우리의 프로토콜의 목적은 바이오매스를 분획하고 한 단계로 리그닌을 추출하는 것입니다. 이 방법을 사용하여, 리그닌은 pH의 조정없이 처리 후 간단한 여과에 의해 복구 될 수 있지만 단순히 증류수를 추가하여. 이 연구의 초점은 공급 원료 분획의 이 결합된 처리의 효과, 리그닌 순도와 수율에 미치는 영향, 그리고 추출된 리그닌에서 분자량 및 화학 작용군에 미치는 영향을 평가하는 것입니다.
심층 적인 유텍 솔루션 마이크로파 공정은 높은 순도로 리그노셀룰로오스 바이오 매스 분획 및 리그닌 회수를 위한 매우 빠르고 효율적이며 비용 경쟁력 있는 기술입니다. 텍스트 원고에 설명된 대로 500 밀리리터 라운드 하단 플라스크에서 깊은 유텍 솔루션을 준비합니다. 그런 다음 5그램의 공급원료, 50밀리리터의 깊은 유텍용액을 넣고, 밀폐된 폴리테트라플루오로틸렌 반응기에 전자레인지에 교반바를 넣습니다.
적절한 캡으로 전자레인지 용기를 닫고 온도 캡을 부착합니다. 턴테이블 가장자리에 놓고 지속적으로 교반하고 전자레인지를 1분 동안 실행합니다. 적절한 장갑을 사용하여 전자 레인지에서 용기를 꺼내 서 혼합물을 식힙니다.
균질성 용매 방지 용매 용액을 준비하고 처리된 공급원료에 이 솔루션의 50 밀리리터를 추가합니다. 유리 필터 도가니를 사용하여 상퍼를 3, 000배 G.Filter에서 5분 동안 혼합물을 원심분리합니다. 남은 셀룰로오스 잔류물을 수집하고 25 밀리리터의 용매 방지 용액 및 원심분리기를 추가하여 세척합니다.
필터링된 리그닌이 풍부한 분획과 여과된 세차스를 500밀리리터 라운드 하단 플라스크에 추가합니다. 회전 증발기는 섭씨 50도, 110밀리바에서 에탄올을 증발시다. 그런 다음 150 밀리리터의 탈온화된 물을 농축 된 주류에 추가합니다.
원심분리로 리그닌을 침전시합니다. 리그닌을 펠릿으로 모으고 증류수 25밀리리터로 4회 세척합니다. 그런 다음 리그닌을 lyophilize하거나 섭씨 40도에서 오븐에서 건조하십시오.
필터 도가니를 550°C의 머플 로에 4시간 동안 놓습니다. 오븐이 섭씨 150도로 식으면 도가니를 제거하고 건조기에 넣고 식힙니다. 그런 다음 무게를 측정합니다.
약 30밀리그램의 리그닌을 보로실리케이트 유리 튜브에 넣습니다. 그런 다음 샘플에 72 %의 황1 밀리리터를 넣고 60 분 동안 섭씨 30도 욕조에 넣습니다. 샘플을 제거하고 100 밀리리터 유리 병으로 옮기습니다.
그런 다음 증류수 28밀리리터를 첨가하여 산을 4%의 농도로 희석하여 60분 동안 121도의 오토클레이브에 유리병을 넣습니다. 그런 다음 오토클레이브에서 병을 제거하고 식힙니다. 산 불용성 리그닌을 분석하려면 진공 상태에서 도가니를 사용하여 가수 분해를 필터링하고 탈이온화 된 물로 유리 병에 남아있는 고체를 수집합니다.
고체가 함유된 도가니를 16시간 동안 105°C의 오븐에 넣음으로써 건조시다. 그런 다음 건조기에서 식히고 샘플을 계량합니다. 도가니를 550°C의 머플 로에 4시간 동안 놓습니다.
건조기에서 건조 한 후 샘플을 무게. 산 수용성 리그닌의 분석을 위해 석영 큐벳을 사용하여 205 나노미터에서 분광계로 가수 분해 오립의 흡수성을 측정합니다. 추출된 리그닌의 화학적 기능을 분석하려면 샘플 없이 배경 단일 채널을 처리합니다.
그런 다음 매개 변수를 조정하고 크리스탈에 샘플의 1 밀리그램을 배치합니다. 샘플 단일 채널을 누를 때 얻은 스펙트럼을 처리합니다. 추출된 리그닌의 분자량을 결정하기 위해, 0.5%의 염화리튬으로 DMF의 3밀리리터에 리그닌 샘플3밀리그램을 용해한다.
