Para começar, prenda o rato em um cone de contenção de plástico, feche a grande extremidade do cone em torno da base da cauda. Certifique-se de que o animal esteja confortável e que a respiração seja irrestrita durante todo o procedimento. Mergulhe a cauda em água morna por cerca de um minuto para dilatar a veia e seque a cauda com um papel toalha.
No contenção, posicione o animal virado para baixo com a cauda deitada em uma almofada de aquecimento. Para selecionar a veia caudal apropriada para amostragem, gire todo o animal para o lado direito ou esquerdo. Use o terço terminal da cauda para punção dos vasos sanguíneos, uma vez que os vasos se tornam mais superficiais nesta zona.
Limpe a cauda com lenços de etanol 70% no local da perfuração e coloque-a na borda da almofada de aquecimento, criando um ângulo no terço terminal da cauda. Isso traz a veia para a superfície e cria mais espaço para a coleta da amostra. Para a amostragem de sangue, mova o êmbolo para frente e para trás na seringa várias vezes para suavizar a retirada e, em seguida, puxe o êmbolo para criar pressão negativa na seringa.
Fixe a cauda na almofada de aquecimento usando o dedo indicador e médio não dominante. Posicionar o dedo médio proximalmente e o indicador distalmente com o local da punção entre esses dois dedos. Deslize a seringa de insulina contra o dedo indicador com o olho da agulha apontando para cima até que seja inserida na veia.
Isso cria um ângulo de 35 graus entre a agulha e a cauda. Uma vez que a agulha tenha entrado na veia, o sangue fluirá para a seringa. Retire lentamente o êmbolo da seringa a uma taxa constante para recolher o volume desejado.
Retire a seringa da cauda e deixe formar uma gota de sangue no lado de punção da cauda. Aspirar esse sangue para coletar mais alguns microlitros de sangue, no caso de um procedimento não estéril. Aplique pressão no local da punção para parar o sangramento e limpe a área com um novo lenço com álcool.
Depois de remover o rato do cone, devolva-o à sua gaiola. As taxas de sucesso com os métodos de punção da veia caudal foram comparadas com a taxa de sucesso do método de punção da veia peniana sob anestesia. Curiosamente, sob anestesia, a veia caudal tornou-se muito pouco confiável e teve uma taxa de sucesso de apenas 25%As taxas de sucesso mostraram resultados quase semelhantes para a punção da veia caudal em ratos conscientes e a punção da veia peniana sob anestesia.
A coleta de sangue foi realizada em menos de seis minutos na punção da veia caudal sem anestesia, e o método de punção da veia peniana sob anestesia, enquanto o método de punção da veia caudal sob anestesia levou mais de oito minutos devido a múltiplas falhas.
