biliary+complications+in+rat+liver+transplantation:+can+we+avoid+it.">High incidence of biliary complications in rat liver transplantation: can we avoid it.</a> World J. Gastroenterol. 17, 3140-3144 (2011).</li><li>Peng, Y., Gong, J. P., Yan, L. N., Li, S. B., Li, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+two-cuff+technique+for+orthotopic+liver+transplantation+in+rat.">Improved two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.</a> Hepatobiliary Pancreat. Dis. Int. 3, 33-37 (2004).</li><li>Urata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+survival+in+rat+liver+transplantation+with+extended+cold+preservation:+role+of+portal+vein+clamping+time.">Decreased survival in rat liver transplantation with extended cold preservation: role of portal vein clamping time.</a> Hepatology. 28, 366-373 (1998).</li></ol>

관심의 어떠한 충돌 선언 없습니다.

현재 쥐의 간 이식 모델은 쉽게 설치 할 수 있습니다. 우리의 경험에서 몇 가지 키 포인트는 죽음의 위험을 (≤ 20 %) 최소화하는 데 도움이됩니다. reperfusion에서 처음 세 시간 이내에 발생하는 조기 사망은, 클램핑 긴 포털의 결과로서, 주로 대장 경색으로 인해 수 있습니다. 그것은 따라서 15 분 이상적인 제한 (20 분 여전히 허용) 이내 anhepatic 위상을 유지하는 것이 좋습니다. 중앙 공기 색전증은 또한 갑작스런 사망의 원인이 될 수 있으며, 그것은 이전 문합 모든 혈관을 내리려고 의무이다. 수술 후 첫날 세 사이에 발생하는 죽음은 흔히 간경화 혹은 대정 맥의 혈전증에 의한 있습니다. 하나는 따라서 기증자의 explantation (우리가 약 60 초는 20 ML로 플러시) 전에 플러시하는 적극적인 이식을 피하고 적절한 차가운 보존 (0-4 ° C 닮은 락트 산 솔루션으로 완전한 침수)을 보장해야합니다. 혈전증의 위험intima의 조작을 최소​​화하고 무결성을 보존해서 감소 할 수 있습니다. 우리는 수술 후 anticoagulation의 사용을 권장하지 않습니다. 수술 후 하루 네 아홉 간의 사망자는 종종 박테리아 cholangitis 7 관련이 있습니다. 우리의 경험, 개복술은 일반적인 담즙 덕트 감염의 위험을 최소화하기 위해 충분한 전에 주어진 piperacilline / tazobactam (0.03 g)의 단일 복용을 바탕으로. 죽음 일 10시 드문 행사입니다. 그러나 동맥 흐름의 부재로 인해, 일부 담즙 덕트 문제는 cholastasis 8 볼 수 있습니다. 조사의 필요에 따라 arterialization은 9 간주됩니다. 노트, 최대 24 시간까지 감기 국소 빈혈 시간이 허용 열로 간주 할 수 있습니다. 급속 링커 시스템은 원래 세 커프스 버튼 anastomoses (아주 짧은 anhepatic 위상)으로 간 이식을 수행하도록 설계되었습니다. 그러나 세 즉석 테chnique는 suprahepatic 대정 맥 (SHVC) 커프스를위한 아주 작은 캘리퍼스의 사용을 필요로하고 널리 인해 간 유출 문제 11-14의 위험에 접수되지 않았습니다. 따라서 10 분 정도 단축 따뜻한 국소 빈혈 시간이 필요한 경우에만 빠른 링커 지원 세 커프스 기법을 선호. 대부분의 연구에서 그러나 주입 단계가 15-18분까지 두 즉석 기법, 그리고 더 많은 생리적 SHVC 배수를 사용할 수 있도록 허용합니다. 이 비디오 신문에 나타난 바와 같이, 우리는 정기적만을 주입의 두 번째 부분에서 빠른 링커 시스템을 사용합니다. 몇 가지 여분의 수술 시간이 빠른 링커 핸들을 배치하는 데 필요한 반면, 프로 시저의이 부분은 최소한의 위험과 연관된 쉽게 수갑 삽입에 중요한 anhepatic 위상 감사의 단축을 허용하고 있습니다. 급속 링커 시스템의 다른 장점은 더 그래프트 -받는 선박 정렬하고 더 나은 hemodynamic 결과와 넓은 수갑의 사용에 비해앞에서 설명한 기법 (Kamada 외 의해 설명도 포함 해서요.) 6 (그림 7).

