虚血再灌流研究のための左前下行冠動脈結紮術:技術改変と品質管理によるモデル改良

虚血性心疾患は、世界中の主要な死因です。この手順は、心臓に虚血再灌流障害を誘発するために実行できます。このプロトコルは、LADを正確、安全、一貫して結紮するためのものです。

生理食塩水濡れ綿球を準備するには、滅菌綿のごく一部をつまんで繰り返し転がしてボールを形成します。コットンボールを滅菌済みの0.9%生理食塩水に浸し、余分な生理食塩水を絞り出します。コットンボールは、75%エタノールで滅菌したクリーンボックスに保管してください。

保持フックを準備するには、クリップと輪ゴムを75%エタノールで滅菌します。結紮ループを準備するには、7-0シルクステッチの中央を、先細りの非スエージ手術針の半円サイズの3スプリングアイに配置します。スネアループコントローラーを準備するには、ハサミを使用して5ミリメートルのポリエチレン10チューブを切ります。

次に、実験のために、8週齢のSprague Dawley雄ラットに麻酔をかけ、尾と後ろ足をつまんで反射神経を確認します。次に、ハサミを使用して声門の下の2つの軟骨リングの間の組織を開き、気管内チューブとして機能する3センチメートルのポリエチレン50チューブを挿入します。気管内チューブを人工呼吸器に接続します。

胸に触れて、マニュブリウムと胸骨の角度を見つけます。次に、胸骨角に接続する左側の肋骨を特定します。肋骨の下の肋間腔を特定する A.先端の細い鉗子を使用して、肋間腔に近い皮膚をそっと持ち上げます。

次に、はさみを使用して、胸骨体の左側約5ミリメートルのポイントから皮膚の張力線に沿って1センチメートルの斜めの切開を作成します。ハサミを使用して切開部から皮膚層と筋肉層を分離します。次に、左前胸壁の外側の筋肉層を曲げたクリップで下に引っ掛けて、下の肋骨を露出させます。

肋骨Aの下の肋骨Bを特定した後、肋骨軟骨の中央から鈍いハサミで肋骨Bを切ります。出血が発生した場合は、生理食塩水で濡れた綿球で傷口に数秒間そっと触れて圧迫します。次に、4つの曲がったクリップを肋間筋と肋骨に引っ掛けて胸壁を4方向にやさしく広げ、肋骨Bの切り口から胸郭を丁寧に開く長方形の手術窓を作り、左肺と心膜を覆う隣接組織に別の曲がったクリップで優しく引っ掛けて、施術中の偶発的な組織損傷を防ぎます。

鉗子で薄い心膜を取り除くことによって心臓を露出させます。次に、肺動脈と左耳介の間の左主冠状動脈(LMCA)の最初の枝を特定します。外科用針を使用して、LMCAの最初の枝のすぐ遠位の場所でLADの下にシルクステッチを挿入してLADの左側から右側に向かって挿入して通過させることにより、開いた結紮ループを作成し、誤って左耳介に穴を開けないようにします。

心臓の表面を覆っている液体または血液のためにLADが見えない場合は、心臓の表面をそっと拭いて冠状動脈を視覚化します。開いたループの片側にあるシルク縫合糸の両端を反対側の円に挿入して、スネアループを形成します。次に、ループを閉じる前に、スネアループのシルク縫合糸の両端を準備したスネアコントローラーに挿入します。

スネアループコントローラーをシルク縫合糸に沿ってスライドさせ、シルクを静かに伸ばしてスネアループを閉じます。LADの冠状動脈の流れを停止して、心筋虚血を1時間誘発します。ループがしっかりと結ばれたら、シルクを持ってケリー鉗子でスネアループコントローラーの位置を固定します。

ケリー鉗子のもう一方の端を手術台に置きます。LAD結紮中に生理食塩水で湿った綿球で手術窓を覆います。ケリー鉗子を開き、スネアループコントローラーを解放して、冠状動脈の流れを2時間再灌流します。

エバンスブルーによるLADライゲーション品質の検証が示されています。冠動脈灌流を伴う心筋は、赤色のままであった非灌流領域と比較して青色に染色された。リスクのある領域の変動が低いこと、または研究動物間のAAAパーセンテージは、LAD結紮の正確な位置を示しました。

また、梗塞サイズは、対照群及び治療群におけるAARに対する梗塞面積の割合として推定した。治療群の梗塞サイズの割合は、制御されたLAD結紮群よりも低下している。この技術は、研究者が虚血性心疾患に対する新しい治療アプローチを探求するための道を開きます。