Para começar, fixe os membros do animal anestesiado com fita adesiva. Use um barbeador elétrico para raspar o pelo da parte inferior do abdômen e ao redor do meato uretral. Sob o microscópio cirúrgico, use uma tesoura reta romba de Metzenbaum para criar uma incisão de um a dois centímetros na linha média da pele pélvica abdominal.
Incise a fáscia e os músculos na linha média para expor a bexiga através da ferida incisional. Assim que a bexiga estiver visível através da ferida, retraia todos os órgãos ou tecidos circundantes, conforme necessário, para obter uma visão clara do campo cirúrgico. Em seguida, segure a cúpula da bexiga e use uma sutura de monofilamento não absorvível 5-0 com uma agulha de ponta cônica para colocar um cordão de bolsa.
Usando uma microtesoura, crie uma pequena cistostomia dentro do cordão da bolsa e faça um furo até que a urina saia. Agora, segure a ponta redonda do cateter e insira-a no orifício. Depois que a ponta do tubo passar pelo orifício, suture o cordão da bolsa ao redor do tubo.
Depois disso, puxe suavemente o tubo para fora até que a ponta seja sentida sob a sutura. Em seguida, infunda lentamente um mililitro de solução salina da outra extremidade do tubo para distender a bexiga e verifique se há vazamento ao redor do cateter. Assim que a solução salina sair da uretra, retire a solução salina para descomprimir a bexiga.
Use uma tesoura cirúrgica para estender a incisão abdominal até o assoalho pélvico. Em linha com a bexiga, mova os músculos e membranas para os canais pudendos e localize a uretra e o músculo do esfíncter externo. Usando a agulha contendo o eletrodo, puncione a pele bilateralmente a um centímetro de distância do meato uretral.
Em seguida, segure cuidadosamente a ponta do gancho com uma pinça e puxe suavemente a agulha para longe da pele. Usando a ponta do eletrodo, prenda cuidadosamente o músculo do esfíncter uretral externo bilateralmente. Use o monofilamento não absorvível 3-0 para suturar os músculos pélvicos e abdômen e a pele.
Para fixar os eletrodos no lugar, aplique uma fina camada de cola de cianoacrilato na pele por onde os eletrodos saem. Em seguida, use uma micropipeta de 0,5 a 10 microlitros para retirar o líquido do acelerador para secar a cola. Em seguida, adicione o líquido acelerador para garantir uma reação adesiva adequada.
Prepare um barco de pesagem de poliestireno invertido, com 4,5 centímetros de comprimento, largura e profundidade. Corte-o em forma de triângulo com uma base de quatro centímetros para colocar o meato uretral do camundongo neste espaço. Coloque o molde de base descartável sob o espaço para coletar a urina.
Em seguida, reposicione o mouse em uma posição de bruços e mova-o cuidadosamente para uma placa personalizada equipada com uma máscara de gás. Certifique-se de que o meato uretral esteja posicionado corretamente dentro do sulco. Aperte suavemente a cabeça e os membros do mouse com fita adesiva e coloque a placa em uma almofada de aquecimento até que o mouse recupere a consciência total.
