L’ischémie cardiaque est l’une des principales causes de décès dans le monde. Cette procédure peut être effectuée pour induire une lésion d’ischémie-reperfusion dans le cœur. Ce protocole consiste à ligaturer le DAL avec précision, sécurité et cohérence.
Pour préparer des boules de coton humides salines, pincez une petite portion de coton stérile et roulez-la à plusieurs reprises pour former une boule. Trempez les boules de coton dans une solution saline stérile à 0,9% et extrayez l’excès de solution saline. Conservez les boules de coton dans une boîte propre stérilisée à 75% d’éthanol.
Pour préparer les crochets de maintien, stérilisez les clips et les élastiques avec de l’éthanol à 75%. Pour préparer une boucle de ligature, placez le milieu d’un point de soie 7-0 dans l’œil à ressort de taille demi-cercle trois d’une aiguille chirurgicale effilée non écrasée. Pour préparer un contrôleur de boucle de caisse claire, coupez un tube en polyéthylène 10 de cinq millimètres à l’aide de ciseaux.
Ensuite, pour l’expérience, anesthésiez un rat mâle Sprague Dawley âgé de huit semaines et vérifiez les réflexes en pinçant la queue et les pattes postérieures. Ensuite, ouvrez le tissu entre les deux anneaux cartilagineux sous la glotte à l’aide de ciseaux et insérez un tube en polyéthylène 50 de trois centimètres pour agir comme un tube endotrachéal. Connectez le tube endotrachéal à un ventilateur.
Touchez la poitrine et trouvez le manubrium et l’angle sternal. Ensuite, identifiez la côte latérale gauche qui se connecte à l’angle sternal. Identifier l’espace intercostal sous la côte A.Utilisez des pinces à pointe fine pour soulever doucement la peau près de l’espace intercostal.
Ensuite, utilisez des ciseaux pour créer une incision oblique d’un centimètre le long des lignes de tension cutanée à partir du point d’environ cinq millimètres à gauche du corps sternal. Séparez les couches de la peau et des muscles de l’incision à l’aide de ciseaux. Ensuite, accrochez les couches musculaires à l’extérieur de la paroi thoracique antérieure gauche vers le bas avec des clips pliés pour exposer les côtes en dessous.
Après avoir identifié la côte B sous la côte A, couper la côte B avec un ciseau émoussé au milieu du cartilage de la côte. Touchez doucement et comprimez la plaie avec une boule de coton humide saline pendant plusieurs secondes en cas de saignement. Ensuite, accrochez les quatre clips pliés au muscle intercostal et aux côtes pour écarter doucement la paroi thoracique dans quatre directions et créez une fenêtre chirurgicale rectangulaire pour ouvrir soigneusement le thorax à partir de la coupe de la côte B.Crochetez doucement contre le poumon gauche et les tissus adjacents couvrant le péricarde avec un autre clip plié pour éviter les dommages tissulaires accidentels pendant la procédure.
Exposez le cœur en retirant le péricarde mince avec une pince. Ensuite, identifiez la première branche de l’artère coronaire principale gauche, ou LMCA, entre l’artère pulmonaire et l’oreillette gauche. À l’aide d’une aiguille chirurgicale, créez une boucle de ligature ouverte en insérant et en passant le point de soie sous le DAL à un endroit immédiatement distal à la première branche du LMCA dans la direction allant de la gauche vers le côté droit du DAL pour éviter de perforer accidentellement l’oreillette gauche.
Si le DAL est invisible à cause du liquide ou du sang recouvrant la surface du cœur, frottez doucement la surface du cœur pour visualiser les artères coronaires. Insérez les deux extrémités de la suture en soie d’un côté de la boucle ouverte dans le cercle de l’autre côté pour former une boucle de caisse claire. Insérez ensuite les deux extrémités de la suture en soie de la boucle de caisse claire dans le contrôleur de caisse claire préparé avant de fermer la boucle.
Faites glisser le contrôleur de la boucle de caisse claire le long de la suture de soie tout en étirant doucement la soie pour fermer la boucle de caisse claire. Arrêter le flux coronaire du LAD pour induire une ischémie myocardique pendant une heure. Une fois la boucle bien attachée, tenez la soie pour fixer la position du contrôleur de la boucle de caisse claire avec une pince Kelly.
Placez l’autre extrémité de la pince Kelly sur la table chirurgicale. Couvrez la fenêtre chirurgicale avec des boules de coton humides salines pendant la ligature LAD. Ouvrez la pince Kelly, puis relâchez le contrôleur de la boucle de caisse claire pour la reperfusion du flux coronaire pendant deux heures.
La validation de la qualité de la ligature LAD avec le bleu Evans est montrée. Le myocarde avec perfusion coronaire était coloré en bleu par rapport à une région non perfusée, qui restait rouge. Une faible variation dans la zone à risque, ou pourcentage d’AAA parmi les animaux à l’étude, indiquait l’emplacement précis de la ligature du DAL.
De plus, la taille de l’infarctus a été estimée comme étant le rapport entre la zone de l’infarctus et le RAA dans les groupes témoins et traités. Le pourcentage de taille de l’infarctus du groupe de traitement est inférieur à celui du groupe de ligature LAD contrôlé. Cette technique ouvre la voie aux chercheurs pour explorer de nouvelles approches thérapeutiques contre les cardiopathies ischémiques.