This work was supported by an NSF/ARRA award (IOS 0920357) and an award from the NIH (5R21MH098463).

1. celular Preparação (Dia -2 a 0) <ol><li> Dividir células HEK293 1: 5, utilizando 0,05% de solução de tripsina-EDTA e incubar em Meio de Crescimento a 37 ° C com 5% de CO 2 até os 60 - 80% confluentes (2-3 dias). Para cada condição, as células de cultura em 2 x 100 mm pratos. </li></ol> 2. transfecção celular (Dia 1) <ol><li> Transfectar células HEK293 com o plasmídeo que codifica a Fc-fusão usando um reagente de transfecção, tais como Lipofectamina. Podem também ser utilizados métodos alternativos, que resultam em maior eficiência de transfecção comparável. </li><li> Voltar células transfectadas para incubadora por 24 horas. </li></ol> 3. celular Propagation (Dia 2) <ol><li> Pré-aqueça o Meio de Crescimento, sem soro fetal de bovino (-FBS) a 37 ° C. </li><li> Lavar pratos 2x com 10 ml de Meio de Crescimento -FBS, e retornar as placas para a incubadora a 37 ° C durante 1 hora. </li><li> Lavar a culturas pratos mais uma vez com 10 ml de Meio de Crescimento -FBS, para um total de 3 lavagens. </li><li> INCUbate as células HEK293 transfectadas a 37 ° C por mais 48 horas sem FBS antes de coletar mídia. </li></ol> 4 Bead Aggregation (dia 4) <ol><li> Para a coleta de mídia a partir de placas de cultura, transferir mídia de cada par de pratos para 50 ml tubos cônicos e rotação a 500 xg durante 5 min para sedimentar os restos celulares. </li><li> O meio filtrante de tubo de 50 ml em um filtro centrífugo usando uma seringa de 30 ml e 0,45 mm filtro de seringa. </li><li> Girar filtros centrífugos a 4.000 xg e 4 ° C até que o volume de meio de cultura concentrado é de cerca de 500 mL (aproximadamente 15 min). Repita até que todos os meios de cultura foi adicionado e concentrada. </li><li> Adicionar 1,5 uL de proteína G contas magnéticas para 1 ml de tampão de ligação arrefecido em gelo, em um tubo de microcentrífuga de 1,5 ml para cada amostra, em lugar de um íman e remover o tampão. Imediatamente adicionar o meio de cultura concentrado de proteína G esferas magnéticas. </li><li> Rodar os tubos a 4 ° C durante 2 horas. </li><li> Pltubos ace em um ímã e remover a mídia. Lavar rapidamente contas duas vezes com o frio do gelo 1 ml tampão de ligação e, em seguida ressuspender contas em 300 mL tampão de ligação. </li><li> Dividir contas ressuspenso em 2 tubos de 150 mL em cada tubo, e em seguida, adicione 1,5 mL de mM CaCl2 ou 200 EDTA 200 mM para o &quot;cálcio&quot; e condições &quot;não cálcio&quot;, respectivamente. </li><li> Transferir 100 uL de cada condição para uma depressão bem deslizar e recolher micrografias usando um microscópio de luz transmitida (Figura 2). Recolha de imagens a partir de 5 campos de visão de cada experiência em cada ponto de tempo desejado. </li></ol> Análise de Dados 5. <ol><li> Usando ImageJ, ou software de análise de imagem comparável, abra um dos cinco conjuntos de dados de imagem usando o Import / sequência de imagens ... no menu suspenso Arquivo. Estes irão ser aberto como uma pilha de imagens. </li><li> Na caixa de diálogo ... Imagem / Propriedades, altere o iunidades mago pixels e definir Pixel Largura e Altura Pixel é 1.0. </li><li> Converta as imagens para binário usando o / Threshold Ajuste ... comando no menu suspenso Imagem. Definir o limite de incluir pixels que contribuem para esferas ou agregados de contas, mas que exclui fundo e pequenas partículas. Aplicar a todas as imagens da pilha. </li><li> Na caixa de diálogo Medidas Set, marque as caixas área e Pilha Posição. </li><li> Executar análise Partículas ... menu suspenso na Análise. Isto vai gerar uma lista de partículas identificados, incluindo o seu tamanho (área) e a imagem em que foram identificadas. </li><li> Repetir este processo por que experimento e condição experimental. </li></ol>

