철 레독스 종(Fe(II), Fe(III)의 정량화를 위한 모세관 전기포고증-유도 결합된 혈장 질량 분광법(CE-ICP-MS)의 설정

과도한 철분은 페로토시스로 알려진 지질 과산화에 의한 산화 스트레스 및 세포 사망과 같은 세포 내의 파괴적인 효과를 일으킬 수있는 무료 레독스 활성 철 2 플러스를 초래합니다. 철철과 철철의 정량적 측정은 이러한 해로운 공정에 대한 보다 긴밀한 통찰력을 위한 핵심입니다. 이 CE-ICP-Ms 기술은 철 로독 종 정량화에 모두 필요한 빠른 분석 및 낮은 정량화 한계를 모두 제공합니다.

먼저 자가 흡입량이 적은 분무기를 선택하고 홈메이드 인터페이스를 장착할 적절한 부품을 준비합니다. 하부 3방향 루어 바의 왼쪽 끝을 남성 커넥터에 연결하고 남성 커넥터를 상위 3방향 루어의 중간 연결에 연결하여 두 개의 3방향 여성 루어 커넥터를 남성 콘 루어 커넥터와 연결합니다. 다음으로, 백금 와이어 위에 1센티미터 튜브를 넣고 1센티미터 실리콘 튜브를 사용하여 첫 번째 튜브와 수컷 루어 커넥터의 노즐을 연결합니다.

스크류 회전에 의해 하부 3방향 루어 커넥터의 중간 연결에 어셈블리를 수정합니다. CE 모세관의 출구 위로 1센티미터 튜브를 밀어 넣고 끝에서 8~9cm의 위치에 놓은 다음 실리콘 튜브를 사용하여 남성 루어 커넥터의 노즐에 연결합니다. 상부 3방향 T 커넥터의 막대를 통해 전체 어셈블리를 넣고 나사 회전으로 여성 3방향 루어 커넥터의 수컷 루어 커넥터와 왼쪽 끝을 고정합니다.

그런 다음 남성 루어 커넥터의 노즐에서 25센티미터 실리콘 튜브를 수정하고 하단 3방향 루어 커넥터에서 막대 하단의 전체 어셈블리를 수정합니다. 분무기 의 끝에 5 밀리미터, 1 센티미터 실리콘 튜브를 단단히 밀어. 두 번째 수컷 루어 콘 커넥터가 튜브의 돌출 부위에 연결됩니다.

분무기에서 수컷 콘으로 돌출 된 CE 모세관으로 인터페이스 부분을 이동한 다음 남성 콘과 분무기 모세관의 넓은 부분을 통해 모세관을 조심스럽게 삽입하십시오. 필요한 경우, 좌측 남성 루어를 풀고, 연결된 튜브로 루어를 필요한 위치로 이동하고 다시 설치하여 돌출 모세관의 길이를 조정합니다. 상부 여성 3방향 루어 커넥터는 남성 콘에 단단히 맞아야 합니다.

설정이 완료되면 ICP-Ms로 진행됩니다. 철 3종과 철철 2종의 레독스 종을 위해 보정 곡선이 만들어졌습니다. 검출의 한계는 철 2리터당 3.1 마이크로그램, 철3리터당 3.2 마이크로그램, 선형성은 리터당 최대 150마이크로그램으로 입증되었다.

SH-SY5Y 세포 리세이테의 분석은 다소 높은 전도성 으로 인해 철 레독종에 대한 약간 느린 이동을 보였다. 철 3과 철 2의 측정 된 농도는 리터 당 330 마이크로 그램과 리터 당 84 마이크로 그램, 각각했다. 그 결과 철은 2 대 3 비율로 0.25입니다.

이 프로토콜의 가장 중요한 단계는 장착 된 인터페이스와 분무기 모세관과 관련된 적절한 위치를 통해 돌출 된 CE 모세관의 신중한 삽입입니다. 여기서 제시된 방법은 철 의존분자 공정에 대한 통찰력을 심화하는 유망한 도구가 될 수 있다. 철 2 플러스, 철 3 플러스 정량화가 신경 퇴행성 및 암 질환의 맥락에서 철 매개 치명적인 손상의 위험에 조직을 정확히 파악하는 잠재적 인 바이오 마커 역할을 할 수 있는지 여부를 검증하기 위해 신중하게 설계된 연구가 필요합니다.