<table border="1"><tbody><tr><td> 도구 / 시약 </td><td> 회사 </td><td> 카탈로그 N. </td><td> 논평 </td></tr><tr><td> 포털 커프스 </td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> 또는 <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">스미스 - medical.com</a> </td><td> 코일 01-96-1729 800/100/420 </td><td> 내경 : 1.55mm 월 : 0.30mm 길이 : 350 mm </td></tr><tr><td> Infrahepatic 대 정맥을 재는 완 </td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> 또는 <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">스미스 - medical.com</a> </td><td> 코일 01-96-1733 800/100/540 </td><td> 내경 : 2.40mm 월 : 0.30mm <br/&gt; 길이 : 3.5 mm </td></tr><tr><td> 일반적인 담즙 덕트 스텐 트 </td><td> 일반적인 22G venflon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 7-0 실크 넥타이 </td><td> <a href="http://georgetiemann.com" target="_blank">georgetiemann.com</a> </td><td> 160-1226-7 / 0 </td><td></td></tr><tr><td> 10-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 9-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 8-0 prolene </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 스트레이트 마이크로 포셉 </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">S-및-T</a>. NET </td><td> FRC-15RM-8 </td><td></td></tr><tr><td> 곡선 마이크로 포셉 </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">의 - 및 - t.net</a> </td><td> FRS-15-RM-8 </td><td></td></tr><tr><td> 해부 바늘 홀더 </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">의 - 및 - t.net</a> </td><td> B-15-8.2 </td><td></td></tr><tr><td> 문합 바늘 홀더 </td><td> <a href="http://rumex.net" target="_blank">rumex.net</a> </td><td> 8-021T </td><td></td></tr><tr><td> 마이크로 클램프 </td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18055-03 </td><td> 6 X 1mm </td></tr><tr><td> 마이크로 클램프의 작은 주걱 </td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18057-14 </td><td></td></tr&gt; <tr><td> Suprahepatic 대 정맥 클램프 </td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> 13.349.14 </td><td></td></tr><tr><td> 퀵 - 링커 링 </td><td> <a href="http://dltchiropody.co.uk" target="_blank">dltchiropody.co.uk</a> </td><td> PAR 10 </td><td> 수정 메스 블레이드 </td></tr><tr><td> 퀵 - 링커 approximator </td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> UD-04-275 </td><td> 수정일 Kocher의 forcep </td></tr></tbody></table>

orthotopic liver transplantation in rats

간 이식 분야의 임상 진행은 크게 동물 모델 1,2에 의해 지원되었습니다. Kamada 외 3.에 의해 1979 년 최초의 orthotopic 쥐의 간 이식의 출간 이후,이 모델은 다양한 제안된 대안 기법 4 불구하고 금을 표준 남아있다. 그럼에도 불구하고, 자사의 광범위한 사용은 그 가파른 학습 곡선 5로 제한됩니다. 이 비디오 논문에서 우리는 Kamada의 두 즉석 기법의 간단하고 쉬운 구축 개정을 보여줍니다. suprahepatic 대정 맥 문합가 실행 봉합으로 수동으로 수행되며, 베나 포르와 infrahepatic 대정 맥의 anastomoses는 빠른 링커 커프스 시스템 6 활용하여 수행됩니다. 급속 링커 키트를 제조하는 것은 별도의 비디오 용지에 표시됩니다.

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Orthotopic Liver Transplantation in Rats

우리는 시궁창에서 orthotopic 간 이식을위한 클래식 두 커프스 기술의 쉬운 설정 개정을 제시.

쥐에게 Orthotopic 간 이식

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Research

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Medicine

29.7K 조회수.  University of Geneva Hospitals. 우리는 시궁창에서 orthotopic 간 이식을위한 클래식 두 커프스 기술의 쉬운 설정 개정을 제시.

비디오: Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and standardized not only for the study of allo-rejection but also between syngeneic strains for examining mechanisms of ischemia-reperfusion injury after lung transplantation. Although the application of the rat and other large animal model 2 contributed significantly to the elucidation of these studies, the scope of those investigations is limited by the scarcity of knockout and transgenic rats. Due to no effective therapies for obliterative bronchiolitis, the leading cause of death in lung transplant patients, there has been an intensive search for pre-clinical models that replicate obliterative bronchiolitis. The tracheal allograft model is the most widely used and may reproduce some of the histopathologic features of obliterative bronchiolitis 3. However, the lack of an intact vasculature with no connection to the recipient's conducting airways, and incomplete pathologic features of obliterative bronchiolitis limit the utility of this model 4. Unlike transplantation of other solid organs, vascularized mouse lung transplants have only recently been reported by Okazaki and colleagues for the first time in 2007 5. Applying the basic principles of the rat lung transplant, our lab initiated the obliterative bronchiolitis model using minor histoincompatible antigen murine orthotopic single-left lung transplants which allows the further study of obliterative bronchiolitis immunopathogenesis6.

