비침습적 미세투석 기술을 통한 쥐 심장의 동적 연속 혈액 추출

쥐 심장의 동적 연속 채혈 기술은 혈액 성분을 분석하여 심혈관 질환 및 관련 질병을 이해하는 데 매우 중요합니다. 전통적인 샘플링 방법과 비교하여 이 기술은 생체 내, 실시간, 동적이라는 장점이 있으며 비침습적이며 생물학적 미세 분자가 없고 외국 테스트를 위한 역가 샘플 전처리가 없습니다. 이 기술은 심혈관 질환에만 적용할 수 있는 것이 아니라 고상 액체 크로마토그래피 및 질량 분석법과 결합된 혈액 바이오마커를 검출하여 질병 진단 및 치료에도 효과가 있어야 합니다.

이 방법은 심근 경색, 무호흡 및 죽상 동맥 경화증과 같은 심혈관 질환을 조사하는 데 사용할 수 있습니다. 또한 심인성 폐부종과 폐 및 뇌색전증에도 적용됩니다. 실험 준비를 마친 후 투석 장치 프로브의 입구를 주사기 바늘, 튜브 어댑터 및 FEP 튜브로 부착합니다.

항응고제 구연산염 포도당 용액을 배관 시스템에 관류하여 미세 투석 배관 시스템의 개통성을 확인합니다. 연조직과 혈관주위 근막을 무딘 절개하여 오른쪽 경정맥을 노출시키는 절개를 합니다. 4-0 수술 봉합사를 사용하여 심장 말단부의 오른쪽 경정맥에 분리 가능한 슬립 매듭을 만들어 혈류를 일시적으로 차단합니다.

그런 다음 심장 근처의 오른쪽 경정맥을 절개하십시오. 바늘 모양의 카테터 스타일릿을 쥐 심장의 근위 끝을 향한 오른쪽 경정맥에 삽입합니다. 혈액 미세 투석 프로브를 카테터에 삽입하고 카테터 탐침의 비스듬한 절개를 따라 안과 겸자로 프로브를 이식합니다.

유도 카테터 스타일릿을 제거하고 프로브의 반투과막을 오른쪽 경정맥에 완전히 담그십시오. 오른쪽 경정맥의 혈류를 회복하기 위해 심장의 말단부에서 분리 가능한 슬립 매듭을 풉니다. 그런 다음 4-0 수술 봉합사를 사용하여 프로브를 오른쪽 경정맥으로 결찰합니다.

깨어 있는 쥐를 자유롭게 움직이는 탱크에 넣고 프로브를 미세 투석 시스템에 연결합니다. 이어서, 항응고제 시트레이트 덱스트로스 용액을 1시간 동안 분당 2마이크로리터의 속도로 관개하여 프로브 투석막을 평형화시킨다. 미세 투석 혈액 샘플을 수집하여 섭씨 4도 분수 용기에 임시로 보관하십시오.

프로브가 오른쪽 경정맥에 있는지 재확인하려면 쥐를 해부하십시오. 오른쪽 경정맥에서 미세 투석 프로브를 제거하고 초순수에 넣습니다. 프로브를 파이프라인에 연결하고 초순수로 밤새 헹구어 파이프와 프로브에 남아 있는 염분을 철저히 씻어냅니다.

정상적인 혈액 샘플은 밝은 빨간색으로 나타났고 저산소 샘플에서는 잠재적인 혈전이 관찰되었습니다. 혈액 미세 투석 기술을 통해 얻은 샘플은 무색, 투명 및 투명했습니다. 멤브레인의 파괴와 슬라이딩 또는 변위의 프로브를 방지하려면 프로브를 쥐 경정맥에 배치하고 담글 때 주의를 기울여야 합니다.

미세투석 기술을 통해 얻은 혈액 샘플은 다양한 질병의 바이오마커와 약물 및 희귀 대사산물의 혈액 분포를 분석하는 데 사용할 수 있습니다.