허혈 심장 질환은 전 세계적으로 주요 사망 원인입니다. 이 절차는 심장에서 허혈 재관류 손상을 유도하기 위해 수행 될 수 있습니다. 이 프로토콜은 LAD를 정확하고 안전하며 일관되게 결찰하는 것입니다.
식염수 젖은 면봉을 준비하려면 멸균 면봉의 작은 부분을 꼬집고 반복적으로 굴려 공 모양을 만듭니다. 면봉을 멸균 0.9 % 식염수에 담그고 여분의 식염수를 짜내십시오. 면봉은 75% 에탄올로 멸균된 깨끗한 상자에 보관하십시오.
고정 고리를 준비하려면 클립과 고무 밴드를 75 % 에탄올로 소독하십시오. 결찰 루프를 준비하려면 7-0 실크 스티치의 중간을 테이퍼 형 비 스웨이지 수술 바늘의 반원 크기 3 스프링 눈에 놓습니다. 스네어 루프 컨트롤러를 준비하려면 가위를 사용하여 5mm 폴리에틸렌 10 튜브를 자릅니다.
다음으로, 실험을 위해 8주 된 Sprague Dawley 수컷 쥐를 마취시키고 꼬리와 뒷발을 꼬집어 반사 신경을 확인합니다. 그런 다음 가위를 사용하여 성문 아래의 두 연골 고리 사이의 조직을 열고 3cm 폴리에틸렌 50 튜브를 삽입하여 기관 내 튜브 역할을 합니다. 기관내관을 인공호흡기에 연결합니다.
가슴을 만지고 manubrium과 흉골 각도를 찾으십시오. 그런 다음 흉골 각도와 연결되는 왼쪽 갈비뼈를 식별하십시오. 갈비뼈 아래의 늑간 공간을 확인하십시오 A. 미세한 팁 집게를 사용하여 늑간 공간에 가까운 피부를 부드럽게 들어 올립니다.
그런 다음 가위를 사용하여 흉골체의 왼쪽으로 약 5mm 지점에서 피부 장력선을 따라 1cm 비스듬한 절개를 만듭니다. 가위를 사용하여 절개 부위에서 피부와 근육층을 분리합니다. 그런 다음 왼쪽 전방 흉벽 바깥쪽의 근육층을 구부러진 클립으로 아래쪽으로 걸어 아래 갈비뼈를 노출시킵니다.
갈비뼈 A 아래의 갈비뼈 B를 확인한 후 갈비뼈 연골 중앙에서 뭉툭한 가위로 갈비뼈 B를 자릅니다. 출혈이 발생하면 식염수 젖은 면봉으로 상처를 몇 초 동안 부드럽게 만지고 압축하십시오. 다음으로, 4개의 구부러진 클립을 늑간근과 갈비뼈에 걸어 흉벽을 4방향으로 부드럽게 펼치고 직사각형 수술창을 만들어 갈비뼈 B.Hook의 절단부에서 흉부를 조심스럽게 엽니다.
집게로 얇은 심낭을 제거하여 심장을 노출시킵니다. 그런 다음 폐동맥과 왼쪽 귓바퀴 사이의 왼쪽 주요 관상 동맥 (LMCA)의 첫 번째 가지를 확인하십시오. 수술용 바늘을 사용하여 실수로 왼쪽 귓바퀴에 구멍이 뚫리는 것을 방지하기 위해 LAD의 왼쪽에서 오른쪽 방향으로 LMCA의 첫 번째 분기 바로 원위 위치에 실크 스티치를 삽입하고 통과시켜 열린 결찰 루프를 만듭니다.
심장 표면을 덮고 있는 체액이나 혈액 때문에 LAD가 보이지 않는 경우 심장 표면을 부드럽게 면봉으로 닦아 관상 동맥을 시각화합니다. 개방 루프의 한쪽에 있는 실크 봉합사의 두 끝을 다른 쪽의 원에 삽입하여 스네어 루프를 형성합니다. 그런 다음 루프를 닫기 전에 스네어 루프의 실크 봉합사의 두 끝을 준비된 스네어 컨트롤러에 삽입합니다.
실크 봉합사를 따라 스네어 루프 컨트롤러를 밀면서 실크를 부드럽게 늘려 스네어 루프를 닫습니다. 1시간 동안 심근 허혈을 유도하기 위해 LAD의 관상동맥 흐름을 중단시킨다. 루프가 단단히 묶이면 실크를 잡고 켈리 집게로 스네어 루프 컨트롤러의 위치를 고정합니다.
켈리 집게의 다른 쪽 끝을 수술대에 놓습니다. LAD 결찰 중 식염수 젖은 면봉으로 수술 창을 덮습니다. 켈리 집게를 연 다음 2시간 동안 관상동맥 흐름의 재관류를 위해 올가미 루프 컨트롤러를 해제합니다.
Evans blue를 사용한 LAD 결찰 품질 검증이 표시됩니다. 관상 동맥 관류가있는 심근은 비 관류 부위와 비교하여 청색으로 염색되었으며, 이는 적색으로 유지되었다. 위험 영역의 낮은 변동 또는 연구 동물 중 AAA 백분율은 LAD 결찰의 정확한 위치를 나타냅니다.
또한, 경색 크기는 대조군 및 처리군에서 AAR에 대한 경색 면적의 비율로 추정하였다. 치료 그룹의 경색 크기 백분율은 통제된 LAD 결찰 그룹보다 낮아집니다. 이 기술은 연구자들이 허혈성 심장 질환에 대한 새로운 치료법을 모색할 수 있는 길을 열어줍니다.