용존 된 리그닌을 유리병에 넣고 가드 열로 진행 된 열을 설치합니다. 샘플을 고성능 액체 크로마토그래피 자외선 시스템에 주입합니다. 데이터를 분석한 후 텍스트 원고에 설명된 대로 추출된 리그닌의 분자량을 계산합니다.
보로실리케이트 유리 튜브에 리그닌 50밀리그램 샘플을 계량하고 1마리의 황산 3밀리리터를 추가합니다. 그런 다음 혼합물을 섭씨 100도에서 3 시간 동안 가열하고 식힙니다. 15개의 어금음 암모늄 수산화물의 1밀리리터를 추가하고 pH를 확인하여 중성 또는 알칼리성인지 확인합니다.
각 샘플에 2-데옥시글루코당 1밀리리터를 내부 표준으로 추가합니다. 그런 다음 400 마이크로리터의 혼합 용액을 포함하는 특수 튜브에 이 솔루션의 400 마이크로리터를 추가합니다. 보로하이드라이드 디메틸 설옥산화물 용액 2밀리리터를 추가합니다.
튜브를 닫고 수조에서 섭씨 40도에서 90 분 동안 배양하십시오. 수조에서 튜브를 제거하고 빙하 아세스틱산 0.6 밀리리터, 1-메틸리미다졸레 0.4 밀리리터, 아세트 안수제 약 4밀리리터를 추가합니다. 15분 후 증류수 10밀리리터를 추가합니다. 시원하다.
그리고 디클로로메탄의 약 3 밀리리터를 추가합니다. 2시간 후, 하부 유기상에서 약 1밀리리터를 수집하고 화염 이온화 검출기 모세관 기둥이 장착된 가스 크로마토그래프에 삽입한다. 깊은 유텍용액으로 얻은 리닌 수율은 1개의 옥탈산이 깊은 유텍액 2개와 깊은 유텍액 3개 우레아로 얻은 수율보다 낮았다.
리그닌 순도는 바이오매스의 3가지 사전 치료에 대해 70%를 초과했으며, 알파 잎, Aegagropila 및 아몬드 껍질의 3가지 우레아 전처리를 제외하고는 리그닌 순도가 65%를 초과한 가장 높은 리닌 순도가 90%를 초과하여 깊은 유핵용액1치료제로 수득하였다. Lignin 순도 및 수율 데이터는 주 성분 분석을 실시하였고, 이는 심층 유텍식 용액이 리그닌 순도와 양호하게 상관관계가 되는 하나의 치료법을 보여주었으며, 가장 낮은 수율을 가진 가장 순수한 리그닌이 되는 것을 확인하였다. 깊은 유텍용액3을 사용하여 추출된 리그닌의 당도가 가장 높았고, 그 다음으로 2와 1의 솔루션에서 얻은 설탕 함량이 가장 높았다.
유사하게, 깊은 eutectic 솔루션의 질소 함량 1회 리닌 추출물은 2및 3개의 솔루션으로부터 얻은 것보다 낮았다. 추출 된 리그닌에 있는 설탕의 모형은 또한 D-xylose와 D 포도당을 가장 풍부한 단당류로 묘사하는 특징이었습니다. 추출된 리그난에 존재하는 화학 작용기는 FTIR 분광법에 의해 조사되었다.
3, 500 및 800 상호 센티미터 사이의 다른 리그난의 적외선 스펙트럼은 여기에 제시됩니다. 깊은 유텍 솔루션으로 추출 된 리그닌의 스펙트럼은 3 개의 상업 리그난에 결석한 비응주게이트 및 컨쥬게이드 카보닐 그룹의 스트레칭 진동을 보여줍니다: 원시, 소다 가공 및 알칼리 추출 리그난. 카복실산 신호인 C 이중 결합 O는 전자레인지 지원 깊은 유텍성 용매 처리로 추출 및 용해도 동안 일부 리닌 기능의 결합 가능성을 나타냅니다.
이러한 결과는 현재 저평가되어 리그닌의 순도를 보장하면서 최적의 깊은 유텍성 용매를 결정하는 데 도움이 될 수 있는 지중해 바이오매스로부터 고순도의 부가가치 리그닌을 추출할 가능성을 보여줍니다.