<ol>
	<li>Chen, X., Gumbiner, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paraxial+protocadherin+mediates+cell+sorting+and+tissue+morphogenesis+by+regulating+C-cadherin+adhesion+activity.">Paraxial protocadherin mediates cell sorting and tissue morphogenesis by regulating C-cadherin adhesion activity.</a> J. Cell Biol. 174 (2), 301-313 (2006).</li><li>Grumet, M., Friedlander, D. R., Edelman, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evidence+for+the+binding+of+Ng-CAM+to+laminin.">Evidence for the binding of Ng-CAM to laminin.</a> Cell Adhes. Commun. 1 (2), 177-190 (1993).</li><li>Hatta, K., Nose, A., Nagafuchi, A., Takeichi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cloning+and+expression+of+cDNA+encoding+a+neural+calcium-dependent+cell+adhesion+molecule:+its+identity+in+the+cadherin+gene+family.">Cloning and expression of cDNA encoding a neural calcium-dependent cell adhesion molecule: its identity in the cadherin gene family.</a> J. Cell Biol. 106 (3), 873-881 (1988).</li><li>Hirano, S., Nose, A., Hatta, K., Kawakami, A., Takeichi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Calcium-dependent+cell-cell+adhesion+molecules+(cadherins):+subclass+specificities+and+possible+involvement+of+actin+bundles.">Calcium-dependent cell-cell adhesion molecules (cadherins): subclass specificities and possible involvement of actin bundles.</a> J. Cell Biol. 105 (6 Pt 1), 2501-2510 (1987).</li><li>Nose, A., Nagafuchi, A., Takeichi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Expressed+recombinant+cadherins+mediate+cell+sorting+in+model+systems.">Expressed recombinant cadherins mediate cell sorting in model systems.</a> Cell. 54 (7), 993-1001 (1988).</li><li>Nose, A., Takeichi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+cadherin+cell+adhesion+molecule:+its+expression+patterns+associated+with+implantation+and+organogenesis+of+mouse+embryos.">A novel cadherin cell adhesion molecule: its expression patterns associated with implantation and organogenesis of mouse embryos.</a> J. Cell Biol. 103 (6 Pt 2), 2649-2658 (1986).</li><li>Schreiner, D., Weiner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Combinatorial+homophilic+interaction+between+gamma-protocadherin+multimers+greatly+expands+the+molecular+diversity+of+cell+adhesion.">Combinatorial homophilic interaction between gamma-protocadherin multimers greatly expands the molecular diversity of cell adhesion.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 107 (33), 14893-14898 (2010).</li><li>Takeichi, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+correlation+between+cell+adhesive+properties+and+some+cell+surface+proteins.">Functional correlation between cell adhesive properties and some cell surface proteins.</a> J. Cell Biol. 75, 464-474 (1977).</li><li>Sivasankar, S., Brieher, W., Lavrik, N., Gumbiner, B., Leckband, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+molecular+force+measurements+of+multiple+adhesive+interactions+between+cadherin+ectodomains.">Direct molecular force measurements of multiple adhesive interactions between cadherin ectodomains.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 96 (21), 11820-11824 (1999).</li><li>Sivasankar, S., Gumbiner, B., Leckband, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Direct+measurements+of+multiple+adhesive+alignments+and+unbinding+trajectories+between+cadherin+extracellular+domains.">Direct measurements of multiple adhesive alignments and unbinding trajectories between cadherin extracellular domains.</a> Biophys. J. 80, 1758-1768 (2001).