Obliterative bronchiolitis is the key impediment to the long-term survival of lung transplant recipients and the lack of a robust preclinical model precludes examining obliterative bronchiolitis immunopathogenesis. Unlike other solid organ transplants, vascularized mouse lung transplantation has only recently been developed. Here we show our independently developed obliterative bronchiolitis model after murine orthotopic single-lung transplantation.

Orthotopic 폐 이식의 Murine 모델에 Obliterative Bronchiolitis의 개발

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

연구

의학

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Small bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with short gut syndrome and failure of parenteral nutrition (irreversible intestinal failure). In specialized centers improved operative and managing strategies have led to excellent short- and intermediate term patient and graft survival while providing high quality of life 1,3. Unlike in the more common transplantation of other solid organs (i.e. heart, liver) many underlying mechanisms of graft function and immunologic alterations induced by intestinal transplantation are not entirely known6,7. Episodes of acute rejection, sepsis and chronic graft failure are the main obstacles still contributing to less favorable long term outcome and hindering a more widespread employment of the procedure despite a growing number of patients on home parenteral nutrition who would potentially benefit from such a transplant. The small intestine contains a large number of passenger leucocytes commonly referred to as part of the gut associated lymphoid system (GALT) this being part of the reason for the high immunogenity of the intestinal graft. The presence and close proximity of many commensals and pathogens in the gut explains the severity of sepsis episodes once graft mucosal integrity is compromised (for example by rejection). To advance the field of intestinal- and multiorgan transplantation more data generated from reliable and feasible animal models is needed. The model provided herein combines both reliability and feasibility once established in a standardized manner and can provide valuable insight in the underlying complex molecular, cellular and functional mechanisms that are triggered by intestinal transplantation. We have successfully used and refined the described procedure over more than 5 years in our laboratory 8-11. The JoVE video-based format is especially useful to demonstrate the complex procedure and avoid initial pitfalls for groups planning to establish an orthotopic rodent model investigating intestinal transplantation.

Small bowel transplantation has become an accepted treatment option for patients with irreversible intestinal failure. Our experimental model of orthotopic small bowel transplantation in rats serves as a reliable tool to address underlying immunologic and inflammatory processes that complicate intestinal transplantation.

쥐 Orthotopic 작은 창자 이식

Small  bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with  short gut syndrome and failure of parenteral nutrition ...

Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. This is largely true, but there are a number of important principles that can reduce the difficulty of these procedures and enhance reproducibility. Orthotopic aortic transplantation is an excellent procedure in which to learn these principles because it involves only two end-to-end anastomoses, but requires good suturing technique and handling of the vessels for consistent success. This procedure begins with the procurement of a length of abdominal aorta from a donor animal, followed by division of the native aorta in the recipient. The procured aorta is then placed between the divided ends of the recipient aorta and sutured into place using end-to-end anastomoses. To accomplish this objective successfully requires a high degree of concentration, good tools, a steady hand, and an appreciation of how easily the vasculature of a mouse can be damaged, resulting in thrombosis. Learning these important principles is what occupies most of the beginner's time when learning microsurgery in small rodents. Throughout this protocol, we refer to these important points. This model can be used to study vascular disease in a variety of different experimental systems1-8. In the context shown here, it is most often used for the study of post-transplant vascular disease, a common long-term complication of solid organ transplantation in which intimal hyperplasia occurs within the allograft. The primary advantage of the model is that it facilitates quantitative morphometric analyses and the transplanted vessel lies contiguous to the endogenous vessel, which can serve as an additional control9. The technique shown here is most often used for mice weighing 18-25 grams. We have accumulated most of our experience using the C57BL/6J, BALB/cJ, and C3H/HeJ strains.

We describe a technique in which a section of the abdominal aorta from a mouse is transplanted orthotopically to just below the renal arteries in an allogeneic or syngeneic recipient. This technique can be useful in studies in which transplantation of large arteries of uniform size is deemed advantageous.

