외상성 뇌 손상의 출혈 및 염증을 연구하기 위한 Stab-Wound Mouse 모델

TVI의 출혈을 멈추고 염증을 억제하는 방법을 개발하는 데 관심이 많아 바늘만으로 간단하게 TVI 종괴 모델을 만들 수 있는 프로토콜을 확립했습니다. 우리의 찌르는 상처 TVI 모델은 출혈과 회색 활성화를 윤활하기 때문에 유익합니다. 우리의 프로토콜은 다른 기술에 비해 세 가지 주요 장점이 있습니다.

특정 장비나 도구가 필요하지 않습니다. 쉽고 빠르게 할 수 있으며 상처가 너무 작아서 마우스의 행동에 영향을 미치지 않기 때문에 누구나 높은 재현성으로 이 작업을 수행할 수 있습니다. 우리 연구실은 외상성 뇌 손상을 복구하는 동안 뉴런, 회색 세포, 신경교 세포, 기생충의 통신에 중점을 둘 것입니다.

의사 소통은 수리에서 중요한 역할을 합니다. 그러나 아직까지는 완전히 이해되지 않았습니다. 우리의 프로토콜은 커뮤니케이션을 분석하는 데 매우 유용합니다.

시작하려면 마취된 마우스를 종이 타월 위에 복부 쪽에 놓습니다. 마우스가 발가락 핀치 테스트로 깊이 마취되었는지 확인합니다. 베타딘과 70% 에탄올 스크럽을 각각 3회씩 번갈아 가며 수술 부위를 소독합니다.

이제 뭉툭한 집게로 후두부를 잡고 1-1.5mm 너비로 절개하여 두개골이나 장기를 손상시키지 않고 후두골을 노출시킵니다. 그런 다음 절개 부위를 부드럽고 천천히 열어 두개골을 통해 대뇌 피질과 소뇌 사이의 경계를 관찰합니다. 마우스 개두술을 수행하려면 바늘로 후두골의 오른쪽 반구에 작은 구멍을 만듭니다.

바늘을 부드럽게 회전하여 찔린 상처 니들링의 삽입 지점을 만들고 뇌 실질이 손상되지 않도록 주의하십시오. 칼에 찔린 상처의 경우 삽입 지점에서 적절한 바늘을 삽입하고 꼬리 축을 따라 대뇌 피질을 찌릅니다. 마지막으로 반원형 바늘로 나일론 3-0 봉합사를 사용하여 피부 절개 부위를 봉합합니다.

시술 후 상처는 현미경으로 확인되었습니다. IGG 유출은 부상 하루 후 최고조에 달했고, 그 후 점진적으로 회복되었으며, 3일, 5일, 7일째에 염색 강도가 감소했습니다. Evan의 푸른 염료가 뇌 실질로 누출된 것은 손상 직후 발생했으며 농도가 1시간 만에 최고조에 달했습니다.

염료 농도는 1 일과 3 일 후에 점차적으로 감소했습니다. IBA1 양성 미세아교세포와 GFAP 양성 성상교세포의 최대 축적은 각각 손상 후 5일과 3일에 발생했으며, 그 존재는 7일 감소했다. 종양괴사인자 알파(tumor necrosis factor alpha), 인터루킨 6인자(interleukin six), 인터루킨 1 베타(interleukin one beta)를 포함한 염증성 사이토카인은 손상 후 1일에 가장 높은 mRNA 발현을 보인 반면, 변형 성장 인자 베타 1은 손상 후 3일에 최고조에 달했습니다.