</li><li>Sivasankar, S., Zhang, Y., Nelson, W. J., Chu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterizing+the+initial+encounter+complex+in+cadherin+adhesion.">Characterizing the initial encounter complex in cadherin adhesion.</a> Structure. 17 (8), 1075-1081 (2009).</li><li>Zhang, Y., Sivasankar, S., Nelson, W. J., Chu, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Resolving+cadherin+interactions+and+binding+cooperativity+at+the+single-molecule+level.">Resolving cadherin interactions and binding cooperativity at the single-molecule level.</a> Proc. Natl. Acad. Sci. U. S. A. 106 (1), 109-114 (2009).</li><li>Yasuda, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Activity-induced+protocadherin+arcadlin+regulates+dendritic+spine+number+by+triggering+N-cadherin+endocytosis+via+TAO2beta+and+p38+MAP+kinases.">Activity-induced protocadherin arcadlin regulates dendritic spine number by triggering N-cadherin endocytosis via TAO2beta and p38 MAP kinases.</a> Neuron. 56 (3), 456-471 (2007).</li><li>Chappuis-Flament, S., Wong, E., Hicks, L. D., Kay, C. M., Gumbiner, B. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+cadherin+extracellular+repeats+mediate+homophilic+binding+and+adhesion.">Multiple cadherin extracellular repeats mediate homophilic binding and adhesion.</a> J. Cell Biol. 154 (1), 231-243 (2001).</li><li>Emond, M. R., Biswas, S., Blevins, C. J., Jontes, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+complex+of+Protocadherin-19+and+N-cadherin+mediates+a+novel+mechanism+of+cell+adhesion.">A complex of Protocadherin-19 and N-cadherin mediates a novel mechanism of cell adhesion.</a> J. Cell Biol. 195 (7), 1115-1121 (2011).</li><li>Biswas, S., Emond, M. R., Jontes, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+clustered+protocadherins+Pcdhalpha+and+Pcdhgamma+form+a+heteromeric+complex+in+zebrafish.">The clustered protocadherins Pcdhalpha and Pcdhgamma form a heteromeric complex in zebrafish.</a> Neuroscience. 219, 280-289 (2012).</li><li>Blevins, C. J., Emond, M. R., Biswas, S., Jontes, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+expression,+alternative+splicing,+and+adhesive+properties+of+the+zebrafish+delta1-protocadherins.">Differential expression, alternative splicing, and adhesive properties of the zebrafish delta1-protocadherins.</a> Neuroscience. 199, 523-534 (2011).</li><li>Morishita, H., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Structure+of+the+cadherin-related+neuronal+receptor/protocadherin-alpha+first+extracellular+cadherin+domain+reveals+diversity+across+cadherin+families.">Structure of the cadherin-related neuronal receptor/protocadherin-alpha first extracellular cadherin domain reveals diversity across cadherin families.</a> J. Biol. Chem. 281, 33650-33663 (1074).</li><li>Wojtowicz, W. M., Flanagan, J. J., Millard, S. S., Zipursky, S. L., Clemens, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Alternative+splicing+of+Drosophila+Dscam+generates+axon+guidance+receptors+that+exhibit+isoform-specific+homophilic+binding.">Alternative splicing of Drosophila Dscam generates axon guidance receptors that exhibit isoform-specific homophilic binding.</a> Cell. 118 (5), 619-633 (2004).</li><li>Drees, F., Reilein, A., Nelson, W. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cell-adhesion+assays:+fabrication+of+an+E-cadherin+substratum+and+isolation+of+lateral+and+Basal+membrane+patches.">Cell-adhesion assays: fabrication of an E-cadherin substratum and isolation of lateral and Basal membrane patches.</a> Methods Mol. Biol. 294, 303-320 (2005).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