혈관 질병의 연구에 대한 마우스의 Orthotopic 대동맥 이식

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as studies on graft preservation and ischemia-reperfusion injury 1,2, immunological responses 3,4, hemodynamics 5,6, and small-for-size syndrome 7. The rat OLT is among the most difficult animal models in experimental surgery and demands advanced microsurgical skills that take a long time to learn. Consequently, the use of this model has been limited. Since the reliability and reproducibility of results are key components of the experiments in which such complex animal models are used, it is essential for surgeons who are involved in rat OLT to be trained in well-standardized and sophisticated procedures for this model.
While various techniques and modifications of OLT in rats have been reported 8 since the first model was described by Lee et al. 9 in 1973, the elimination of the hepatic arterial reconstruction 10 and the introduction of the cuff anastomosis technique by Kamada et al. 11 were a major advancement in this model, because they simplified the reconstruction procedures to a great degree. In the model by Kamada et al., the hepatic rearterialization was also eliminated. Since rats could survive without hepatic arterial flow after liver transplantation, there was considerable controversy over the value of hepatic arterialization. However, the physiological superiority of the arterialized model has been increasingly acknowledged, especially in terms of preserving the bile duct system 8,12 and the liver integrity 8,13,14.
In this article, we present detailed surgical procedures for a rat model of OLT with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft after ex vivo liver resection. The reconstruction procedures for each vessel and the bile duct are performed by the following methods: a 7-0 polypropylene continuous suture for the supra- and infrahepatic vena cava; a cuff technique for the portal vein; and a stent technique for the hepatic artery and the bile duct.

Orthotopic liver transplantation in rats is an indispensable experimental model for biomedical research. Here we present our surgical procedures for orthotopic rat liver transplantation with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft.

간 간선 재건과 부분 Orthotopic 간 이식의 쥐 모델에 대한 외과 절차

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation waiting list die without receiving an organ transplant or are delisted due to disease progression. Even after a successful transplantation, rejection and side effects of immunosuppression remain major concerns for graft survival and patient morbidity. 
Experimental animal research has been essential to the success of liver transplantation and still plays a pivotal role in the development of clinical transplantation practice. In particular, the porcine orthotopic liver transplantation model (OLTx) is optimal for clinically oriented research for its close resemblance to human size, anatomy, and physiology. 
Decompression of intestinal congestion during the anhepatic phase of porcine OLTx is important to guarantee reliable animal survival. The use of an active porto-caval-jugular shunt achieves excellent intestinal decompression. The system can be used for short-term as well as long-term survival experiments. The following protocol contains all technical information for a stable and reproducible liver transplantation model in pigs including post-operative animal care.

Experimental animal research plays a pivotal role in the development of clinical transplantation practice. The porcine orthotopic liver transplantation model (OLTx) closely resembles human conditions and is frequently used in clinically oriented research. The following protocol contains all information for a reliable porcine OLTx model using an active porto-caval-jugular shunt.

활성 포르토 대정맥 션트를 사용하여 돼지 간 조달 및 동소 이식 이식의 기술

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and translational research in the field of transplantation medicine. A vast array of reagents is available exclusively in this setting, including mono- and polyclonal antibodies for both diagnostic and interventional applications. In addition, a vast number of genotyped, inbred, transgenic, and knock out strains allow detailed investigation of the individual contributions of humoral and cellular components to the complex interplay of an immune response and make the mouse the gold standard for immunological research. 
Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) delineates a novel field of transplantation using allografts to replace "like with like" in patients suffering traumatic or congenital tissue loss. This surgical methodological protocol shows the use of a non-suture cuff technique for super-microvascular anastomosis in an orthotopic mouse hind limb transplantation model. The model specifically allows for comparison between established paradigms in solid organ transplantation with a novel form of transplants consisting of various different tissue components. Uniquely, this model allows for the transplantation of a viable vascularized bone marrow compartment and niche that have the potential to exert a beneficial effect on the balance of immune acceptance and rejection. This technique provides a tool to investigate alloantigen recognition and allograft rejection and acceptance, as well as enables the pursuit of functional nerve regeneration studies to further advance this novel field of transplantation.

This novel model for orthotopic hind limb transplantation in the mouse, applying a non-suture cuff technique for super-microvascular anastomosis, provides a powerful tool for in&#160;vivo mechanistic immunological research related to vascularized composite allotransplantation (VCA).

