전층 연골 결손의 쥐 모델 개발 및 평가

이 프로토콜은 임상 FTCD의 발생 및 발달을 모방할 뿐만 아니라 FTCD에 대한 치료적 치료를 평가하기 위한 신뢰할 수 있는 동물 모델을 제공합니다. 그러나 이 기술은 수행하기 쉽고 부상 직후 성장 관찰이 가능합니다. 이 기술은 임상 연골 결함을 성공적으로 모방하여 연골 결함의 병리학적 과정을 연구하고 해당 치료 약물을 개발하기 위한 플랫폼을 제공할 수 있습니다.

이 방법은 외상성 연골 결함, 즉 외상 후 골관절염을 연구하는 데 적용될 수 있습니다. 이 기술을 처음 시도할 때 경골과 비골을 90도 각도로 구부려 대퇴골과의 달팽이관을 완전히 노출시키고 드릴 비트를 연골 표면에 수직으로 유지하는 것이 중요합니다. 마취 된 쥐를 앙와위 자세로 수술대에 올려 놓는 것으로 시작하십시오.

쥐 위에 멸균 드레이프를 놓고 면도하고 소독 한 무릎 관절을 노출시킵니다. 11번 메스 칼날을 사용하여 무릎 관절 중앙에 1cm 수직 절개를 합니다. 그리고 내측 슬개골 가장자리를 따라 관절낭과 대퇴사두근 힘줄을 절단합니다.

다음으로 슬개골을 바깥쪽으로 돌리고 경골과 비골을 90도 각도로 구부리고, 대퇴골 과두 달팽이관을 노출시킵니다. 1.6mm 원형 드릴 비트를 사용하여 대퇴골 과두 달팽이관의 전체 두께 0.1mm 깊이 연골 결손을 만듭니다. 0.9% 생리식염수에 적신 면봉으로 수술 부위를 닦고 슬개골을 교체합니다.

그 후, 무릎을 펴신 자세로 유지하고, 비흡수성 4-0 봉합사를 이용하여 층별로 절개한 부위를 봉합한다. 쥐의 기계적 금단 역치 또는 MWT"를 측정하려면 철망 플랫폼의 단일 플라스틱 챔버에 동물을 놓습니다. 철망 받침대를 테이블 위 50cm에 놓습니다.

적응 30분 후에 MWT 측정을 시작합니다. 다음으로, 쥐의 뒷발의 화분 표면에 Von Frey 필라멘트를 수직으로 누릅니다. 그런 다음 발 중앙 부분의 가장 두꺼운 부분을 피하면서 브러시를 2 초 동안 구부립니다.

발 철수 또는 핥기와 같은 긍정적인 반응이 나타날 때까지 자극 무게를 4g에서 점진적으로 늘립니다. 모델링 3일 후, 모델 그룹의 쥐는 가짜 그룹에 비해 감소된 MWT를 보였다. 모델 그룹에서 통각과민을 시사합니다.

모델 그룹의 MWT는 17 일 후에도 낮게 유지되었습니다. 통증 민감도의 길이를 나타냅니다. 가짜 그룹의 조직병리학적 염색은 투명한 관절 및 온전한 연골 표면, 연골 세포의 균일한 분포 및 II형 콜라겐의 높은 발현을 보여주었습니다.

대조적으로, 모델 그룹은 함몰된 연골 표면, 손실된 연골세포, 매트릭스 메탈로프로테이나제 MMP13의 발현 증가 및 II형 콜라겐의 발현 감소를 보여줍니다. 기억해야 할 가장 중요한 것은 봉합하기 전에 슬개골을 줄여야 한다는 것입니다.