A adesão celular é um elemento essencial da vida multicelular e é mediada por uma ampla gama de proteínas de superfície da célula. Destes, as propriedades adesivas são detalhados compreendido por apenas uma proporção relativamente pequena. Aqui, nós descrevemos um protocolo simples, rápido para investigar a capacidade adesiva homofica de ectodomï¿½ios secretadas fundido com um epítopo marcador conveniente. Esta abordagem tem um número de vantagens importantes. Em primeiro lugar, as linhas de células est...

A adesão célula-célula é essencial para o desenvolvimento e a integridade dos organismos multicelulares e é mediada por uma série diversa de moléculas da superfície celular. Muitas dessas moléculas de adesão foram identificados e caracterizados, embora muitos continuam a ser descobertos. Vários métodos são utilizados para pesquisar as propriedades das moléculas de adesão celular (CAMs), incluindo ensaios de separação de células, ensaios de agregação de células 1-8 e métodos biofísicos, tais como microscopia de força atómica e força espectroscopia superfície 9-12. A complexidade do mesmo simplificada em sistemas in vitro utilizando linhas celulares torna difícil determinar as propriedades adesivas de uma CAM putativo. Tipicamente, uma molécula é considerada uma CAM se que induz a agregação de células, quando transfectados para uma linha de células não adesivas. No entanto, é evidente que esta não é uma evidência directa de actividade adesiva. Por exemplo, facilitar a entrega da superfície celular ou a estabilidade de umCAM também resultaria em aumento da agregação de células 1,13. Além disso, um verdadeiro CAM pode falhar para mediar a agregação de células, se a linha de células não possui outros co-factores necessários para a entrega de superfície celular ou de estabilização. Para evitar essas complicações, ensaios mais diretas podem ser empregadas que são baseados na idéia de que as interações adesivas deve ser uma propriedade bioquímica intrínseca do domínio extracelular. Enquanto contas foram inicialmente utilizados para caracterizar Ng-CAM 2, estes ensaios foram alargadas, a fim de investigar a adesão 12,14,15 mediada por caderina. Usando fusão das fusões C-caderina-Fc ectodomínio, o laboratório Gumbiner mostrou que múltiplas repetições caderina contribuem para interacções homofílicas 14. Usando ensaios de agregação de talão comparáveis, E-caderina e N-caderina de adesão foram também caracterizados 12,15, como tem um número de protocadherins 1,15-18 e isoformas Dscam de Drosophila <em&gt; 19. Descrevemos aqui um ensaio relativamente simples e rápido para a caracterização da actividade adesiva de secretadas, ectodomï¿½ios marcadas no epitopo de CAMs homofica putativos (Figura 1). Temos utilizado este ensaio, principalmente para caracterizar membros da superfamília caderina.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="630">
	<tbody>
		<tr height="43">
			<td height="43" style="height:43px;width:212px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:203px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:216px;">Company</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:212px;">pFc-N1 plasmid</td>
			<td style="width:203px;">To be submitted</td>
			<td style="width:216px;">Addgene</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:212px;">HEK293 cells</td>
			<td style="width:203px;">CRL-1573</td>
			<td style="width:216px;">American Type Culture Collection</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:212px;">DMEM</td>
			<td style="width:203px;">10-013-CV</td>
			<td style="width:216px;">Mediatech - Corning</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:212px;">Fetal Bovine Serum (FBS)</td>
			<td style="width:203px;">F2442</td>
			<td style="width:216px;">Sigma</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:212px;">100X Pen-Strep (10,000 U/ml)</td>
			<td style="width:203px;">15140-122</td>
			<td style="width:216px;">Life Technologies</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:212px;">0.05% Trypsin-EDTA</td>
			<td style="width:203px;">25300054</td>
			<td style="width:216px;">Life Technologies</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:212px;">Lipofectamine 2000</td>
			<td style="width:203px;">11668030</td>
			<td style="width:216px;">Life Technologies</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:212px;">Dynabeads &#8211; Protein G</td>
			<td style="width:203px;">10003D</td>
			<td style="width:216px;">Life Technologies</td>
		</tr>
		<tr height="22">
			<td height="22" style="height:22px;width:212px;">Bovine Serum Albumin</td>
			<td style="width:203px;">A3294</td>
			<td style="width:216px;">Sigma</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:212px;">Depression slides</td>
			<td style="width:203px;">71878-06</td>
			<td style="width:216px;">Electron Microscopy Sciences</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="43" rowspan="2" style="height:43px;width:212px;">Amicon Ultra-15 Centrifugal Filter Unit with Ultracel-10 membrane</td>
			<td rowspan="2" style="width:203px;">UFC901024</td>
			<td rowspan="2" style="width:216px;">Millipore</td>
		</tr>
		<tr height="22">
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:212px;">0.45mm syringe filter</td>
			<td style="width:203px;">83.1826</td>
			<td style="width:216px;">Sarstedt</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:212px;">Dynamag-2 Magnet</td>
			<td>12321D</td>
			<td style="width:216px;">Life Technologies</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:43px;width:212px;">Fiji (ImageJ) Image Analysis Software</td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:216px;">http://fiji.sc/Fiji</td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:212px;"></td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:216px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:212px;"></td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:216px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:212px;"></td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:216px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:212px;"></td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:216px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:212px;">Table of Buffers/Solutions</td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:216px;"></td>
		</tr>
		<tr height="20">
			<td height="20" style="height:20px;width:212px;"></td>
			<td style="width:203px;"></td>
			<td style="width:216px;"></td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:212px;">Growth Media</td>
			<td style="width:203px;">DMEM + 10% FBS + Pen-Strep</td>
			<td style="width:216px;">Filter sterilize and store at 4&#176;C.</td>
		</tr>
		<tr height="41">
			<td height="41" style="height:41px;width:212px;">Growth Media &#8211; FBS</td>
			<td style="width:203px;">DMEM + Pen-Strep</td>
			<td style="width:216px;">Filter sterilize and store at 4&#176;C.</td>
		</tr>
		<tr height="61">
			<td height="61" style="height:61px;width:212px;">Binding Buffer</td>
			<td style="width:203px;">50 mM Tris, pH 7.4, 100 mM NaCl, 10 mM KCl, 0.2% BSA</td>
			<td style="width:216px;">Vortex until dissolved, keep on ice.</td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

