A cromatografia em coluna de sílica gel é uma técnica para separar compostos usando uma coluna preenchida com sílica gel como fase estacionária. Este método depende de diferenças na polaridade dos compostos. Com base em suas polaridades, os compostos se movem entre a fase estacionária (sílica gel) e a fase móvel (o solvente), formando bandas discretas na coluna.
Os componentes polares tendem a se ligar fortemente à sílica gel, fazendo com que se movam lentamente pela coluna. Em contraste, os compostos não polares se ligam fracamente à sílica gel e geralmente se deslocam rapidamente porque têm uma afinidade maior pela fase móvel.
O fator de retardo (R) quantifica a quantidade de um composto presente em uma fase móvel em comparação com a quantidade total do composto na fase móvel e estacionária. Matematicamente, R é definido como a distância que uma substância se moveu do ponto de amostra original dividida pela distância que a fase móvel se moveu. Essa proporção ajuda a determinar o quão bem os componentes interagem com a fase estacionária em relação à fase móvel.
Sob as mesmas condições, R é igual ao valor Rf observado na cromatografia de camada delgada (TLC). Para determinar R, os cientistas geralmente realizam a TLC para avaliar as polaridades dos compostos presentes.
O fator de retenção k é outro conceito fundamental na cromatografia. Ele indica quanto tempo uma amostra permanece na fase estacionária em comparação com a fase móvel. Matematicamente, ele pode ser expresso como a razão entre o volume de retenção ajustado e o volume de retenção ou a razão entre o tempo de retenção ajustado e o tempo de retenção.
O volume de retenção ajustado é a diferença entre o volume de retenção total e o volume de retenção. O volume de retenção é definido como o volume da fase móvel necessário para eluir o composto da coluna completamente.
Quando a constante de distribuição é independente da concentração do composto, o fator de retenção é a razão entre a quantidade do composto na fase estacionária e a quantidade do composto na fase móvel.
Se a fração do composto na fase móvel for considerada como R, então 1−R é a fração do composto na fase estacionária.
Do Capítulo 11:
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