11.9 : Хроматография на сухой колонке: обзор

Хроматография на сухой колонке — это метод разделения соединений с использованием колонки, заполненной силикагелем в качестве неподвижной фазы. Этот метод основан на различиях в полярности соединений. В зависимости от своей полярности соединения перемещаются между неподвижной фазой (силикагелем) и подвижной фазой (растворителем), образуя дискретные полосы в колонке.

Полярные компоненты, как правило, прочно связываются с силикагелем, заставляя их медленно перемещаться через колонку. Напротив, неполярные соединения слабо связываются с силикагелем и часто перемещаются быстро, поскольку имеют большее сродство к подвижной фазе.

Фактор замедления (R) количественно определяет, сколько соединения присутствует в подвижной фазе по сравнению с общим количеством соединения как в подвижной, так и в неподвижной фазе. Математически R определяется как расстояние, на которое вещество переместилось от исходного пятна образца, деленное на расстояние, на которое переместилась подвижная фаза. Это отношение помогает определить, насколько хорошо компоненты взаимодействуют с неподвижной и подвижной фазами.

При тех же условиях параметр R равен значению R_f, наблюдаемому в тонкослойной хроматографии (ТСХ). Чтобы определить R, ученые часто проводят ТСХ, чтобы оценить полярности присутствующих соединений.

Фактор удерживания k — еще одно важное понятие в хроматографии. Он показывает, как долго образец остается в неподвижной фазе по сравнению с подвижной фазой. Математически его можно выразить как отношение скорректированного объема удерживания к объему удерживания мертвого времени или как отношение скорректированного времени удерживания к времени удерживания мертвого времени.

Скорректированный объем удерживания — это разница между общим объемом удерживания и объемом удерживания мертвого времени. Объем удерживания мёртвого времени определяется как объем подвижной фазы, необходимый для полного элюирования соединения из колонки.

Когда константа распределения не зависит от концентрации соединения, фактор удерживания — это отношение количества соединения в неподвижной фазе к количеству соединения в подвижной фазе.

Если фракцию соединения в подвижной фазе рассматривать как R, то 1−R — это фракция соединения в неподвижной фазе.