마우스에서 소성을 뒷다리 이식

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep learning curve. The introduction of the cuff technique for anastomosis of the portal vein (PV) and infrahepatic vena cava (IHVC) has significantly simplified the transplant procedure in rats. However, due to the short anterior wall of the recipients' suprahepatic vena cava (SHVC), the cuff technique is very difficult to use for the reconstruction of the SHVC. Most researchers in this field still use the hand-suture technique for SHVC reconstruction, which makes it the bottleneck step in rat orthotopic liver transplantation. The magnetic anastomosis technique (i.e., magnamosis) is a method of connecting two vessels using the attractive force between two magnets. Our recent study has shown that the magnetic anastomosis technique is superior to the hand-suture technique for SHVC reconstruction in rats. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using the novel magnetic anastomosis technique. In this model, the reconstruction of the PV and IHVC was performed by the standard cuff technique, while the reconstruction of the bile duct (BD) was performed by a stent technique. The hepatic re-arterialization was not performed. The magnetic anastomosis technique made SHVC reconstruction much easier and significantly shortened the anphepatic phase. After a reasonable learning curve, even researchers without advanced microsurgical skills can produce reliable and reproducible results using this rat model of OLT.

The reconstruction of the suprahepatic vena cava (SHVC) remains a difficult step in rat orthotopic liver transplantation. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using a novel magnetic anastomosis technique.

Orthotopic의 쥐 모델 간 이식 Suprahepatic 베 나 정 맥 재건에 대 한 새로운 자석 문 합 기술을 사용 하 여

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart failure. Multiple small-animal models of heart transplantation have been used to study the acute and long-term effects of novel therapies. However, few are tested and demonstrated success in clinical trials. It is of critical importance to evaluate new therapies in a clinically relevant large-animal model for efficient and reliable translation of basic studies&#39;&#160;findings. Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and previously used to investigate novel cardioprotective strategies. This procedure focuses on acute ischemia-reperfusion injury and is a reliable method to investigate novel interventions which have been tested and validated in smaller experimental models, such as the murine model. We demonstrate its usefulness in assessing cardiac performance during the early post-transplantation period and other potential possibilities enabled by the model.

Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and utilized to investigate novel cardioprotective strategies.

정형외 심장 이식의 전 임상 돼지 모델

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation of human liver transplantation due to the absence of arterial reconnection. Described here is a modified transplantation procedure that includes the incorporation of hepatic artery (HA) reconnection, leading to a marked improvement in transplant outcomes. With a mean anhepatic time of 12 min and 14 s, HA reconnection results in improved perfusion of the transplanted liver and an increase in long-term recipient survival from 37.5% to 88.2%. This protocol includes the use of 3D-printed cuffs and holders to connect the portal vein and infrahepatic inferior vena cava. It can be implemented for studying multiple aspects of liver transplantation, from immune response and infection to technical aspects of the procedure. By incorporating a simple and practical method for arterial reconnection using a microvascular technique, this modified rat OLT protocol closely mimics aspects of human liver transplantation and will serve as a valuable and clinically relevant research model.

The goal of this study is to modify the rat orthotopic liver transplant model to better represent human liver transplantation and improve recipient survival. The presented method reestablishes hepatic arterial inflow by connecting the donor liver&#39;s common hepatic artery to the recipient liver&#39;s proper hepatic artery.

직교 간 이식의 쥐 모형에 있는 동맥 재연결 후에 감소된 합병증

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...

Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. However, lung transplantation is limited by a shortage of available donor organs. As such, there is high waitlist mortality. Ex situ lung perfusion (ESLP) has increased donor lung utilization rates in some centers by 15%-20%. ESLP has been applied as a method to assess and recondition marginal donor lungs and has demonstrated acceptable short- and long-term outcomes following transplantation of extended criteria donor (ECD) lungs. Large animal (in vivo) transplantation models are required to validate ongoing in vitro research findings. Anatomic and physiologic differences between humans and pigs pose significant technical and anesthetic challenges. An easily reproducible transplant model would permit the&#160;in vivo&#160;validation of current ESLP strategies and the preclinical evaluation of various interventions designed to improve donor lung function. This protocol describes a porcine model of orthotopic left lung allotransplantation. This includes anesthetic and surgical techniques, a customized surgical checklist, troubleshooting, modifications, and the benefits and limitations of the approach.

This protocol describes a juvenile porcine model of orthotopic left lung allotransplantation designed for use with ESLP research. Focus is made on anesthetic and surgical techniques, as well as critical steps and troubleshooting.

ESLP를 위한 어린 돼지 모델에서의 좌측 폐 정형외과적 이식

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...