당사의 프로토콜은 시스템과 메커니즘에서 유용할 수 있습니다. 그리고 올바른 정보는 육체적 스트레스와 마사지의 효과를 보여줍니다. 우리의 지역 순환 완성 시스템은 훨씬 더 간단합니다.
로컬 삽입에는 기존 메서드가 필요하지 않습니다. 무릎 관절이 연장되고 발목 관절 발바닥이 구부러진 수핀 위치에 있는 양측 뒷다리에 수술 용 테이프를 적용하십시오. L4-5 척추 레벨의 트렁크에 알루미늄 와이어를 놓고 나선형의 각 회전 사이에 5밀리미터 간격이 있는 뒷다리 주위에 나선형 구성으로 와이어를 코일링합니다.
배선에서 탈출할 가능성을 최소화하기 위해 와이어 구성을 수동으로 조정하여 90도 의 고관절을 납치하는 위치에서 고관절을 고정시하십시오. 그런 다음 마우스를 전체 복구 할 때까지 모니터링하여 홈 케이지로 돌아갑니다. 근육 내 위트로네미온 근육 압력을 측정하기 위해 마취 된 마우스를 경향이있는 위치에 배치하고 면도, 다피, 및 후방 종아리의 피부를 반 살균.
메스를 사용하여 소독된 피부에 2밀리미터 절개를 합니다. 그리고 피부 표면에 150 ~ 170도 각도로 위트로테니미즘 근육에 20 게이지 인주거 바늘을 삽입합니다. 다음으로, 바늘의 플라스틱 칼집을 가이드로 사용하여 위트롬혈 근육의 중간 배에 혈압 텔레미터 센서를 배치합니다.
4-O 나일론 봉합사로 피부를 둘러싸습니다. 그런 다음 여러 가지 원통형 장치 가중치를 사용하여 1 분 동안 종아리 근육에 국부 원통형 압축을 적용하십시오. 및 생물학적 신호 분석을 위한 적절한 소프트웨어를 사용하여 근육 내 압력을 모니터링한다.
국부주 주기적 압축 처리를 위해 뒷다리 배선으로부터 마취 마우스를 분리한다. 그리고 동물을 경향이있는 위치에 놓습니다. 무릎 관절이 연장되고 발목 관절이 위쪽으로 향하는 송아지와 함께 발바닥구이 되도록 뒷다리를 조정합니다.
그리고 수직으로 7 일 동안 하루에 30 분 동안 한 hertz에서 종아리 근육 위에 쿠션 패드로 덮여 원통형 무게 단위를 이동합니다. 압축의 각 매일 시합 후 홈 케이지에 동물을 반환하기 전에 마우스 뒷다리를 다시 연결합니다. 실험의 끝에서 후방 종아리 표면을 과소 하 게 하 고 경정 골에서 위 트 륨 근육의 분리를 허용 하는 피부 절개를.
수확된 근육 조직을 최적의 절삭 온도 화합물 용액으로 신속하게 동결합니다. 그리고 유리 슬라이드에 위트로테미즘 근육의 섹션을 얻기 위해 극저온을 사용합니다. 면역조직화학 라벨링의 경우 각 슬라이드의 조직 섹션 주위에 링을 그리기 위해 소수성 펜을 사용하기 전에 실온에서 공기 건조로 섹션을 해동하고 탈수한다.
다음으로 슬라이드를 습도 챔버에 놓습니다. 그리고 각 측면에 100 마이크로리터의 블로킹 버퍼를 추가합니다. 실온에서 30분 후 PBS-T에서 25분간 세척한 슬라이드를 헹구고, 실온에서 하룻밤 동안 관심 있는 1차 항체의 100마이크로리터로 섹션을 표시합니다.
다음날 아침 PBS-T에서 슬라이드를 3회 세척하여 세척당 5분간 세척합니다. 그리고 빛으로부터 보호되는 실온에서 1 시간 동안 적절한 이차 항체로 샘플을 라벨. 인큐베이션이 끝나면, 시연된 대로 신선한 PBS-T로 슬라이드를 3번 씻으십시오.
그리고 어둠 속에서 실온에서 3 분 동안 DAPI의 100 마이크로 리터로 핵을 얼룩지게합니다. 그런 다음 슬라이드를 세 번 더 씻으십시오. 그리고 호환 장착 매체와 커버 슬립샘플을 장착.
조직형 분석의 경우, 형광 현미경의 단계에 슬라이드를 배치하고 적절한 필터에서 20-X 주관적인 아래 샘플을 볼 수 있습니다. 그런 다음, 영상 분석 소프트웨어에서 각 근섬유의 단면 영역을 측정하고 관심있는 실험 마커를 표현하는 세포의 수를 계산합니다. 위장혈증 근섬유의 단면 영역은 뒷다리 고정에 의해 현저히 감소된다.
또한, 면역형 염색 분석은 MCP-1 및 TNF-알파를 발현하는 세포가 고정된 뒷다리의 위장혈증 근육 조직에서 현저히 증가한다는 것을 보여준다. 함께, F4/80으로 긍정적으로 염색된 세포의 증가와 더불어, 뒷다리 고정은 대식세포 축적을 포함하여 국소 선동적인 반응을 관련시키는 송아지 근육 위축을 선동하는 것처럼 보입니다. 원통형 장치의 중량을 변경하여 테스트된 여러 가지 다른 국소 주기적 압축 크기 중, 수은 간 압력파의 50 밀리리터에 대응하는 압축은 근섬유 단면 면적의 고정유도 감소를 가장 효율적으로 완화시키고 위트로크리미즘 근육의 대식파지 축적을 증가시키는 것으로 보인다.
66그램국소 주기적 압축은 7일 동안 하루 30분 동안 1 헤르츠에 적용되어, 위트롬혈근육의 근섬유 단면 영역에서 관찰된 고정화가 유도된 감소를 현저히 완화시킨다. 더, 국소 주기적 압축은 부분적으로 고정을 부드럽게 삼두근 수라 근육의 수축 력의 감소를 유도한다. 또한, 국시주 압축은 F4/80 양성, TNF-알파 양성 및 MCP-1의 증가가 고정된 뒷다리의 위트로크리혈 근육 조직에서 증가한다.
우리의 접근은 환자에 있는 근육 상승을 위한 과학적 기초를 제공하고 예방 절차를 위한 우리의 잠재적인 전략을 제공할 것입니다. 쥐는 물리적 비활동의 제한을 발견했다. 우리의 시스템을 사용하여, 우리는 근육이 환자에 있는 정비사가 결여된 대부분의 환자를 평가하기 시작했습니다.
적당한 지역 산업 방법은 완벽한 고정 유도 근육 위축을 만든다.