bead aggregation assays for the characterization of putative cell adhesion molecules

A adesão célula-célula é fundamental para a vida multicelular e é mediada por uma série diversa de proteínas da superfície celular. No entanto, as interacções adesivas para muitas destas proteínas são mal compreendidos. Aqui apresenta-se um método simples e rápido para a caracterização das propriedades adesivas das moléculas de adesão de células homofílicas putativos. As células em cultura são HEK293 transfectadas com o plasmídeo de ADN que codifica uma secretado, o ectodomínio de epitopo marcado com uma proteína da superfície celular. Usando grânulos funcionalizados específicos para o marcador de epitopo, solúvel, da proteína de fusão segregado é capturado a partir do meio de cultura. Os grânulos revestidos podem, então, ser utilizada directamente em ensaios de agregação de grânulos ou em grânulo fluorescente triagem ensaios para testar quanto à adesão homofílica. Se desejado, a mutagénese pode ser usada para elucidar os ácidos aminados ou domínios específicos necessários para a aderência. Este ensaio requer apenas pequenas quantidades de proteínas expressas, não requer a produção de linhas celulares estáveis, e pode ser Accomplished em 4 dias.

<html> Um exemplo experiência é apresentado na Figura 2, que mostra a agregação de grânulo dependente de cálcio pelo ectodomínio de N-caderina fundido com Fc (NcadEC-Fc). Na ausência de cálcio, esferas exibem pouca ou nenhuma tendência para se agregar e não há aumento do tamanho do agregado, com o tempo (Figura 1A, C). Na presença de cálcio, contas revestidas com NcadEC-Fc mostra a agregação robusta, com tamanho de agregado crescente ao longo do tempo (Figura 1B, ...

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Bead Aggregation Assays for the Characterization of Putative Cell Adhesion Molecules

Here we present a simple, rapid method for characterizing the intrinsic adhesive properties of putative cell adhesion molecules. The secreted, epitope-tagged ectodomain of a cell adhesion molecule is captured from the culture medium on small, uniform functionalized beads. These beads can then be used immediately in simple bead aggregation assays.

Conta Agregação ensaios para a caracterização dos putativos Moléculas de Adesão Celular

Cell-cell adhesion is fundamental to multicellular life and is mediated by a diverse array of cell surface proteins. However, the adhesive interactions ...

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10.4K visualizações.  Ohio State University. Here we present a simple, rapid method for characterizing the intrinsic adhesive properties of putative cell adhesion molecules. The secreted, epitope-tagged ectodomain of a cell adhesion molecule is captured from the culture medium on small, uniform functionalized beads. These beads can then be used immediately in simple bead aggregation assays.