Para começar, coloque de três a seis embriões descorionados em uma placa de Petri contendo meio Danios suplementado com 0,02% de tricaína. Uma vez que os embriões estejam anestesiados, transfira-os para um prato de fundo de vidro de 35 por 15 milímetros com o mínimo de meio. Adicione rapidamente 300 a 400 microlitros de agarose de baixo ponto de fusão a 1% contendo tricaína para criar uma cúpula.
Usando uma pinça, posicione os embriões de forma que fiquem retos em contato com o vidro com o lado ventral voltado para cima. Em seguida, deposite aproximadamente 0,5 microlitros de esferas magnéticas em cima da agarose. Em seguida, adicione uma gota de meio Danios contendo 0,02% de tricaína por cima da agarose e das contas.
Com base na amostra e no tamanho do coração, selecione a conta apropriada e use uma pinça para colocá-la em cima da gema do embrião. Crie uma lesão ou orifício na gema no centro da gema usando um braço da pinça. Coloque o cordão na lesão e empurre-o suavemente anteriormente até atingir o pólo venoso.
Se a sucção por si só for insuficiente para mover o cordão, empurre-o suavemente em direção ao átrio, aplicando pressão suficiente para guiá-lo para dentro da cavidade pericárdica. Depois de enxertar as esferas magnéticas nos embriões, adicione um a dois mililitros de meio Danios contendo PTU ao prato de fundo de vidro. Em seguida, usando uma pinça, quebre suavemente a agarose de baixo ponto de fusão e remova cuidadosamente os embriões.
Finalmente, usando uma pipeta Pasteur, transfira os embriões para uma nova placa de Petri contendo meio Danios com PTU e permita que eles se recuperem e se desenvolvam a 28,5 graus Celsius. A conta magnética foi posicionada corretamente dentro do átrio do coração do peixe-zebra, permitindo fluxo sanguíneo desobstruído e nenhuma hemorragia observada com as paredes do coração mantidas.
